一种高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法及其应用技术

技术编号:25706084 阅读:64 留言:0更新日期:2020-09-23 02:53
本发明专利技术涉及一种高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法及其应用,包括如下步骤:(1)在负离子模式下利用数据非依赖的采集方法对样本进行数据采集,获得原始数据;(2)原始数据经过去卷积,得到母离子和碎片离子信息;(3)进行子离子筛查,得到候选神经节糖苷脂;(4)移除非合理候选神经节糖苷脂;(5)获得的结果进行负离子平行反应监测验证,对结果进行解析,得到神经节糖苷脂鉴定结果。将该方法用于神经节糖苷脂的鉴定,灵敏度高,覆盖度广,该方法可对少量的生物样本的痕量神经节糖苷脂进行检测,在代谢组学领域展现良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法及其应用
本专利技术属于质谱分析
,具体涉及一种神经节糖苷脂鉴定方法及其应用,尤其涉及一种高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法及其应用。
技术介绍
神经节糖苷脂是一类鞘糖脂类化合物,由一个神经酰胺分子和一个含有唾液酸的寡糖核组成。它们以脂筏、囊泡、结构域和突触的形式存在于细胞膜表面,其寡糖链向细胞外突起,与其他神经节苷脂或来自邻近细胞的糖蛋白相互作用实现各种分子功能,如粘附和信号转导。神经节糖苷脂在神经系统中特别丰富,此外,神经节糖苷脂的精确分析在与癌症相关的功能研究中也越来越受到重视。因此,开发高覆盖度的分析神经节苷脂鉴定方法是非常重要的。不同的神经节糖苷脂之间因相似的理化性质,多变的寡糖链结构和神经酰胺脂肪酸链长度,导致其质谱鉴定是一项具有挑战性的课题。高分辨质谱技术以其优良的多级质谱分析能力和高分辨率成为技术主流。目前,气相色谱/质谱、基质辅助激光解吸电离/质谱成像、离子迁移质谱、毛细管电泳/质谱和液相色谱/质谱等质谱技术已很好地应用于神经节糖苷脂类分析,但现有的方法各有优劣。由于现有技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法,其特征在于,所述高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法包括如下步骤:/n(1)采用质谱仪在负离子模式下利用数据非依赖的采集方法对含有神经节糖苷脂的样本进行数据采集,获得原始数据;/n(2)原始数据经过去卷积,得到母离子和碎片离子信息;/n(3)进行子离子筛查,得到候选神经节糖苷脂;/n(4)对候选神经节糖苷脂进行母离子提峰,移除非合理候选神经节糖苷脂;/n(5)采用质谱仪对步骤(4)获得的结果进行负离子平行反应监测验证,对结果进行解析,得到神经节糖苷脂鉴定结果。/n

【技术特征摘要】
1.一种高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法,其特征在于,所述高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法包括如下步骤:
(1)采用质谱仪在负离子模式下利用数据非依赖的采集方法对含有神经节糖苷脂的样本进行数据采集,获得原始数据;
(2)原始数据经过去卷积,得到母离子和碎片离子信息;
(3)进行子离子筛查,得到候选神经节糖苷脂;
(4)对候选神经节糖苷脂进行母离子提峰,移除非合理候选神经节糖苷脂;
(5)采用质谱仪对步骤(4)获得的结果进行负离子平行反应监测验证,对结果进行解析,得到神经节糖苷脂鉴定结果。


2.如权利要求1所述的高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法,其特征在于,步骤(1)所述质谱仪为Q-Exactive质谱仪;
优选地,步骤(1)所述数据采集在600-1800m/z范围内使用20-28个连续的质量窗口利用负离子模式进行采集,窗口宽度50-65m/z;
优选地,步骤(1)所述数据采集过程中一级质谱采集分辨率为70000-140000,二级质谱采集分辨率为17500-70000。


3.如权利要求1或2所述的高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法,其特征在于,步骤(1)所述数据采集过程中一级质谱采集的自动增益控制为1×106-3×106,二级质谱采集的自动增益控制为1×105-5×105;
优选地,步骤(1)所述数据采集过程中二级质谱采集碰撞能采用步进能量,能量值依次设定为5-10eV、25-30eV和32-40eV。


4.如权利要求1-3中任一项所述的高覆盖度的神经节糖苷脂鉴定方法,其特征在于,步骤(2)所述原始数据经过去卷积,得到母离子和碎片离子信息的操作具体包括:使用开源性软件MS-DIAL对获得的原始数据进行...

【专利技术属性】
技术研发人员:李华
申请(专利权)人:南方科技大学
类型:发明
国别省市:广东;44

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