斑马鱼软骨染色一步法试剂盒制造技术

一种斑马鱼软骨染色一步法试剂盒，包括溶液A为4%多聚甲醛溶液，溶液B由pH值7.5的浓度为100mM的Tris‑HCl缓冲液与浓度为10mM的MgCl

【技术实现步骤摘要】
斑马鱼软骨染色一步法试剂盒
本专利技术属于生物
，涉及一种斑马鱼软骨染色一步法试剂盒。
技术介绍
斑马鱼是近年来新兴的模式生物，具有体型小、身体透明、繁殖量大、生长发育快、养殖费用低等特点，正越来越多地被应用于科学研究中。在对斑马鱼进行研究时，需要对对斑马鱼的软骨进行染色，因此，有必要设计一种斑马鱼软骨染色一步法试剂盒。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种斑马鱼软骨染色一步法试剂盒。为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供的技术方案是：一种斑马鱼软骨染色一步法试剂盒，包括溶液A、溶液B、溶液C、溶液D、溶液E、溶液F、溶液G、溶液H、溶液I和溶液J；所述溶液A为4％多聚甲醛溶液，所述溶液B由pH值7.5的浓度为100mM的Tris-HCl缓冲液与浓度为10mM的MgCl2溶液组成的混合液；溶液C由0.04％阿可辛蓝与浓度为10mM的MgCl2溶液组成的混合液；溶液D由体积分数为80％的乙醇与浓度为10mM的MgCl2溶液组成的混合液；溶液E为体积分数为50％的乙醇；溶液F为体积分数为25％的乙醇；溶液G为体积分数6％的H2O2；溶液H为质量分数1％的KOH；溶液I为体积分数为的25％甘油和质量分数为0.1％的KOH溶液组成的混合液；溶液J为体积分数为的50％甘油和质量分数为0.1％的KOH溶液组成的混合液。优选的技术方案为：所述溶液B的配置方法：10ml的pH值7.5的浓度为1MTris-HCl缓冲液和1ml浓度为1MMgCl2溶液混合后加双蒸水至100ml。r>优选的技术方案为：所述溶液C的配置方法：20ml的0.2％阿可辛蓝、10ml的pH值7.5的浓度为1MTris-HCl缓冲液、1ml浓度为1MMgCl2溶液、65.2ml的体积分数为95％的乙醇混合后加双蒸水至100ml。优选的技术方案为：所述溶液D的配置方法：84.2ml的体积分数为95％的乙醇、10ml的pH值7.5的浓度为1MTris-HCl缓冲液和1ml浓度为1MMgCl2溶液混合后加双蒸水至100ml。优选的技术方案为：所述溶液E的配置方法：52.6ml的体积分数为95％的乙醇和混合后加双蒸水至100ml。优选的技术方案为：所述溶液F的配置方法：26.4ml的体积分数为95％的乙醇和混合后加双蒸水至100ml。优选的技术方案为：所述溶液G的配置方法：取10mL的体积分数为30％的H2O2加双蒸水至50mL；所述溶液H的配置方法：取2.5ml的质量分数为20％的KOH定容至50ml。优选的技术方案为：所述溶液I的配置方法：25ml的甘油和0.5ml的质量分数为20％的KOH溶液加双蒸水至100ml。优选的技术方案为：所述溶液I的配置方法：50ml的甘油和0.5ml的质量分数为20％的KOH溶液加双蒸水至100ml。由于上述技术方案运用，本专利技术与现有技术相比具有的优点是：1、本试剂盒能快速获得完整的斑马鱼软骨染色结果。2、本试剂盒省去了繁琐的试剂配制过程，避免了配制试剂差异造成的实验误差。3、本试剂盒大部分试剂均在(25℃)恒定条件下，保障了实验结果的重复性。5、本试剂盒极大简化了实验步骤，真正做到快速，简便，高效。附图说明图1斑马鱼软骨染色方法及其一步法试剂盒染色结果。具体实施方式以下由特定的具体实施例说明本专利技术的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点及功效。请参阅图1。须知，本说明书所附图式所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本专利技术可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本专利技术所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本专利技术所揭示的
技术实现思路
得能涵盖的范围内。同时，本说明书中所引用的如“上”、“下”、“左”、“右”、“中间”及“一”等的用语，亦仅为便于叙述的明了，而非用以限定本专利技术可实施的范围，其相对关系的改变或调整，在无实质变更
技术实现思路
下，当亦视为本专利技术可实施的范畴。实施例1-3：斑马鱼软骨染色一步法试剂盒溶液配制：溶液A：4％多聚甲醛溶液为市售产品。溶液B：100mM的Triss-HCl缓冲液(pH7.5)与10mMMgCl2混合液，100ml。10ml的1MTris-HCl缓冲液(pH7.5)+1ml的1MMgCl2，混合后加双蒸水至100ml。1MTris-HCl缓冲液(pH7.5)配制方法：12.14g的Tris溶于去离子水中，充分搅拌溶解，加HCl调节pH至7.5(所需浓盐酸的体积为6.6-7.1ML)；定容至100ml，高温高压灭菌(约半小时)后，室温保存。1MMgCl2配制方法：称取3.0495gMgCl2，溶于15ml双蒸水。溶液C：0.04％阿可辛蓝与10mMMgCl2混合液，100ml。配制方法：20ml的0.2％阿可辛蓝(上清液)、10ml的1M的Tris-HCl缓冲液(pH7.5)、1ml的1MMgCl2、65.2ml的体积分数为95％无水乙醇，混合后加双蒸水至100ml。0.2％阿可辛蓝与90％无水乙醇混合液(10ml)的配制方法：0.02g的阿可辛蓝8GX溶于1.25ml的体积分数为50％的乙醇，加热并剧烈震荡使其溶解，再加8.88ml的体积分数为95％无水乙醇，再加600μl的盐酸，剧烈震荡使其完全溶解，静置后如果出现沉淀，可取上清液。溶液D：体积分数为80％的无水乙醇与10mMMgCl2混合液，100ml。配制方法：84.2ml的体积分数为95％无水乙醇、10ml的1MTris-HCl缓冲液(pH7.5)和1ml的1MMgCl2混合后加双蒸水至100ml。溶液E：50％无水乙醇，100ml。配制方法：52.6ml的体积分数为95％无水乙醇、10ml的1MTris-HCl缓冲液(pH7.5)混合后加双蒸水至100ml。溶液F：25％无水乙醇，100ml。配制方法：26.4mlml的体积分数为95％无水乙醇、10ml的1MTris-HCl缓冲液(pH7.5)混合后加双蒸水至100ml。3％H2O2和0.5％KOH混合液配制方法：等量的6％H2O2和1％KOH混合即可。注：在使用前混合。溶液G：6％H2O2：取10mL体积分数为30％d额加双蒸水至50ml。溶液H：1％KOH：取20％KOH2.5ml定容至50ml。20％的KOH：称取20gKOH(固体)加入100ml的双蒸水。25％甘油和0.1％KOH混合液(100ml)--溶液I25ml100％甘油0.5ml20％KOH加双蒸水至100ml。50％甘油和0.1％KOH混合液(100ML)-溶液J50ml100％甘油0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种斑马鱼软骨染色一步法试剂盒，其特征在于：包括溶液A、溶液B、溶液C、溶液D、溶液E、溶液F、溶液G、溶液H、溶液I和溶液J；所述溶液A为4%多聚甲醛溶液，所述溶液B由pH值7.5的浓度为100mM的Tris-HCl缓冲液与浓度为10mM的 MgCl

