阴离子聚合物接枝涂层毛细管及用于蛋白质在线富集分析方法技术

本发明专利技术涉及制备阴离子聚合物接枝涂层毛细管及其蛋白质在线富集毛细管电泳分析方法，包括毛细管预处理、乙烯基化毛细管内壁、甲基丙烯酸缩水甘油酯原位接枝反应以及磺酸基修饰反应，其中：磺酸基修饰反应是向制得的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝修饰的管柱中通入含０．１－０．３ｇ／ｌ亚硫酸钠及２－６％ｖ／ｖ异丙醇的水溶液，管柱两端封口后室温反应１－３天，随后用管柱分别用水、甲醇洗，最后氮气吹干，便制得了阴离子聚合物接枝涂层的毛细管柱。采用阴离子聚合物涂层的毛细管柱萃取样品溶液中的蛋白质溶质，并用反向电渗流将吸附的蛋白质洗脱并富集于管柱进口，随后进行毛细管电泳分离操作。本方法可以多倍柱体积样品进样，故可以用于低丰度蛋白质样品溶液的分离分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及制备阴离子聚合物接枝涂层毛细管及其蛋白质在线富集毛细管电泳分析 方法，属于蛋白质分离分析

技术介绍
蛋白质的分离分析无论在医疗诊断领域还是在日益发展的蛋白质组学研究领域均具 有十分重要的意义。毛细管电泳(capillary electrophoresis)技术因其具有高柱效、 高选择性、低消耗、易于自动化等优点，己广泛的用于蛋白质的分离分析。毛细管电泳一 般在内径为25 100微米的石英毛细管内进行，故溶质的进样量较小。此外，蛋白质毛细 管电泳一般使用紫外检测器进行在线检测，因此检测光程较短。所以，毛细管电泳法检测 灵敏度较差，溶质检测限较高。如何有效的提高毛细管电泳法的检测灵敏度及降低溶质检 测限是当今毛细管电泳研究及应用领域的热点问题。迄今，解决这一问题主要有三种方法(1)改变与紫外检测器连接处毛细管柱的光路 设计，如安捷伦公司研制的带有泡型检测池(bubble cell)的毛细管柱；(2)采用具有 较高灵敏度的检测器如荧光检测器，质谱检测器等；(3)采用样品富集方法，这种方法又 分为在线富集(on-line preconcentratiorO'及离线富本文档来自技高网...

【技术保护点】
阴离子聚合物接枝涂层毛细管柱的制备方法，包括：毛细管预处理、乙烯基化毛细管内壁、甲基丙烯酸缩水甘油酯原位接枝反应以及磺酸基修饰反应，其特征在于：磺酸基修饰反应是向制得的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯接枝修饰的管柱中通入含０．１－０．３ｇ／ｌ亚硫酸钠及２－６％ｖ／ｖ异丙醇的水溶液，管柱两端封口后室温反应１－３天，随后用管柱分别用水、甲醇洗，最后氮气吹干备用，便制得了阴离子聚合物接枝涂层的毛细管柱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐亮，董晓燕，史清洪，白姝，孙彦，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]