本发明专利技术公开了一种采用侧流测定设备和多种测定试剂来检测测试样品中的测试分析物的诊断性试验试剂盒。所述测定试剂包括能够生成指示测试样品中测试分析物的存在或数量的检测信号的检测探针。为了进一步提高检测精度，还使用了能够生成指示校正分析物的存在或数量的校正信号的校正探针。可以利用校正信号来校正检测信号。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】采用内部校正系统的诊断性试验试剂盒 专利技术背景测定中普遍采用了各种分析程序和设备，用以确定测试样品中可能 存在的分析物是否存在和/或浓度。例如，免疫测定法利用免疫系统机这些抗体和抗原，即免疫反应物能句;彼:匕结合，'由此引起能够用来确定 生物样品中特定抗原的存在或浓度的高度特异性反应机制。有数种公知的免疫测定法，这些方法利用由可检测的成分标记的免 疫反应物，从而能够对分析物进行分析检测。例如，"夹心型"测定形 式一般涉及使测试样品与检测探针混合，这些探针与对分析物具有特异 性的结合成员(例如抗体)缀合，从而在分析物与缀合探针之间形成配 合物。然后使这些配合物与固定在检测区内的受体材料(例如抗体)相 接触。分析物/探针缀合配合物与固定的受体材料之间发生结合，从而将 可检测出来以指示分析物存在的"夹心"配合物定位。这项技术可用于获得定量或半定量的结果。这些夹心型测定的一些实例在Grubb等人的 U.S.4,168,146和Tom等人的U.S.4,366,241中有所描述。另 一种技术是 "竟争型"测定。在竟争性测定中，标记探针通常是与分析物相同或类 似的分子缀合。因此，标记探针与目标分析物竟争存在的受体材料。竟 争性测定法通常用于检测诸如半抗原之类的分析物，每种半抗原是单价 的并且仅能够结合一 个抗体分子。竟争性免疫测定设备的实例在 Deutsch等人的U.S.4,235,601 、 Liotta的U.S.4,442,204和Buechler等人 的U.S.5,208,535中有所记载。这些测定法中的许多都依赖于校正来提供有效和有意义的结果，特别是对于半定量和定量检测而言。在外部校正系统中，通常从含有一组 已知量分析物的标准样品获得标准曲线，然后将从样品获得的结果与标准曲线进行比较，以便求出样品中分析物的存在和/或数量。外部校正方 法相对容易设计和实施简便。然而，其经常受到环境和批次差异的影 响，因此是不可靠的。因而开发出一些内部校正系统来克服这些问题。例如，Sdmer等人 的U.S.5，387,503中记载了 一种内部4交正4支术，其涉及混合已知体积的样 品和预定量的校正分析物，并将所述混合物与固相载体相接触。所述固 相载体含有能够在第 一 离散区域选择性地结合测试分析物的试剂和能 够在第二离散区域选择性地结合校正分析物的试剂。同样将针对测试分 析物的标记试剂和针对校正分析物的类似标记试剂的混合物施加于所 述固相载体。通过比较分别与测试分析物和校正分析物相结合的标记试 剂水平，确定样品中测试分析物的量。遗憾的是，这种内部校正技术不易结合到侧流(lateral flow)设备中，这种侧流设备涉及利用色谱法对 分析物进行非均相分离。此外，其对预混合测定试剂的需要很繁瑣和过 于复杂，特别是对于最终使用者并非受训过的医务专家或技术人员的采 样现场即时分析(point - of - care )应用而言。因此，目前需要一种准确而相对廉价、简单并易于使用的用于侧流 测定的精确内部校正系统。
技术实现思路
根据本专利技术的 一种实施方案，公开了 一种用于检测测试样品中测试 分析物的存在或数量的诊断性试验试剂盒(diagnostic testkit)。这种诊 断性试验试剂盒包括含有多孔膜的侧流测定设备。所述多孔膜限定出检 测区和校正区。第一受体材料固定在检测区内而第二受体材料固定在校 正区内。除了该侧流测定设备，所述诊断性试验试剂盒还包括多种测定 试剂，其中的一种或多种设置在所述侧流测定设备上。所述测定试剂包 括校正分析物、检测探针和校正探针。所述检测探针与第一特异性结合 成员缀合，该第一特异性结合成员经构造以优先与测试分析物、第一受 体材料或其组合相结合。所述校正探针与第二特异性结合成员缀合，该 第二特异性结合成员经构造以优先与校正分析物、第二受体材料或其组 合相结合。根据本专利技术的另 一种实施方案，公开了 一种利用侧流设备来定量或 半定量地检测测试分析物的方法。