【技术特征摘要】
1.一种斑马鱼软骨染色一步法试剂盒，其特征在于：包括溶液A、溶液B、溶液C、溶液D、溶液E、溶液F、溶液G、溶液H、溶液I和溶液J；所述溶液A为4%多聚甲醛溶液，所述溶液B由pH值7.5的浓度为100mM的Tris-HCl缓冲液与浓度为10mM的MgCl2溶液组成的混合液；溶液C由0.04%阿可辛蓝与浓度为10mM的MgCl2溶液组成的混合液；溶液D由体积分数为80%的乙醇与浓度为10mM的MgCl2溶液组成的混合液；溶液E为体积分数为50%的乙醇；溶液F为体积分数为25%的乙醇；溶液G为体积分数6%的H2O2；溶液H为质量分数1%的KOH；溶液I为体积分数为的25%甘油和质量分数为0.1%的KOH溶液组成的混合液；溶液J为体积分数为的50%甘油和质量分数为0.1%的KOH溶液组成的混合液。


2.根据权利要求1所述的斑马鱼软骨染色一步法试剂盒，其特征在于：所述溶液B的配置方法：10ml的pH值7.5的浓度为1MTris-HCl缓冲液和1ml浓度为1MMgCl2溶液混合后加双蒸水至100ml。


3.根据权利要求1所述的斑马鱼软骨染色一步法试剂盒，其特征在于：所述溶液C的配置方法：20ml的0.2%阿可辛蓝、10ml的pH值7.5的浓度为1MTris-HCl缓冲液、1ml浓度为1MMgCl2溶液、65.2ml的体积分数为95%的乙醇混合后加双蒸水至100ml。
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【专利技术属性】
技术研发人员：王明勇，
申请(专利权)人：苏州木芮生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32