测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋白酶或胃蛋白酶活力的方法技术

技术编号:2576486 阅读:608 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋白酶或胃蛋白酶活力的方法,本发明专利技术以酪蛋白为底物,分别加入各酶催化,用三氯乙酸终止酶催化反应并与剩余底物相互作用形成缔合微粒使得共振散射强度急剧加强,据此建立了一个测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋白酶或胃蛋白酶活力的方法,酶活力浓度-共振散射校正值曲线算出。本发明专利技术的优点在于:与现有的方法相比,本方法将酶催化反应与共振散射光谱结合起来,分析灵敏度高,选择性好,检测限低,操作简便,并且所用试剂无毒安全。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及测定蛋白酶活力的方法,具体地说是一种测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋 白酶或胃蛋白酶活力的催化共振散射光谱法。
技术介绍
糜蛋白酶、胰蛋白酶、弹性蛋白酶主要提取于动物胰脏,胃蛋白酶存在于胃液中。这4 种酶的制剂片剂、胶囊、注射用冻干粉、颗粒冲剂等在临床医学领域广泛应用。糜蛋白酶是一种肽链内切酶,专一水解羧端芳香族氨基酸(酪氨酸、色氨酸、亮氨酸)或侧 键大体积疏水性残基甲硫氨酸等5它可以分解炎症部位纤维蛋白的凝结物,促进血凝块、脓性 分泌物及坏死组织的溶化分解,从而净化创面,使肉芽组织新生,促进伤口愈合等,在治疗鼻黏 膜糜烂、痤疮、溃疡性直肠炎、胃石、甲状腺瘤、重症肺炎、结核性脓胸等疾病中有一定作 用。据报道,该酶在眼科、皮肤科中的临床应用已被肯定。胰蛋白酶作用与糜蛋白酶类似,主要有消化食物、消炎等作用,对消化道疾病、肝炎、 胆囊炎等有较好的治疗效果。此外,直接注射胰蛋白酶还可作为毒蛇咬伤的急救手段。糜蛋 白酶-胰蛋白酶联用处理烧伤皮肤有良好的效果。弹性蛋白酶可以水解不溶性弹性硬蛋白,临床上主要用于防治II型和IV型高血脂症、动 脉粥样硬化、脂肪肝等。其浓度还可以作为临本文档来自技高网...

【技术保护点】
测定糜蛋白酶或胰蛋白酶或弹性蛋白酶或胃蛋白酶活力的催化共振散射光谱法,其特征是:检测方法包括如下步骤:(1)制备已知酶活力单位的各酶的测试体系:①具塞刻度试管中,依次加入0.09~0.10mg/mL酪蛋白置于50℃水浴锅中预热10min,取出加入适量上述各蛋白酶,用对应的缓冲液(其中胰蛋白酶或糜蛋白酶或弹性蛋白酶分别用pH8.0、7.5、8.0的0.2mol/LNa↓[2]HPO↓[4]-KH↓[2]PO↓[4]缓冲液,胃蛋白酶用0.1mol/LpH1.65甘氨酸-NaCl-HCl缓冲液)稀释至一定体积,摇匀并立即开始计时放回水浴锅中反应,其中糜蛋白酶或胰蛋白酶或胃蛋白酶温育60~65min,...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:黄国霞廖献就蒋治良温桂清李纪顺
申请(专利权)人:广西师范大学
类型:发明
国别省市:45[中国|广西]

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