所述设备包括与纟企测探针和校正探针 相连通的多孔膜，所述检测探针与第一特异性结合成员相缀合，所述校 正探针与第二特异性结合成员相缀合。所述多孔膜还限定出检测区和校 正区。该方法包括将所述侧流设备与校正分析物相接触；将所述侧流设 备与测试样品相接触；测量检测区产生的检测信号的强度；以及测量校 正区产生的校正信号的强度。测试分析物的量与用校正信号强度校正后的检测信号的强度成比例。根据本专利技术的另 一种实施方案，公开了 一种利用侧流设备来定量或 半定量地检测测试分析物的方法。所述设备包括多孔膜，其与校正分析 物、缀合有第一特异性结合成员的检测探针、以及缀合有第二特异性结 合成员的校正探针相连通。所述多孔膜还限定出检测区和校正区。该方 法包括将所述侧流设备与测试样品相接触；测量检测区产生的检测信号的强度；以及测量校正区产生的校正信号的强度。测试分析物的量与用 校正信号强度校正后的检测信号的强度成比例。 以下更详细地i仑述本专利技术的其它特征和方面。附图简要说明针对本领域的普通技术人员，本专利技术的全面和可实施的内容，包括 其最佳方式，都参照附图在说明书的剩余成员进行了更加具体的阐述， 其中-.附图说明图1是本专利技术的侧流测定设备的一个实施方案的透视图；图2是可以根据本专利技术使用的夹心测定形式的一个实施方案的示意图；图3是可以根据本专利技术使用的间接测定形式的一个实施方案的示意 图；以及图4是可以根据本专利技术使用的竟争性测定形式的 一个实施方案的示意图。附图标记在本说明书和附图中的重复使用意味着其代表本专利技术的 相同或类似特征或元件。代表性实施方案详述 定义正如本文所用的，术语"分析物"通常是指待检测的物质。例如， 分析物可包括抗原性物质、半抗原、抗体以及这些物质的组合。分析物 包括但不限于毒素、有机化合物、蛋白质、肽、微生物、氨基酸、核酸、 激素、类固醇、维生素、药物(包括那些为了治疗目的而施用的药物和 那些为了违法目的而施用的药物)、药物中间体或副产物、细菌、病毒 颗粒以及任何上述物质的代i射物或抗体。 一些分析物的具体实例包括铁蛋白；肌酸激酶MB (CK-MB);地高辛；苯妥英；苯巴比妥；卡马 西平；万古霉素；庆大霉素；茶碱；丙戊酸；奎尼定；促黄体生成激素(LH);促卯泡激素(FSH);雌二醇、黄体酮；C-反应蛋白；脂笼 蛋白(lipocalins) ; IgE抗体；细胞因子；维生素B2微球蛋白；糖化血 红蛋白(Gly.Hb);氢化可的松；毛地黄毒苷；N-乙酰普鲁卡因酰胺(NAPA);普鲁卡因酰胺；风渗抗体，例如风渗-IgG和风渗IgM;弓 形体病抗体，例如弓形体病IgG (Toxo-IgG)和弓形体病IgM (Toxo-IgM);睾酮；水杨酸盐；对乙酰氨基酚；乙肝病毒表面抗原(HBsAg ); 乙肝核心抗原的抗体，例如抗-乙肝核心抗原IgG和IgM(抗-HBC); 人免疫缺陷病毒1和2 (HIV1和2);人T -细胞白血病病毒1和2(HTLV );乙肝e抗原(HBeAg );乙肝e抗原的抗体(抗-HBe ); 流感病毒；促曱状腺素(TSH);曱状腺素(T4 );全三碘曱状腺原氨 酸(全T3);游离三碘曱状腺原氨酸(游离T3);癌胚抗原(CEA); 脂蛋白，胆固醇，和甘油三酯；以及o本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于检测测试样品中测试分析物的存在或数量的诊断性试验试剂盒，所述诊断性试验试剂盒包括： 含有多孔膜的侧流测定设备，所述多孔膜限定出检测区和校正区，其中第一受体材料固定在检测区内而第二受体材料固定在校正区内；和 多种测定试剂，其中的一种或多种设置在所述侧流测定设备上，其中所述测定试剂包括校正分析物、检测探针和校正探针，所述检测探针与第一特异性结合成员缀合，该第一特异性结合成员经构造以优先与测试分析物、第一受体材料或其组合结合，所述校正探针与第二特异性结合成员缀合，该第二特异性结合成员经构造以优先与校正分析物、第二受体材料或其组合结合。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：宋旭东，CO奇德贝卢埃泽，RMM凯洛，
申请(专利权)人：金伯利—克拉克环球有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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