用于调节维生素C生物利用率的营养组合物制造技术

本发明专利技术涉及能够在个体中调节维生素Ｃ的生物利用率的组合物。具体地，本发明专利技术涉及用于鉴定能够调节维生素Ｃ转运体表达的化合物的方法、所述化合物在食物或食品中的用途，以及其用于治疗或预防患病组织或应激组织的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于调节维生素c生物利用率的营养组合物本专利技术涉及调节个体中维生素c生物利用率的营养组合物和药物组合 物。具体地，本专利技术涉及用于鉴定能够调节维生素c转运体表达的化合物 的方法、所述化合物在营养组合物和药物组合物中的用途，以及其用于治疗或预防患病组织或应激组织(stressed tissue)的用途。 已公认维生素在身体代谢功能中起多种作用。例如已知脂溶性维生素A (视黄醛)代谢产生多种称为类视黄醇的衍生 物，其被用于治疗或预防夜盲症。此外，类视黄醇或维生素A分别用于改 善晒伤皮肤外观的治疗。非常吸引人的另一种维生素是维生素C (抗坏血酸，2，3-二脱氩丄-苏-己醇-1 ，4-内酯)，其似乎为体内发生的生物过程中的多因子成分。许多酶促反应需要维生素C，所述反应包括结締组织成分(包括弹性蛋 白、纤连蛋白、蛋白聚糖、骨基质和弹性蛋白相关性肌原纤蛋白)的生物合 成。此外，其似乎在胶原蛋白基因表达和细胞前胶原分泌中起作用。抗坏 血酸也是肉碱生物合成途径中的辅因子并且参与调节铁的吸收、转运和jai 存。其通过将三价铁离子还原为亚铁离子来促进铁的肠吸收，并且可刺激 铁蛋白的合成，从而提高铁在细胞中的贮存。同样，其参与皮质类固醇、 醛固酮的生物合成，胆固醇至胆汁酸的转化。首要的，已知维生素C的抗氧化性质。研究显示缺陷性血清抗氧化剂 状态促成许多疾病例如冠心病、癌症和神经变性疾病，所述疾病通常由中 枢神经系统的氧化应激引起。显然，维生素C似乎在预防许多不同类型癌症的发病中是有效的，所 述癌症包括膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠直肠癌、食管癌、肺癌、胰腺 癌、前列腺癌、唾液腺癌、胃癌、白血病和非霍奇金淋巴瘤。也已知维生 素C在治疗或预防由对皮肤施加有害作用而引起的效应中起着重要作用。维生素不在体内合成，而必须从外源来源通常通过饮食提供。然而， 西方类型的食物的一般特征在于包含太多量的脂肪，而缺乏维生素，因此 在大多数情况下，许多维生素的供给是不理想的。在这些情况下，通常以 补充物的形式提供维生素。此类补充物可只包含一种维生素或包含多种维生素，在所述包含多种 维生素的情况下，称产品为通称的复合维生素制剂。此外，也可通过例如 皮肤护养品将维生素提供给身体的特定部位以治疗或预防疾病。目前维生素的所有施用形式的问题在于以生物可利用的形式即以身体 /细胞可容易吸收的形式提供维生素。例如，为个体提供给定量的由例如化 学方法产生的抗坏血酸，但个体将只能吸收有限的量，因此很明显似乎需 要佐剂成分以使该目的最大化。特别地，这在大剂量(即，使用过量的维生 素治疗病症)的情况下是非常吸引人的，这样如此大剂量可在治疗中产生有 用的药物动力作用。因此，本专利技术的问题在于提供将维生素以生物可利用的形式递送至个 体的新方法。已通过提供化合物和/或营养物和药物组合物来解决该问题，所述化合物和/或营养物和药物组合物能够在细胞中调节维生素c转运体的转录，从 而维生素c在靶细胞中的吸收增加，并且可主动提高和控制维生素c的吸 收或减少维生素c在靼细胞中的吸收。在通向本专利技术的深入实验性研究中，属名的专利技术人注意到在细胞培养实验中，某些化合物调节维生素c的细胞内水平。根据该首次发现，进一 步研究细胞以确定例如细胞内维生素c的减少伴随着维生素c转运体mRNA水平的降低。不希望受任何理论束缚，目前认为能够在细胞中调节用，从而导致所述蛋白质水平增加或减少，其效果分别为乾细胞对维生素 C的摄取增加或所述细胞对维生素C的摄取减少或甚至不能摄取维生素 C。近年来的研究表明在哺乳动物(包括人)中存在两种钠依赖性维生素c转运体(SVCT1和SVCT2,基因符号SLC23A1和SLC23A2)。