本发明专利技术涉及包含测试条的侧向流测定和系统，用于检测和定量样本中的分析物，诸如包含细胞和液体的样本。一般的，本发明专利技术的用于侧向流测定，以便检测样本中的至少一种分析物的测试条包含：（１）层析条、样本过滤器、液体不可渗透的屏障、用于提供可结合到至少一种分析物上，或者在捕获分析物之后结合到捕获试剂的一种可移动的可检测试剂的工具，从而使可移动的可检测试剂通过层析条迁移，并与已经通过样本过滤器并也已通过层析条迁移的样本接触。测试条能检测（和定量）含有全细胞的样本中的分析物。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请一般涉及定性和定量测定及系统，该定性和定量测定及系统用于检测生物样本中，尤其是包含全血、红细胞、白细胞、或其它细胞类型的样本中至少一种分析物的存在，并测定或定量该至少一种存在的分析物的数量。
技术介绍
很多人尝试设计用于检测例如包含全血、红细胞、白细胞的血液样本的生物样本中分析物的存在和数量的侧向流分析，但失败了。失败的原因很多，但可能主要归因于以下因素例如产生高背景噪声的红细胞溶血、例如导致红细胞渗漏到层析条上的低过滤效率、需要相对较大量的样本(例如需要100μl样本或以上)、溶解偶联物或可检测试剂的低效、当存在细胞时由于细胞体积变化引起的体积变化、分析时间长。需要设计能够克服现有技术中一个或多个此类问题的侧向流测定和系统。此外，需要简化用于侧向流测定的测试条的结构以提高测定效率和降低制造成本。Polito等人的美国专利No.6,136,610阐述了用于实施侧向流测定的方法和装置。Thayer等人的美国专利No.6,528,323阐述了用于进行侧向流测定的双向侧向流测试条和方法。尽管这些专利中阐述的方法和系统对于检测和定量大多数分析物是有用的，但这些专利未教授这些方法和系统如何能用于分析含有包括红细胞和/或白细胞或其它细胞类型的细胞的样本。PCT出版的已公开专利申请No.WO03/008933阐述了用于对包含全细胞的样本进行侧向流测定的测试条。然而，WO03/008933中的测试条可被改良以简化结构、提高效率、可靠性、减少体积相关性并减少制造成本。不同的策略已被用于从例如血液样本的样本中去除例如红细胞的细胞，以便于检测分析物，例如传染性疾病生物体或针对传染性疾病生物体的抗体。然而，至今为止，很少策略能有良好效果。例如，Doshi等人的美国专利No.5,766,552公开了使用多孔材料，诸如包含游离凝集剂和与成核微粒密切相关的微粒相关凝集剂的吸收垫。该过滤系统需要大约100μl全血，如图4中所示。人类红血球在它们的细胞表面上包含几种跨膜蛋白质，这几种跨膜蛋白质可能是制造针对红细胞的抗体的合适靶点。例如，带3与氯化物和重碳酸盐穿越细胞元件的电中性交换相关联。带3是911氨基酸的糖蛋白，具有结合细胞骨架、血色素和糖酵解酶的43kDa氨基末端细胞溶质结构域，以及介导阴离子转运的52kDa羧基末端细胞元件结构域，如Wang，D.N.(1994)中所阐述的。已提纯带3的两种肽，C1包含Ala893-Val911而KS4包含Gly647-Arg656，如在Fu，G.等人(2004)中描述的，肽C1被发现具有酶活性，以剂量相关的方式在Leu118-SeM 19处分解血型糖蛋白A9(GPA)，但肽KS4在相同条件下不分解GPA。人红血球在它们的细胞表面上还包含另一种蛋白，血型糖蛋白。已报道血型糖蛋白(GPA)增强爪蟾卵细胞表面上带3阴离子转运活性的表达。Young，MT.和Tanner，M.J.(2003)。作者发现GPA的C末端胞质尾区增强带3向细胞表面的穿行，而细胞外剩余部分68-70增加带3的特殊阴离子转运活性。至今为止，还是缺乏能用于在医疗点环境测定诸如血液样本的生物样本中的分析物的快速、有效和高效定量的侧向流测定和系统，或者能用于测定存在于例如从针刺手指得到的少量样本中的分析物的侧向流测定和系统，或者与量无关的能用于测定分析物的、或解决现有技术侧向流测定和系统中其它问题的侧向流测定和系统。
技术实现思路
因此，本专利技术的一个目的是为用于测定生物样本中的分析物的现有技术侧向流测定和系统所面临的问题提供解决方案，这些生物样本包括但不限于包含诸如红细胞、或白细胞、或其它细胞类型的细胞的样本。本专利技术的另一目的是提供侧向流测定和系统，包含测试条和/或用于容纳该测试条的盒，该侧向流测定和系统可定量检测样品中的一种或多种分析物。本专利技术的又一目的是提供如上的与现有技术的测定或系统相比，与量无关的侧向流测定和系统。本专利技术的再一目的是提供如上的能使用少量样本实现的侧向流测定和系统，该量为例如在小于约100μl的范围内。或者，取样量少于约90μl，小于约80μl，小于约70μl，小于约60μl，小于约50μl，或为约40μl。本专利技术的另一目的是提供如上的对溶解偶联物或可检测试剂有效的侧向流测定和系统。本专利技术的又一目的是提供如上的提供对诸如红细胞的细胞的良好过滤的侧向流测定和系统。根据本专利技术的目的之一，提供如下专利技术。