微流孔芯片电泳分离检测小而密低密度脂蛋白的方法技术

技术编号:2581601 阅读:197 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种微流孔芯片电泳分离检测小而密低密度脂蛋白的方法,包括标本预处理微流孔芯片、电泳装置进行电泳,在高脂蛋白血症患者的样本中分离出小而密低密度脂蛋白。本发明专利技术能简便、易行、快速、准确的分离检测小而密低密度脂蛋白,从样本预染到结果分析只需6分钟,芯片的使用可达数千次,而且操作简单。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种小而密低密度脂蛋白的检测方法。
技术介绍
脂蛋白是纳米大小的球形颗粒,胆固醇酯和甘油三酯组成疏水性的内壳,载脂蛋白、磷脂及游离胆固醇组成亲水性的外壳。超速离心法将血浆脂蛋白分为乳糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。低高密度脂蛋白胆固醇血症和高低密度脂蛋白胆固醇血症作为冠心病传统的危险因素,已得到人们的公认。近年来研究发现,低密度脂蛋白具有明显的异质性,小颗粒致密LDL(small dense low density lipoprotein,sLDL)与大而轻LDL(large buoyant low density lipoprotein,LDL1)相比具有强烈的致动脉粥样硬化的作用,sLDL更易遭受氧化或修饰,是冠心病重要的危险因素,已成为倍受关注的新研究热点。超速离心法是目前分离sLDL的参考方法,但由于需昂贵的设备、操作复杂、费时且技术要求高,不易在普通实验室开展。至今没有一种简便、易行、快速、准确的分离sLDL的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能简便、易行、快速、准确的分离检测小而密低密本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微流孔芯片电泳分离检测小而密低密度脂蛋白的方法,其特征是:包括下列步骤:    (1)标本预处理:将5μl血清样本溶于15μl去离子水中,然后用0.5mg/ml的NBD  C6-ceramide  10μl预染1分钟后加入pH9.8样本Tricine缓冲液,样本Tricine缓冲液由40mol/l的Tricine、40mol/l的泛影葡胺、0.2mmol/l的SDS组成,得待测样本;    (2)采用十字交叉形通道的微流孔芯片;将微流孔芯片的试样池、试样废液池、缓冲液池、缓冲液废液池及通道用1mol/lNaOH浸洗1分钟,然后用去离子水清洗1分钟,在试样废液池、缓冲液池、缓冲液废液池中分别...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王惠民汪骅孙承龙张志泉褚少朋
申请(专利权)人:南通大学附属医院
类型:发明
国别省市:32[中国|江苏]

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