利用修饰的单链核酸进行靶核酸检测的方法技术

本发明专利技术提供了利用修饰的单链核酸进行靶核酸检测的方法，具体地，涉及一种利用修饰的单链核酸进行靶核酸检测的方法、系统和试剂盒，所述的检测方法包括向含有靶核酸的反应体系中加入gRNA、Cas蛋白和单链核酸检测器，所述单链核酸检测器存在碱基修饰。

【技术实现步骤摘要】
利用修饰的单链核酸进行靶核酸检测的方法
本专利技术涉及核酸检测领域，涉及利用修饰的单链核酸进行靶核酸检测的方法，尤其涉及利用修饰的单链核酸进行靶核酸检测的方法、系统和试剂盒。
技术介绍
特异性检测核酸分子(Nucleicaciddetection)方法具有重要的应用价值，例如病原体的检测，遗传病检测等。在病原体检测方面，由于每种病原体微生物都有其独一无二的特征核酸分子序列，因此可以开发出针对特定物种的核酸分子检测，也称为核酸诊断(NADs,nucleicaciddiagnostics)，在食品安全、环境微生物污染检测，人体病原菌感染等领域具有重要义。另一个方面是对人或其他物种的单核苷酸多态性(SNPs,singlenucleotidepolymorphisms)的检测。在基因组水平上去理解遗传变异和生物学功能之间的关系为现代分子生物学提供了新视角，而其中SNPs对生物学的功能、进化和疾病等密切相关，因此SNPs的检测与分析技术的发展尤为重要。目前建立的特异性核酸分子检测通常需要分为两步，第一步是目的核酸的扩增，第二步是目的核酸检测。现有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测样品中靶核酸的方法，其特征在于，所述方法包括将样品与V型Cas蛋白(CRISPR/CAS效应蛋白)、gRNA(指导RNA)和单链核酸检测器接触，所述gRNA包括与所述V型Cas蛋白结合的区域和与靶核酸杂交的导向序列；检测由V型Cas蛋白切割单链核酸检测器产生的可检测信号，从而检测靶核酸；所述单链核酸检测器不与所述gRNA杂交；/n所述单链核酸检测器包含多个连续的碱基为鸟嘌呤(G)的核苷酸，并且，所述单链核酸检测器中的一个或多个鸟嘌呤存在碱基修饰；/n所述碱基修饰为对针对鸟嘌呤的脱氨修饰。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测样品中靶核酸的方法，其特征在于，所述方法包括将样品与V型Cas蛋白(CRISPR/CAS效应蛋白)、gRNA(指导RNA)和单链核酸检测器接触，所述gRNA包括与所述V型Cas蛋白结合的区域和与靶核酸杂交的导向序列；检测由V型Cas蛋白切割单链核酸检测器产生的可检测信号，从而检测靶核酸；所述单链核酸检测器不与所述gRNA杂交；
所述单链核酸检测器包含多个连续的碱基为鸟嘌呤(G)的核苷酸，并且，所述单链核酸检测器中的一个或多个鸟嘌呤存在碱基修饰；
所述碱基修饰为对针对鸟嘌呤的脱氨修饰。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述单链核酸检测器由多个连续的碱基为鸟嘌呤(G)的核苷酸组成。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述单链核酸检测器由至少4个连续的碱基为鸟嘌呤(G)核苷酸的组成，并且所述单链核酸检测器中的一个或多个鸟嘌呤存在碱基修饰以使所述单链核酸检测器不存在2个或更多个连续的未经修饰的碱基为鸟嘌呤(G)的核苷酸。


4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述单链核酸检测器中的全部的鸟嘌呤都存在脱氨修饰。


5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述鸟嘌呤脱氨修饰成为次黄嘌呤(I)。


6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述V型Cas蛋白选自Cas1...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁亚峰，
申请(专利权)人：山东舜丰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37