气质联机测定土壤氨基酸手性异构体同位素富集速率制造技术

技术编号:2576999 阅读:458 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及土壤氮素循环,具体地说是气相色谱-质谱联用测定土壤水解氨基酸手性异构体同位素富集速率的方法,1)选取同位素丰度为50%-100%的碳、氮化合物进行稳定同位素添加样品培养实验;2)将土壤样品分别利用过量的HCl水解,水解液采用阳离子交换树脂分离获取土壤中的水解氨基酸,将提取液蒸干后,干燥的样品利用五氟丙酸酐-异丙醇酯法衍生;3)衍生物利用气相色谱分离、质谱测定获取每一种氨基酸手性异构体的质谱峰面积及其同位素峰面积;4)无论是无机[15]↑N还是葡萄糖[13]↑C加入所引起的氨基酸手性异构体同位素相对丰度的变化均可用APE来表示:采用APE和培养时间的比值即可表示NH↓[4]↑[+]或NO↓[3]↑[-]合成氨基酸氮及葡萄糖合成氨基酸碳的速率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及土壤氮素循环研究,具体地说是气相色谱-质谱联用测定土 壤水解氨基酸手性异构体同位素富集速率的方法。技术背景土壤氨基酸数量最早利用土壤有机氮形态分析中酸水解-蒸馏法方法测定(鲁如坤,土壤农业化学分析方法,ppl52-156,中国农业科技出版社, 1999),但仅能计算氨基酸总量;采用气相色谱法可使15种氨基酸手性异 构体有效分离并逐一定量,但其数量特征是静态的,体现的是多种因素综 合后的氨基酸的积累,无法反映氨基酸手性异构体的动态变化(W.Amelimg, X. Zhang. 2001. Determination of amino acid enantiomers in soils. Soil Biology & Biochemistry 33:553-562)。气相色谱-燃烧-同位素比例质谱可区分氨基酸 手性异构体的天然同位素丰度变化,但同位素区分程度较小且无法调控, 不适用于土壤养分的循环转化研究,而且测定成本很高,容易对仪器产生 同位素污染,同时在样品处理过程引起的同位素歧视比例偏差无法克服定 量校正 (Amelung, W" Brodowski, 本文档来自技高网...

【技术保护点】
气质联机测定土壤氨基酸手性异构体同位素富集速率,其特征在于:1)选取丰度为50%-100%的碳、氮同位素进行稳定同位素添加样品培养实验,将[15]↑-氮素+葡萄糖混合物和氮素+U-[13]↑C-葡萄糖混合物加入土壤样品中进行实验,氮素形态可为NH↓[4]↑[+]或NO↓[3]↑[-],加入量为0.05-2mgN/g土;葡萄糖加入量为0.5-5mgC/g土;以加入氮素+葡萄糖混合物的土壤样品做对比;2)将土壤样品分别利用过量的HCl水解,水解液采用阳离子交换树脂分离获取土壤中的水解氨基酸,将提取液蒸干后,所得干燥利用五氟丙酸酐-异丙醇酯法衍生;3)衍生物利用气相色谱分离、质谱测定获取每一种氨基酸...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:何红波张旭东
申请(专利权)人:中国科学院沈阳应用生态研究所
类型:发明
国别省市:89[中国|沈阳]

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