山香圆叶及其制剂的质量控制方法技术

山香圆叶及其制剂的的质量控制方法，其特征在于至少含有以没食子酸作为指标成分之一的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，尤其是以山香圆叶及其制剂中没食子酸及一种以芹菜素为苷元的苷(CSP-A2)为检测指标的定性和定量质量控制方法。
技术介绍
山香圆叶为省沽油科植物山香圆Turpinia arguta Seem.或Turpinia indochinensis的新鲜或干燥叶，具有清热泄火，利咽消肿的功效，到目前为止，研究文献确切报道的其化学成分主要有2α-羟基熊果酸、2α、19α-二羟基熊果酸、19α-羟基熊果酸、2α-过氧羟基熊果酸、熊果酸、α-香树脂醇、肉豆蔻酸、胡萝卜苷等(方乍浦，等，山香圆叶化学成分的研究，中草药，1987.18(7)6)，多为小极性部分。已上市的山香圆叶制剂(如山香圆颗粒、山香圆片等)多采用以山香圆叶对照药材薄层色谱鉴别的质量控制方法，研究文献有对其熊果酸含量测定和薄层色谱鉴别及以芦丁为对照的分光光度法测定总黄酮含量(毛友昌等，薄层扫描法测定山香圆叶中熊果酸的含量，1997，17(3)7；罗宪堂等，UV法测定山香圆叶中黄酮类成分含量，中医药研究，2002，18(5)48)，但上述方法均难以综合反应和控制药材及制剂质量，且在已上市的制剂中(如山香圆颗粒、山香圆片)，提取工艺为水提或稀乙醇醇沉提取工艺，熊果酸等脂溶性成分提取率很低。 所以建立一个能综合反应药材及制剂质量的质量控制方法，具有很重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于建立一种，该方法可综合反应和控制药材及制剂的质量。 本专利技术首先对山香圆叶药材进行较系统的化学成分研究，具体而言，是不同于已知文献所报道的低极性部分的化学成分研究，研究主要集中于山香圆叶以水或稀乙醇为溶剂采用冷提(如渗漉、浸泡等)或热提(如煎煮、回流等)的提取物为基本，进一步采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，取乙酸乙酯、正丁醇部分分别通过硅胶反复柱层析、凝胶层析、液相制备等纯化手段，初步分离得到单体化合物22个，并进一步结构鉴定，其中含量较高的成分有CSP-A1、CSP-A2等，CSP-A1为白色针状结晶，mp246℃，EI-MS m/z170(M+)，153，141，135，125，113，107，96，85，79，71；经鉴定为没食子酸；CSP-A2为白色粉末，其1H-NMR谱(CD3OD)见附图1、13C-NMR谱(CD3OD)见附图2，其甲醇溶液于200～400nm扫描测定，可见在214nm、268nm、334nm附近有最大吸收，结构待进一步确定。 没食子酸具有抗炎、抗氧化、抗突变、抗肿瘤、抗病毒等的药理活性，初步确定CSP-A2的苷元为芹菜素，而芹菜素具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤、抗血栓、抗焦虑等多方面作用，与山香圆叶的功能主治相关，可见以水溶性较好的没食子酸、CSP-A2作为质量控制指标，具有更好的合理性。 本专利技术是可以通过以下方式实现，包括但不仅限于一、供试品溶液的制备方法可以用甲醇，乙醇、丙酮等极性溶剂直接提取的方法，溶剂也可以用它们的水溶液，提取方法可以为超声、回流、静置浸泡等，也可以用水提取液(或浓缩液)直接用乙酸乙酯、正丁醇萃取提取的方法，由于被测指标为均为有机酚酸类，萃取的水溶液用酸调节pH在4.5以下效果更好，乙酸乙酯、正丁醇萃取液继续回收溶剂，残渣加甲醇溶解即得。具体的提取方法根据具体情况及剂型而不同，如对于液体制剂，调节pH到4，用适量正丁醇直接振摇提取更为简单方便，而对于药材及固体制剂，可以采用水提取(冷浸或回流等)成水提取液，然后采用液体制剂相同的方法制备，而更简单方便为溶剂直接提取，如采用甲醇、乙醇、丙酮、及含水溶剂提取(回流、冷浸等)的方法，为尽量富集有效成分并减少杂质干扰，一个更优化的方法为取药材或制剂粉末适量，置索氏提取器中，加石油醚适量，回流提取1小时，弃去石油醚提取液，并挥去药材或制剂粉末的剩余石油醚，加甲醇，回流提取1小时，取甲醇提取液，浓缩，即得。或碱溶液提取，如0.01％～0.1％的氢氧化钠溶液、0.5％碳酸钠溶液浸泡提取，提取液用稀盐酸调节pH值至4，然后用乙酸乙酯、正丁醇振摇萃取；或采用大孔吸附树脂或聚酰胺柱精制，即药材或制剂提取水溶液，缓缓通过大孔吸附树脂或聚酰胺柱，用水洗脱，弃去水洗脱液，继续用20％～90％乙醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，残渣加甲醇溶解，即得。 上述所述的供试品溶液制备具体操作方法，举例如下，所述例子只是更直观地说明供试品的制备方法，包括但不仅限于1、山香圆叶粉末1g或制剂适量(约相当于药材1g)，加石油醚索氏提取1小时，弃去石油醚，残渣挥去石油醚，加甲醇适量，回流提取1小时，取甲醇液，浓缩至2ml，即得。