大鼠组织 中的原位杂交将SVCT1的表达限定在上皮表面例如肠、肾和肝，而SVCT2 则广泛表达，包括在脑、眼、肾上腺和脑垂体、肺、胃和睾丸中表达。已 证明SVCT1主要局限在大批转运(bulk-transporting)上皮中，其中它作于 全身稳态(whole-body homeostasis)。到目前为止，还未报导过SVCT在 皮肤中的表达。附图说明图1为代表用于SVCT基因表达的体外测试的实验结构的图。用试验 化合物或对照处理汇合的原代角质形成细胞(NHEK)，在37。C下孵育4小 时、8小时、16小时或24小时。分离细胞总RNA，然后将其用于反转录 和SVCT1和SVCT2的实时PCR分析。18S-rRNA和GAPDH mRNA分 析用作内源对照(持家基因)。图2显示用2.5%迷迭香提取物处理的原代角质形成细胞的实时PCR 分析。显示了与对照细胞相比和相对于GAPDH，用迷迭香提取物处理的 原代角质形成细胞(NHEK)相对表达的倍数变化。点代表4个生物样品(每 个样品技术性重复三次)的平均值。将处于4小时的对照细胞设置为1倍且 用基准线(graded line)表示。使用ANOVA计算置信区间。如果箭头不接 触1倍线则数据在统计学上是显著的。图3为代表用于抗坏血酸摄取的体外测试的实验结构图。用试验化合 物或对照处理汇合的HaCaT细胞18至24小时，然后与两种不同浓度(5 jiM 和250 jiM)的"C标记的抗坏血酸一起孵育5分钟、10分钟、30分钟、60 分钟、卯分钟和120分钟。裂解细胞并用闪烁计数器定量上清液和细胞裂 解物中的放射性标记。图4显示在用和不用2.5%的迷迭香提取物处理的原代角质形成细胞 中抗坏血酸的才聂取。用2.5%的迷迭香提取物(实心圆)或用对照(空心圆)处 理NHEK 24小时，然后在不同的时间点测量14C标记的抗坏血酸的才聂取并 且将其表示为nmol每孔(A: 5 抗坏血酸，B: 250 jiM抗坏血酸)。数 据代表两次重复的平均值并且在独立的实验组中是可重复产生的(数据未 显示)。图5显示氧化应激模型中抗坏血酸摄取的体外测试。用50 nM甲萘醌 (黑色菱形)、500 nMH202(三角形)、获自经UV照射的HaCaT细胞的条 件培养基(正方形)或对照(灰色菱形)处理汇合的HaCaT细胞2小时，然后 与50 fiM "C标记的抗坏血酸一起酵育5分钟、IO分钟、30分钟、60分 钟、90分钟和120分钟。裂解细胞并通过闪烁计数法定量上清液和细胞裂 解物中的放射性标记。表示实验时间轴的图表显示于A中。B中所示的数 据代表3个独立实验(每个实验技术性重复两次)的平均值和对应的标准差。图6显示氧化应激模型中的抗坏血酸摄取的体外测试。用50 nM FeCb(三角形)或对照(灰色菱形)处理汇合的HaCaT细胞24小时，然后用 50jiM甲萘醌(实心符号)或对照(空心符号)再处理2小时。然后，将细胞与 50nM"C标记的抗坏血酸一起孵育5分钟、IO分钟、30分钟、60分钟、 90分钟和120分钟，裂解细胞并通过闪烁计数法定量上清液和细胞裂解物 中的放射性标记。表示实验时间轴的图显示于A中。B中所示的数据代表 2个独立实验(每个实验技术性重复两次)的平均值和对应的标准差。根据实施方案，本专利技术提供了能够调节维生素C细胞内水平的化合物。 可通过方法获得所述化合物，所述方法包括步骤(a)制备细胞培养物；(b) 将所述细胞培养物暴露于合适量的待鉴定化合物和合适量的维生素C; 本文档来自技高网...

【技术保护点】
调节细胞中维生素Ｃ转运体表达的化合物，其通过包含下列步骤的方法得到：　　　　（ａ）制备细胞培养物；　　　　（ｂ）将所述细胞培养物暴露于一定量的待鉴定化合物和一定量的维生素Ｃ；　　　　（ｃ）确定组织细胞中维生素Ｃ转运体的水平；和　　　　（ｄ）将维生素Ｃ转运体的表达速率与对照进行比较，增加的水平表示试验化合物增加细胞吸收维生素Ｃ的能力。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：M里查尔，H斯特林，G威廉森，
申请(专利权)人：雀巢技术公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]