满天星种苗的繁殖方法技术

满天星种苗的繁殖方法，利用组织培养技术繁殖满天星种苗，在改良ＭＳ培养基中，附加激素ＢＡ０．８－１．５ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ和马铃薯提取汁，并用０．７％的琼脂固化，按蔗糖３０ｇ／Ｌ，在ｐＨ值５．８－６、培养室温度２６±２℃、光照强度１５００－２０００ＬＸ、光照时间１２ｈ／ｄ下培养，用珍珠岩替代琼脂作生根基质，加入营养液。不加糖，也不通入ＣＯ↓［２］气体。本方法克服了满天星试管苗玻璃化现象，用珍珠岩替代琼脂作生根基质，效果远好于ＭＳ琼脂固化培养基，它发根整齐，根系发达，有利于后期的移栽成活，本方法简单、好操作、易推广，并简化满天星种苗规模化生产程序，降低了生产成本。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物
，具体地，涉及一种植物满天星(Gypsophilapaniculata)种苗的繁殖方法。
技术介绍
满天星(Gypsophila paniculata)又名丝石竹，它非常适合作插花材料，在消费市场上，与玫瑰、康乃馨、郁金香等齐名，是重要的切花品种。满天星观赏品种难收种，扦插繁殖系数低、速度慢，利用组织培养技术繁殖其种苗，对于它的切花规模化生产、保持品种优良特性都是及其重要的。满天星组培技术已有报道，但存在着满天星试管苗玻璃化，根系不发达，规模化生产方法复杂，难操作等缺点，本专利技术旨克服已有技术存在的不足，提供一种控制及无糖介质生根的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种满天星种苗的繁殖方法，本方法在不改变原来培养条件下，仅对MS培养基进行改良，就能克服满天星试管苗玻璃化；用珍珠岩替代琼脂作生根基质，加入适量稀薄营养液，不加糖，也无须通入CO2气体，小苗在有限的密闭空间范围内，在原有培养室的条件下生根培养15-16d，效果远好于MS琼脂固化培养基，它发根整齐，根系发达，有利于后期的移栽成活。此方法简单、好操作、易推广，为简化满天星种苗规模化生产程序，降低生产成本提供了依据。为了达到本专利技术的上述目的，本专利技术提供了如下的技术方案满天星种苗的繁殖方法，利用组织培养技术繁殖满天星种苗，在改良MS培养基中，附加激素BA0.8-1.5mg/L，NAA0.2mg/L和马铃薯提取汁，并用0.7％的琼脂固化，按蔗糖30g/L，在PH值5.8-6、培养室温度26±2℃、光照强度1500-2000LX、光照时间12h/d下培养，用珍珠岩替代琼脂作生根基质，加入营养液。不加糖，也不通入CO2气体。上述方法的改良MS培养基为在MS中补加NaH2PO4.H2O150mg/L，Ca(NO3)2.4H2O500mg/L，添加马铃薯提取汁200g/L。上述方法珍珠岩消毒方法采用未使用过的珍珠岩直接使用；使用过的珍珠岩先将其中的杂质拣出，然后在清水中清洗、浸泡，取出晒干之后放入高压灭菌锅内，125℃持续灭菌30分钟后用作生根基质。上述方法中营养液为1/4MS无机盐添加1ppmNAA。上述方法中马铃薯提取汁是取新鲜马铃薯，洗干净、去皮、切片，用蒸馏水和马铃薯的比例为2∶1煮开10分钟，纱布过滤后的汁液即可。本专利技术的具体方法为改良MS培养基是以MS中补加NaH2PO4.H2O150mg/L，Ca(NO3)2.4H2O500mg/L，以及马铃薯汁液200g/L，马铃薯汁液是取新鲜马铃薯，洗干净、去皮、切片，用蒸馏水和马铃薯的比例为2∶1煮开10分钟，过滤即可，然后附加激素BA0.8-1.5mg/L，NAA0.2mg/L，并用0.7％的琼脂固化，按蔗糖30g/L，在PH值5.8-6、培养室温度26±2℃、光照强度1500-2000LX、光照时间12h/d下培养，用珍珠岩替代琼脂作生根基质，使用过的珍珠岩先将其中的杂质拣出，然后在清水中清洗、浸泡，取出晒干之后放入高压灭菌锅内，125℃持续灭菌30分钟进行消毒，用作生根基质，并加入1/4MS无机盐和1ppmNAA的营养液，不加糖，不通入CO2气体。具体实施例方式下面用本专利技术的实施例来进一步说明本专利技术，但本
技术实现思路
不以 实施例1本专利技术采用以MS中补加NaH2PO4.H2O150mg/L，Ca(NO3)2.4H2O500mg/L，添加马铃薯提取汁即取新鲜马铃薯，洗干净、去皮、切片，用蒸馏水和马铃薯的比例为2∶1煮开10分钟，纱布过滤后的汁液200g/L为改良MS培养基，附加激素BA0.8-1.5mg/L，NAA0.2mg/L，并用0.7％的琼脂固化，按蔗糖30g/L，在PH值5.8-6、培养室温度26±2℃、光照强度1500-2000LX、光照时间12h/d下培养，用珍珠岩替代琼脂作生根基质，使用过的珍珠岩先将其中的杂质拣出，然后在清水中清洗、浸泡，取出晒干之后放入高压灭菌锅内，125℃持续灭菌30分钟进行消毒，用作生根基质，并加入1/4MS无机盐和1ppmNAA的营养液，不加糖，也不通入CO2气体。下面用本专利技术的详细试验过程和结果来阐述本专利技术。1、材料和方法用剪刀取8-10cm长健壮的满天星(Gypsophila paniculata)嫩枝，剥去叶片，不要损伤到叶芽和顶芽，常规消毒后，用解剖刀将顶芽切下，茎杆切割为带一对叶芽的小段，接入改良培养基中，放在培养室培养。改良培养基为MS中补加NaH2PO4.H2O150mg/L，Ca(NO3)2.4H2O500mg/L，添加马铃薯提取汁200g/L，然后用0.7％的琼脂固化、蔗糖30g/L、PH值5.8-6。培养室温度26±2℃，光照强度1500-2000LX，光照时间12h/d。马铃薯提取汁的制法称新鲜马铃薯，洗干净后去皮、切片，用蒸馏(蒸馏水和马铃薯的比例为2∶1)煮开10min，纱布过滤后的汁液即可。珍珠岩消毒方法新买来的珍珠岩可直接使用，无须消毒。使用过的必须消毒，首先将珍珠岩中的杂质拣出，然后装入编织袋，扎紧袋口，放入清水中清洗、浸泡，取出晒干之后放入高压灭菌锅内，125℃持续灭菌30min即可，取出备用。营养液为1/4MS无机盐添加1ppmNAA。2、结果和讨论2-1、芽诱导和增殖培养外植体接种在(1)MS+BA1+NAA0.2、(2)改良MS+BA1+NAA0.2，培养基上诱导培养，它们使外植体隐芽萌动、伸长的能力基本相同，接种5天，肉眼就能看到，芽明显伸长，10天伸长2cm；21天伸长5-6cm，顶芽萌发8-12个不定芽，茎段萌发约8个不定芽。两种培养基上培养出的苗有差异，(1)诱导出透明状玻璃化试管苗的比例大，随着继代次数增加，正常苗趋于0，(2)诱导出的表现健壮正常，玻璃化苗在2％以下。将小苗切割为4-5段，用(2)或(3)改良MS+BA0.8+NAA0.2，继代增殖培养，每段组织能培养出8-12不定芽。如此循环增殖扩大，按25天为一个培养周期，每个周期增殖8倍计算，理论上，培养5个顶芽，半年后可获得一百多万苗。在继代培养中，增加BA的浓度，丛芽数会增加(表1)，但每个芽的生长势或粗壮程度会被削弱，从而影响下一次继代繁殖；在增殖培养过程中，可根据苗的生长势适当调整BA的浓度，经长期试验，BA浓度控制在0.8-1.5mg/l为佳。表1不同浓度的激素水平对不定芽形成的影响 改变培养基成分，添加马铃薯汁，玻璃化苗能控制在2％以下，通过调节激素配比、增加糖、琼脂浓度，调配光照强度、时间、培养温度以及封口膜通气状况等综合措施与已有技术比较，方法更简便、易学，经济上也更合理。2-2、生根和移栽将小苗带顶芽切下2cm，转入以下培养基中进行生根培养试验，(4)MS+NAA0.2、(5)MS+NAA0.2、(6)MS+NAA0.2+IBA0.2、(7)MS+NAA0.2+IBA0.2，7天后可观察到，部分小苗茎杆上开始有白色根尖长出，生根情况不很整齐，20天后观察统计，结果表明这四组培养基，后两组比前两组稍好，(7)比(6)稍好，其生根率约89％。根大多为气生根，生长在培养基上方，长在培养基里的很少，根又细又长相互缠绕，每条长2.5cm以上，出瓶时非常容易拉断或受伤，冲洗培养基时，再次受伤，此时进行移栽，本文档来自技高网...

