一种靛甙测试用定标液及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种靛甙定标液，该定标液包括如下组分：磷酸氢二钠９－１２重量份，磷酸二氢钾１－４重量份，氯化钠７０－９０重量份，氯化钾１－４重量份。经实验观察及临床应用，表明本发明专利技术定标液性能和测试效果与进口试剂相似，可替代进口定标液应用于临床。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种检测试剂定标液及制备方法，特别涉及尿靛甙测试用定 标液及制备方法。技术背景尿中靛甙的水平反映了体内肠道细菌分解消化蛋白质产生的副产物吲 哚的水平，如果正常人体蛋白质消化不完全，而肠道细菌吸收消化蛋白增加， 则靛甙水平升高，因此尿中靛甙的水平也即反映了体内蛋白质的消化情况。 食物中未消化吸收的蛋白质在肠道细菌作用下腐败会产生许多副产物，其中吲哚indole是主要副产物之一。吲哚是裂解色氨酸产生，经吸收随血液流 到肝脏，在肝脏转化成吲哚酚，吲哚酚偶联上硫酸钾或葡萄糖醛酸即形成靛 甙，随后通过血液流经肾脏，在肾脏进入尿液。为了在临床更好地使用该检测项目，进一步探明它在临床诊断上的应用 价值，现设计相关临床研究项目，以观察不同人群尿靛甙水平及其与短期饮 食结构的关系，同时分析尿靛甙水平的影响因素包括年龄性别职业饮食习惯 等，以便指定更为科学的饮食结构。目前尿靛甙测定由于采用的是比色法， 用肉眼根据颜色的深浅估算尿靛甙水平，所以不很准确，我们专利技术的吸光度 检测方法使得尿靛甙测定的准确性得以提高。我们测定尿靛甙时所使用的全 自动生化分析仪，需要一种精密度良好、重复测定的变异系数很低的定标液， 从而保证我们检测试剂的准确性。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种靛甙测试用定标液。本专利技术另一 目的在于提供 一种靛甙测试用定标液制备方法。本专利技术目的是通过如下技术方案实现本专利技术靛甙定标液的缓冲液原料包括如下组分 磷酸氢二钠9-12重量份，磷酸二氢钾1-4重量份， 氯化钠70-90重量份，氯化钾1-4重量份。本专利技术靛甙定标液的缓冲液原料优选如下组分 磷酸氢二钠11.5重量份，磷酸二氢钾2重量份，氯化钠80重畺份，氯化钾2童量份。 磷酸氢二钠10重量份，磷酸二氢钾3重量份， 氯化钠70重量份，氯化钾3重量份。 磷酸氢二钠12重量份，磷酸二氢钾1重量份， 氯化钠85重量份，氯化钾4重量份。 本专利技术靛甙定标液的制备方法取磷酸氢二钠，磷酸二氢钾，氯化钠，氯化钾，溶解于800-1200体积 份去离子水制成IOXPBS缓冲液；用去离子水稀释上述溶液成1XPBS缓冲 液，调PH7.4;取靛甙标准品0.001-0.003重量份，溶解于8-12体积份1 XPBS缓冲液，浓度为200mg/l，即得靛甙定标液。本专利技术靛甙定标液优选制备方法为取磷酸氢二钠，磷酸二氢钾，氯化钠，氯化钾，溶解于1100体积份L 去离子水制成ioXpbs缓冲液；用去离子水稀释上述溶液成1XPBS缓冲液， 调ra7.4;取靛甙标准品0.002重量份，溶解于9ml 1XPBS缓冲液，浓度为 200mg/l，即得靛甙定标液。取磷酸氢二钠，磷酸二氢钾，氯化钠，氯化钾，溶解于900体积份去离 子水制成10XPBS缓冲液；用去离子水稀释上述溶液成1XPBS缓冲液，调 PH7.4;取靛甙标准品0.002重量份，溶解于ll体积份1XPBS缓冲液，浓 度为200mg/l，即得靛甙定标液。取磷酸氢二钠，磷酸二氢钾，氯化钠，氯化钾，溶解于1000体积份去 离子水制成ioXpbs缓冲液；用去离子水稀释上述溶液成1XPBS缓冲液， 调PH7.4;取靛甙标准品0.002重量份，溶解于10体积份lXPBS缓冲液， 浓度为200mg/l，即得靛甙定标液。上述体积份/重量份的单位关系为ml/g本专利技术靛甙检测分析用定标液是在对进口原装定标液的组成成分及理 化特性进行分析的基础上，自行设计配方配制并反复与进口定标液进行对比 调整的结果。