石油醚也可以用氯仿等小极性、非极性溶剂。 2、山香圆叶粉末1g或制剂适量(约相当于药材1g)，加水30ml，回流煎煮1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至10ml，稀盐酸调节pH值至3～4，水饱和正丁醇萃取2～6次，每次10ml，合并正丁醇液，回收，残渣加甲醇1ml使溶解，即得。 3、山香圆叶粉末1g或制剂适量(约相当于药材1g)，加稀乙醇30ml，超声提取30分钟，滤过，滤液回收乙醇，残渣加甲醇2ml使溶解。 4、如3所述的稀乙醇提取液，浓缩，残渣加水5ml使溶解，稀盐酸调节pH值至3～4，水饱和乙酸乙酯萃取2～6次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，回收，残渣加甲醇1ml使溶解，即得。 5、山香圆叶粉末1g或制剂适量(约相当于药材1g)，加0.05％氢氧化钠溶液30ml静置过夜，滤过，稀盐酸调节pH至3～4，浓缩至10ml，水饱和正丁醇萃取2～6次，每次10ml，合并正丁醇液，回收，残渣加甲醇1ml使溶解，即得。 6、山香圆叶粉末1g或制剂适量(约相当于药材1g)，加甲醇超声提取30分钟，滤过，即得。 7、如2得到的水提取浓缩液，与苯乙烯型大孔树脂拌匀，加入苯乙烯型大孔树脂柱(Φ2.5×12)，水洗脱除去杂质，60％乙醇洗脱并收集合并洗脱液，浓缩，残渣加甲醇2ml使溶解。苯乙烯型大孔树脂如D101型大孔吸附树脂，AB-8型大孔吸附树脂等。 8、如7，苯乙烯型大孔树脂换为聚酰胺。 二、定性鉴别以没食子酸、CSP-A2为定性质量控制指标，可以为薄层色谱鉴别方法，液相色谱鉴别方法等，以能达到良好分离并鉴别出没食子酸、CSP-A2为宜。方法包括但不仅限于1、照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VI B)试验，取供试品溶液、没食子酸对照品溶液(取没食子酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液。)各2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以36％醋酸为展开剂，展开，取出，凉干，喷以0.5％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。 2、照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VI B)试验，取供试品溶液、没食子酸对照品溶液(取没食子酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液。)各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿乙酸乙酯甲醇甲酸(3∶6∶1∶1)为展开剂，展开，取出，凉干，喷以三氯化铁试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。 3、照薄层色谱法(《中国药典》2005版一部附录VI B)试验，取供试品溶液、没食子酸对照品溶液(取没食子酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.山香圆叶及其制剂的的质量控制方法，其特征在于至少含有以没食子酸作为指标成分之一的检测。2.根据权利要求1所述的山香圆叶及其制剂的的质量控制方法，其特征在于以没食子酸为特征指标成分之一的指纹图谱控制方法。3.根据权利要求2所述的山香圆叶及其制剂的的指纹图谱质量控制方法，其特征在于是高效液相色谱法，采用梯度洗脱，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以有机溶剂酸水溶液为流动相；检测波长210～340nm。4.根据权利要求3所述的山香圆叶及其制剂的的指纹图谱质量控制方法，其特征在于照高效液相色谱法(中国药典2005版一部附录VI D)测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸水溶液为流动相B；在0～70分钟，流动相A从10％～25％，流动相B从90％～75％；检测波长269±1nm。供试品溶液的制备取山香圆叶粉末1g或制剂适量(相当于山香圆叶药材1～2g)，加热水适量，振摇，超声提取45分钟，滤过，收集滤液，用稀盐酸调节pH值3～4，用水饱和正丁醇提取2～6次，合并正丁醇提取液，减压回收正丁醇，残渣加甲醇适量使溶解，作为供试品溶液。另取没食子酸对照品对照品，加甲醇适量使溶解，得对照品溶液；分别吸取供试品溶液和对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪器，检测，并与药材标准图谱对照，山香圆叶药材至少有6个相应特...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡军，
申请(专利权)人：胡军，
类型：发明
国别省市：