核酸纳米器件及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种核酸纳米器件，所述核酸纳米器件为负载有化疗药物且杂交有小干扰RNA的DNA折纸结构，所述DNA折纸结构上杂交有细胞穿透肽和/或核酸适配体，且可以通过特定DNA序列修饰实现响应性开闭。本发明专利技术还提供了其制备方法与应用。本发明专利技术提供的核酸纳米器件利用小干扰RNA的基因沉默作用敲除多药耐药肿瘤细胞的相关耐药基因，再结合化疗药物阿霉素杀伤肿瘤细胞，并杂交穿膜多肽TAT提高该纳米器件穿透肿瘤细胞膜的效率。在基因治疗和化疗的共同作用下，该核酸纳米器件在细胞和活体水平上显著地降低了耐药基因的表达并抑制了肿瘤细胞的生长，且没有明显的免疫原性和组织毒性。

【技术实现步骤摘要】
核酸纳米器件及其制备方法和应用
本专利技术属于纳米药物领域，具体地说，涉及一种核酸纳米器件及其制备方法与应用。
技术介绍
目前，癌症每年在全世界范围的患病率正逐步提高，而且，癌症的死亡率也呈逐年上升趋势。据美国癌症协会统计，90％以上肿瘤患者在化疗过程中都会产生自发或获得性耐药，这也是导致化疗失败的重要原因。多药耐药性(multidrug-resistance,MDR)是指肿瘤细胞对接触的一种化疗药物产生耐药的同时，对其它未接触过的、结构和作用机制各不相同的药物也产生交叉耐药的现象。MDR在肿瘤细胞中的形成机制十分复杂，肿瘤细胞可通过不同途径产生多药耐药性。肿瘤的多药耐药性是攻克癌症问题所要面临的重要挑战。在单独化疗无法解决的多药耐药肿瘤的环境下，发展基因治疗是一种有力的辅助手段，可以从根源下调肿瘤细胞的耐药基因，从而减轻化疗的压力。基因治疗常用的是RNA干扰的方法，RNA干扰(RNAi)是用双链RNA诱发宿主细胞同源mRNA降解而导致基因沉默的基因治疗技术。这种现象发生于转录后水平，又称为转录后沉默。RNA干扰可以高效、特异地阻断体内本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸纳米器件，其特征在于，所述核酸纳米器件为负载有化疗药物且杂交有小干扰RNA的DNA折纸结构，所述DNA折纸结构上杂交有细胞穿透肽和/或核酸适配体，并且所述DNA折纸结构中含有修饰了刺激响应性元件的订书钉链，所述刺激响应性元件选自以下一种或多种：二硫键、二硒键、琥珀酰亚胺-硫醚键和/或ATP响应核酸适配体、sgc8c核酸适配体，优选为二硫键；/n其中，所述细胞穿透肽和/或核酸适配体与单链DNA形成共轭复合物后杂交到DNA折纸结构上。/n

【技术特征摘要】
1.一种核酸纳米器件，其特征在于，所述核酸纳米器件为负载有化疗药物且杂交有小干扰RNA的DNA折纸结构，所述DNA折纸结构上杂交有细胞穿透肽和/或核酸适配体，并且所述DNA折纸结构中含有修饰了刺激响应性元件的订书钉链，所述刺激响应性元件选自以下一种或多种：二硫键、二硒键、琥珀酰亚胺-硫醚键和/或ATP响应核酸适配体、sgc8c核酸适配体，优选为二硫键；
其中，所述细胞穿透肽和/或核酸适配体与单链DNA形成共轭复合物后杂交到DNA折纸结构上。


2.根据权利要求1所述的核酸纳米器件，其特征在于，所述DNA折纸结构为二维DNA折纸结构或三维DNA折纸结构；
优选地，所述DNA折纸结构是通过环状长序列的M13噬菌体基因组DNA单链和短序列的书钉链及捕获书钉链按照碱基互补配对原则杂交组装成的三维DNA折纸结构；
更优选地，所述DNA折纸结构为三维管状结构。


3.根据权利要求1或2所述的核酸纳米器件，其特征在于，所述小干扰RNA选自以下一种或多种：P-糖蛋白小干扰RNA、B细胞淋巴瘤/白血病-2小干扰RNA、生存素小干扰RNA；优选为P-糖蛋白小干扰RNA和/或B细胞淋巴瘤/白血病-2小干扰RNA。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的核酸纳米器件，其特征在于，所述化疗药物选自以下一种或多种：紫杉醇、顺铂、环磷酰胺、羟基喜树碱、盐酸阿霉素；优选为盐酸阿霉素。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的核酸纳米器件，其特征在于，所述细胞穿透肽选自以下一种或多种：TAT、NLS、RGD、Pep-1；和/或
所述核酸适配体选自以下一种或多种：MUC-1核酸适配体、AS1411核酸适配体、EGFR核酸适配体、A10核酸适配体。


6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁宝全，王昭然，蒋乔，宋琳琳，
申请(专利权)人：国家纳米科学中心，
类型：发明
国别省市：北京;11