基于响应面的生物酶法优化提取丹参中丹参酮IIA和丹酚酸B的工艺方法技术

基于响应面的生物酶法优化提取丹参中丹参酮IIA和丹酚酸B的工艺方法，属于中药提取技术领域。该方法得到最优工艺条件包括：称取丹参粉末于离心管中，以固液比1:60添加1mg/mL复合酶溶液，复合酶溶液通过将含有纤维素酶和果胶酶质量比1:1.5的复合酶溶于50%乙醇溶液中得到，混合震荡摇匀，55℃恒温水浴提取30min，离心取上清液，HPLC法测定测量丹参酮IIA和丹酚酸B提取率。本发明专利技术选用合适的酶并进行响应面优化，提高了丹参酮IIA和丹酚酸B的提取量，并通过生物酶响应面法优化提取丹参中丹参酮IIA和丹酚酸B的工艺。

【技术实现步骤摘要】
基于响应面的生物酶法优化提取丹参中丹参酮IIA和丹酚酸B的工艺方法
本专利技术属于中药提取
，具体涉及基于响应面的生物酶法优化提取丹参中丹参酮IIA和丹酚酸B的工艺方法。
技术介绍
中药丹参为唇形科植物丹参(salviamiltiorrhizabge)的干燥植物根和根茎，味苦、归心、肝经，具有的功效为治疗血行不畅和经脉阻滞、治疗血热和止痛、清心除烦和凉血解毒消痹等，多广泛应用于治疗常见的胸痹心痛，脘腹胁痛，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调和慢性痛经以及闭经。丹参中主要成分含有多种脂溶性的二萜醌类化合物和水溶性的多聚酚酸类化合物等成分。其中脂溶性的丹参酮类以具有改善人体的血液循环、抗菌和抗炎的作用，而水溶性的丹酚类则以具有抗物质氧化、抗血液凝固、抗人体血栓形成、治疗人体高血脂和对人体的红细胞保护等的作用。由于丹参中含有的丹参酮IIA及丹酚酸B两者具有多种的药用价值，且其需求量日益扩大和增加，丹参药用有效成分的临床研究主要重点集中在对抗恶性肿瘤和用于治疗多种心脑血管系统疾病这两方面，并且已经在临床上取得了令人满意的实际和临床应用效果。因此本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.基于响应面的生物酶法优化提取丹参中丹参酮IIA和丹酚酸B的工艺方法，其特征在于包括以下步骤：/n（1）称取丹参粉末于离心管中，以固液比1:20-100添加0.5-2.5mg/mL复合酶溶液，所述复合酶溶液通过将含有纤维素酶和果胶酶的复合酶溶于40-80%乙醇溶液中得到，混合震荡摇匀，35-75℃恒温水浴提取20-60min，离心取上清液，HPLC法测定测量丹参酮IIA和丹酚酸B提取率；/n（2）以固液比、乙醇浓度、提取时间、提取温度、复合酶浓度、复合酶酶比为影响因素，以丹参酮IIA和丹酚酸B提取率为指标，进行单因素试验；/n（3）根据步骤（2）得到的影响结果，以固液比、乙醇浓度、提取温度、...

【技术特征摘要】
1.基于响应面的生物酶法优化提取丹参中丹参酮IIA和丹酚酸B的工艺方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）称取丹参粉末于离心管中，以固液比1:20-100添加0.5-2.5mg/mL复合酶溶液，所述复合酶溶液通过将含有纤维素酶和果胶酶的复合酶溶于40-80%乙醇溶液中得到，混合震荡摇匀，35-75℃恒温水浴提取20-60min，离心取上清液，HPLC法测定测量丹参酮IIA和丹酚酸B提取率；
（2）以固液比、乙醇浓度、提取时间、提取温度、复合酶浓度、复合酶酶比为影响因素，以丹参酮IIA和丹酚酸B提取率为指标，进行单因素试验；
（3）根据步骤（2）得到的影响结果，以固液比、乙醇浓度、提取温度、复合酶浓度、复合酶酶比为因素，以丹参酮ⅡA、丹酚酸B提取率为响应值，进行五因素三水平的响应面试验设计；
（4）使用Design-Expert8.0.6软件对步骤（3）得到的数据进行分析，获得丹参酮IIA和丹酚酸B提取率与五个自变量的二元多项回归方程；
（5）对步骤（4）得到的二元多项回归方程进行方差分析对比，得到最优的提取工艺条件。


2.如权利要求1所述的基于响应面的生物酶法优化提取丹参中丹参酮IIA和丹酚酸B的工艺方法，其特征在于所述步骤（1）中HPLC法测定丹参酮IIA的标准曲线为：Y=2×106X–3804，R²=0.999，HPLC法测定丹酚酸B的标准曲线为：Y=4×107X+43789，R²=0.999，其中X为浓度mg/mL，Y为峰面积。


3.如权利要求1所述的基于响应面的生物酶法优化提取丹参中丹参酮IIA和丹酚酸B的工艺方法，其特征在于所述步骤（1）中HPLC法色谱条件为：色谱柱HypersilBDSC18，300mm×4.6mm，5μm，流动相：乙腈A-0.1%甲酸溶液B，梯度洗脱0-15min，10%-28%B，15-20min，28%-45%B，20-30min，45%-90%B，30-36min，9...

【专利技术属性】
技术研发人员：万海同，金伟锋，虞立，何昱，杨洁红，李畅，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33