【技术实现步骤摘要】
一种木糖醇菌株、发酵培养基、优化方法及应用
本专利技术属于木糖醇生产
,尤其涉及一种木糖醇菌株、发酵培养基、优化方法及应用。
技术介绍
目前,木糖醇是一种天然甜味剂,化学名为“戊五糖”,是一种五碳糖。外表和味觉都与蔗糖相似,具有清凉甜味,和其他糖醇比较,是多元醇中最甜的甜味剂。目前已广泛应用于食品、印染、纺织、医药、国防、化工及皮革等领域。木糖醇的传统生产方法主要以玉米芯和甘蔗渣为原料,利用酸水解预处理,经多次精制获得木糖,再采用加氢技术生产木糖醇,存在污染严重、高消耗、产量低、生产成本高等缺点。采用生物转化法生产木糖醇,可省去多次提纯、精制步骤,同时实现绿色生产生物转化法生产木糖醇以其反应条件温和、消耗资源少和对环境污染小等优点成为了研究热点,但生物转化法存在木糖醇的生产率低、菌株生产能力低的缺点。通过上述分析,现有技术存在的问题及缺陷为:(1)传统生产木糖醇的方法存在污染严重、高消耗、产量低、生产成本高等缺点。(2)现有通过生物转化法生产木糖醇存在木糖醇的生产率低、菌株生产能力低的缺 ...
【技术保护点】
1.一种木糖醇菌株,其特征在于,所述木糖醇菌株为木糖醇转化菌,Y-3号。/n
【技术特征摘要】
1.一种木糖醇菌株,其特征在于,所述木糖醇菌株为木糖醇转化菌,Y-3号。
2.一种如权利要求1所述木糖醇菌株在木糖醇生产中的应用。
3.一种如权利要求1所述木糖醇菌株发酵的培养基,其特征在于,所述培养基包括:
种子培养基:D-木糖20g,酵母膏5g,磷酸二氢钾2g,二水氯化钙0.1g,七水硫酸镁基0.2g,硫酸铵5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,pH=6.0,于121℃,湿热灭菌20min;
菌种保藏培养基:葡萄糖20g,酵母膏5g,磷酸二氢钾2g,二水氯化钙0.1g,七水硫酸镁0.2g,硫酸铵5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,pH=6.0,于121℃,湿热灭菌20min;
发酵培养基:竹笋壳水解液,木糖含量20g,蛋白胨10g,酵母粉10g,蒸馏水1000mL,pH=6.0,于121℃,湿热灭菌20min。
4.一种如权利要求3所述培养基的优化方法,其特征在于,所述培养基的优化方法包括:
步骤一,菌悬液的制备:将Y-3号菌株接入斜面培养基培养,离心弃上清,生理盐水洗涤两次,转入大试管制成菌悬液;
步骤二,化学诱变:向大试管中依次加入亚硝酸钠溶液和菌悬液后,立即加入醋酸缓冲液,诱变5min后加磷酸氢二钠溶液以终止反应;
步骤三,菌落的筛选与发酵:从每套平板中挑选菌落长势较好,菌落形状规则,直径较大的单菌落依次接入种子培养液、发酵培养基中培养;
步骤四,发酵液木糖浓度和木糖醇浓度测定:根据木糖标准曲线回归方程和木糖醇标准曲线回归方程分别计算发酵液中木糖和木糖醇的质量浓度;
步骤五,木糖醇转化率计算:初始培养基的木糖浓度均为20mg/mL,按木糖醇转化率公式进行木糖醇转化率的计算;
步骤六,紫外诱变:将经过亚硝酸钠诱变木糖醇转化率最高的菌株接入斜面培养基,制备菌悬液,紫外灯照射,计算木糖醇转化率;
步骤七,二轮复合诱变:取经过紫外诱变后木糖醇转化率最高的菌株再依次进行依次化学诱变和紫外诱变;
步骤八,发酵培养基氮源与无机盐的优化:将经过二轮诱变后木糖醇转化率最高的菌株依次接入斜面培养基、种子培养基及酵培养基中摇床培养;
步骤九,发酵培养基的正交优化:在氮源和无机盐优化基础上,对氮源和无机盐进行四因素三水平的正交试验。
5.如权利要求4所述的培养基的优化方法,其特征在于,步骤一中,所述菌悬液的制备方法包括:
将Y-3号菌株接入10支斜面培养基,30℃、180r/min培养48h,取生长较好的5支,用生理盐水洗下菌苔,3000r/min离心10min弃上清,生理盐水洗涤两次,转入大试管制成菌悬液。
6.如权利要求4所述的培养基的优化方法,其特征在于,步骤二中,所述化学诱变的方法包括:
向大试管中依次加入0.2mol/L亚硝酸钠溶液和菌悬液各1mL后,立即加入1mLpH值为4.5的醋酸缓冲液,充分混合后,...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈雪松,杨胜利,
申请(专利权)人:浙江树人学院浙江树人大学,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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