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毒死蜱单克隆抗体的制备方法技术

技术编号:2582810 阅读:266 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
毒死蜱单克隆抗体的制备方法是一种针对特定农药的单克隆抗体的制备方法,其制备方法首先通过亲核取代反应在毒死蜱的吡啶环上第6位氯原子上引入一个偶联桥,并与大分子载体蛋白结合制备人工完全抗原;将毒死蜱人工完全抗原免疫小鼠制备脾细胞悬液,在聚乙二醇作用下融合小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0,经杂交瘤抗体检测和多次克隆后得到能稳定分泌毒死蜱抗体的阳性杂交瘤细胞,且分泌抗体同属IgG1亚类;利用抗体效价较高的细胞株分泌的单克隆抗体,建立毒死蜱间接竞争ELISA试验,最低检测限可达0.03μg/mL,该抗体与与杀螟硫磷、对硫磷和马拉硫磷等有机磷类农药没有交叉反应,特异性强,可用于毒死蜱的免疫检测。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种毒死蜱单克隆抗体的制备方法,其特征在于通过亲核取代反应在毒死蜱的吡啶环上第6位氯原子上引入一个偶联桥,并与大分子载体蛋白结合制备人工完全抗原;将毒死蜱人工完全抗原免疫小鼠制备脾细胞悬液,在质量百分浓度48%~52%聚乙二醇作用下小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,经杂交瘤抗体检测和多次克隆后得到的阳性杂交瘤细胞能稳定分泌毒死蜱抗体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:尹立红浦跃朴梁戈玉李云晖刘冉吴巍
申请(专利权)人:东南大学
类型:发明
国别省市:84[中国|南京]

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