【技术保护点】
满天星种苗的繁殖方法，利用组织培养技术繁殖满天星种苗，其特征在于在改良ＭＳ培养基中附加激素ＢＡ０．８－１．５ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ和马铃薯提取汁，并用０．７％的琼脂固化，按蔗糖３０ｇ／Ｌ，在ＰＨ值５．８－６、培养室温度２６±２℃、光照强度１５００－２０００ＬＸ、光照时间１２ｈ／ｄ下培养，用珍珠岩替代琼脂作生根基质，加入营养液，不加糖，也不通入ＣＯ２气体。

【技术特征摘要】
1.满天星种苗的繁殖方法，利用组织培养技术繁殖满天星种苗，其特征在于在改良MS培养基中附加激素BA0.8-1.5mg/L，NAA0.2mg/L和马铃薯提取汁，并用0.7％的琼脂固化，按蔗糖30g/L，在PH值5.8-6、培养室温度26±2℃、光照强度1500-2000LX、光照时间12h/d下培养，用珍珠岩替代琼脂作生根基质，加入营养液，不加糖，也不通入CO2气体。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于改良MS培养基为在MS中补加NaH2PO4.H2O150mg/L，Ca(NO3)2.4H2O500mg/L，并加马铃薯提取汁200g/L。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于未使用过的珍珠岩直接使用；使用过的珍珠岩先将其中的杂质拣出，然后在清水中清洗、浸泡，取出晒干之后放入高压灭菌锅内，125℃持续灭菌30分钟后用作生根基质。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于营养液为1/4MS无机盐添加1ppmNAA。5.根据权利要求1所述的方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭瑞贤，胡虹，罗桂芬，王华，
申请(专利权)人：中国科学院昆明植物研究所，
类型：发明
国别省市：53[中国|云南]