一般而言，本专利技术的一个实施方式包括用于侧向流测定的测试条，用于检测或定量含液体样本中的至少一种分析物，该测试条包括(1)第一元件，其中该第一元件包含样本过滤器，而该样本过滤器包含第一孔径和任选的第一凝集剂(agglutinating agent)；(2)可任选地，第二元件，其中该第二元件包含第一液体收集器，而该第一液体收集器包含第二孔径，其中第二元件如果存在则与第一元件毛细作用接触；(3)可任选地，第三元件，其中该第三元件包含偶联物垫，并且该偶联物垫如果存在则直接或间接地与层析条毛细作用接触，且其中偶联物垫包含至少一种可移动的可检测试剂，而该至少一种可移动的可检测试剂是第一可移动的可检测试剂；(4)第四元件，其中该第四元件包含层析条，所述层析条包含第一端和第二端、至少一个捕获带、至少一个任选地包含对照试剂的对照带、和可任选地至少一种可移动的可检测试剂，其中该至少一种可移动的可检测试剂是第二可移动的可检测试剂，其中至少一个捕获带包含用于捕捉至少一种分析物的固定捕获试剂，其中层析条允许液体从第一端向第二端或从第二端向第一端的侧向流动，并且其中层析条与第一、第二或第三元件中的至少一个直接或间接地毛细作用接触；(5)可任选地，第五元件，包含用于施加样本、缓冲液、或试剂的缓冲液垫，其中该第五元件如果存在则与第四元件毛细作用接触，并可任选地包含第二凝集剂；(6)第六元件，其中该第六元件包含第一吸收垫，并且该第一吸收垫与层析带直接或间接毛细作用接触。(7)可任选地，第七元件，其中该第七元件包含第二吸收垫，并且该第二吸收垫如果存在则与第六元件毛细作用接触；以及(8)可任选地，第八元件，其中该第八元件包含第二液体收集器，并且该第二液体收集器如果存在则与第四元件和第五元件(如果存在)毛细作用接触；以及其中测试条被配置成允许样本中至少一种分析物的检测或定量，并且样本包含红细胞。测试条可包含第二元件，且第二孔径与第一孔径的比可小于约20并大于约1。在一个可选实施方式中，测试条包含第二元件，并且其中第一元件的至少一部分置于第二元件之上。在另一个可选实施方式中，测试条包含第二元件和偶联物垫，并且第一元件通过第二元件与偶联物垫毛细作用接触，但不与偶联物垫物理接触。在又一个可选实施方式中，测试条包含第五元件，并且第五元件包含第二凝集剂。在再一个可选实施方式中，第一吸收垫与第五元件直接或间接毛细作用接触。本专利技术的另一个实施方式包含用于侧向流测定的测试条，该侧向流测定用于检测含液体样本中的至少一种分析物，该测试条包含(1)包含样本滤过器的第一元件，其中样本滤过器可任选地包含凝集剂；(2)包含层析条的第二元件，其中层析条包含第一端和第二端、至少一个包含用于捕获至少一种分析物的固定捕获试剂的捕获带、至少一个对照带、以及可任选地第一可移动的可本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于进行侧向流测定的测试条，所述侧向流测定用于检测样本中的至少一种分析物，所述测试条包含： （ａ）具有第一端和第二端的层析条； （ｂ）至少一个捕获带，其中一条捕获带是第一捕获带，位于层析条上，其中第一捕获带包括用于捕获样本中第一种分析物的第一固定捕获试剂； （ｃ）可任选的，位于层析条上的第二捕获带，其中第二捕获带包括用于捕获样本中第二种分析物的第二固定捕获试剂； （ｄ）至少一种含有固定对照试剂的对照带； （ｅ）至少一个样本过滤器，其中一个样本过滤器是第一样本过滤器，其中该第一样本过滤器与层析条毛细作用接触，和可任选的含有凝集剂； （ｆ）可任选的，第二样本过滤器，其与层析条毛细作用接触，并可任选的含有凝集剂； （ｇ）液体不可渗透的屏障，其中所述屏障与至少第一样本过滤器和层析条毛细作用连接，并促使液体从样本过滤器流到层析条，向层析条上的捕获带流动； （ｈ）至少一种可移动的可检测试剂，其中一种可移动的可检测试剂是第一可移动的可检测试剂，能与第一分析物或第一捕获试剂、或与通过第一分析物与第一捕获试剂组合形成的复合物结合，其中该第一可移动的可检测试剂在层析条上，或可以释放到层析条上； （ｇ）可任选的，支撑测试条的衬垫； （ｈ）可任选的，至少第一吸收垫，其中该第一吸收垫与层析条的第一端毛细作用接触； （ｉ）可任选的，第二吸收垫，其中第二吸收垫，如存在，与第一吸收垫毛细作用接触； （ｊ）可任选的，缓冲液垫，其中所述缓冲液垫，如存在，与偶联物垫直接物理接触； （ｋ）可任选的，液体收集器，其中所述液体收集器，如存在，位于第二样本过滤器和偶联物垫之间，或在第二样本过滤器和层析条之间； 其中测试条能检测和定量，或仅检测含有全细胞的样本中的分析物。...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：周思亮，WJ若特，刘宁，
申请(专利权)人：瑞莱诊断体系有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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