本专利技术定标液测试的精密度良好，重复测定的变异系数(CV) 为0.23%,靛甙的平均回收率为101.0%。与进口试剂对比检测58份标本， 有很好的相关性，相关系数为；靛甙，r二0.9905，可替代进口定标液应用。 实验例1材料与方法1.1仪器A-6半自动生化分析仪(松上)；万分之一电子分析天平(上海)磁力搅拌器；数字型酸度计(上海)。 1.2对比试剂进口原装定标液及清洗液。1.3在详细阅读进口试剂说明书的基础上，对定标液的组成及理化特 性进行分析，然后自行设计配方配制，并反复与进口定标液进行对比调整， 筛选出与进口试剂参数及检验结果相一致的配方。本专利技术的靛甙分析定标液作为衡量实际尿液中靛甙的标准和尺度，采用 缓冲液的环境来制备靛甙定标液，其目的是对PH值有更好的缓冲性和适量 的电解质离子浓度，以保护靛甙的有效成分和有机活性，通过相关缓冲液缓 冲浓度的系列对比实验，使靛甙在生理范围内更有效地更充分地加以利用和 反应，使之给仪器定出的标准更准确真实，同时又要考虑个试剂相互间不能 有干扰，还要防止药品对该波段吸收光的干扰。因此，正确选择适宜的试剂 成分和合理的匹配是研制成功的关键。1. 4通过以上的反复研制对比实验我们得出最优成分配比取酸氢二钠 10g，磷酸二氢钾3g，氯化钠80g，氯化钾3g，溶解于1000ml去离子水制成 IOXPBS缓冲液；用去离子水稀释上述溶液成1XPBS缓冲液，调PH7.4;取 靛甙标准品0.002g，溶解于10ml 1XPBS缓冲液，浓度为200mg/L，即得靛 武定标液。调校应用上述缓冲液所得的ra值仅为计算所得的理论值，实际配置时由于各离子间的相互影响，尤其作为溶剂的蒸馏水本身的差异，实际配置后的ra值与理论值往往偏差颇大。因此，调教将成为本试剂的关键步骤，应以原定标液的PH值标准来对比。以上试剂均为AR级，经干燥恒重后，以万分之一分析天平精确称量， 用去离子水配置。 2实验结果2.1精密度由于尿靛甙受测试时间和环境温度的影响，故选用2份尿靛甙混合样本用自配和进口定标液定标后，各重复测定10次，结果见表1。实验结果显示自研定标液测试的精密度与进口定标液相近。_表l尿靛甙标本重复性测定结果_项目 进口定标液 自配定标液_^§__7±S_^_靛武 95.606±0. 185 0.19 95.610±0.342 0.232.2回收实验在l份已知混合尿靛甙中加入不同浓度的靛甙，用自研制的定标液定标，在该仪器上作回收实验，结果见表2表2回收实验结果(mg/1)<table>table see original document page 7</column></row><table>2.3与原装定标液测定结果比较选取临床门诊尿液标本58份，用自 配定标液与原定标液进行对比测试，结果见表3。经配对t检验，结果均无 显著差异(p均〉0.05)，分析表明两者有着良好的相关性。表3自配与原定标液应用效果比较(n=58， x±S)<table>table see original document page 7</column></row><table>经实验观察及临床应用，表明本专利技术性能和测试效果与进口试剂相似， 可替代进口定标液应用于临床。具体实施方式实施例1: 靛甙定标液的缓冲液取磷酸氢二钠11.5 g，磷酸二氢钾2g，氯化钠80g，氯化钾2g，溶解 于1000 mL去离子水制成IOXPBS缓冲液。 实施例2: 靛甙定标液的缓冲液取取磷酸氢二钠10 g，磷酸二氢钾3g，氯化钠70g，氯化钾3g，，溶 解于1000 mL去离子水制成IOXP本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种靛甙定标液，其特征在于该定标液的缓冲液包括如下组分：　　　　磷酸氢二钠９－１２重量份，磷酸二氢钾１－４重量份，氯化钠７０－９０重量份，氯化钾１－４重量份。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙允高，朱礼华，马景东，
申请(专利权)人：北京迈达康医疗设备制造有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]