一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种适用于野生毛柄钉灰包的培养基及培养方法。通过菌株分离、基础培养基、母种培养基和培养条件筛选试验，得到适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基及培养方法。本发明专利技术所述的培养基按照质量体积比计，包括：胰蛋白胨5‑15，酵母粉4‑6，NaCl 8‑12，营养土20‑30，芦苇基质20‑30，琼脂粉10‑30，蒸馏水800‑1500。利用该培养基培养的毛柄钉灰包菇菌丝体生长速度可达0.51‑0.64mm/d，菌丝长势强，本发明专利技术提供的技术方案解决了现有技术未见报道有关野生毛柄钉灰包菌株适合的培养基的技术问题，本发明专利技术提供的适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基及其培养方法，能够满足开展生物学研究的要求，为其人工驯化栽培方面具有现实的实用价值和应用推广价值。

A medium suitable for the culture of the wild pycnospora sp

【技术实现步骤摘要】
一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基
本专利技术涉及野生食用菌菌株的培养
，具体涉及一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基。
技术介绍
食用菌普遍富含蛋白质、多糖和维生素，而脂肪含量低，通常具有提高人体免疫力、改善人体机能、治疗心血管疾病的生理功效，被誉为21世纪的健康食品。随着人民生活水平的提高，人们对新型食用菌品种的需求逐渐增大，因此，新的野生食用菌品种开发成为形势发展的需要。钉灰包属(Battarrea.)建立于1801年，以内包被在与菌柄的连接处环裂以及孢体具有独特的弹丝区别于其它真菌，全世界记载有3种。钉灰包属的成员均具有大型的担子果，且外形特征变化较大，部分鉴别特征有时难于获得，导致种的概念的混乱，以致于一度认为毛柄钉灰包是鬼笔状钉灰包的一种形态。刘虹和范黎等认为钉灰包属(Battarrea)的毛柄钉灰包(B.stevenii)和鬼笔状钉灰包(B.phalloides)是两个独立的种。毛柄钉灰包(B.stevenii)担子果大型，最初埋生于地下，球形，可食用，包被与柄的帽状顶端相连，成熟后地上生，包被在与柄的连接处环裂。当前并未有毛柄钉灰包驯化栽培的报道，现有技术研究表明，野生毛柄钉灰包菌株在普通马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上基本不生长，现有技术也未见报道有关野生毛柄钉灰包菌株适合的培养基，难以满足开展生物学研究的要求，也不便于作为菌种进行人工驯化栽培研究，因此，亟待开发野生毛柄钉灰包菌株的分离培养方法。
技术实现思路
针对现有技术中未见报道有关野生毛柄钉灰包菌株适合的培养基，以及野生毛柄钉灰包菌株在普通马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上基本不生长，难以满足开展生物学研究的要求，不便于作为菌种进行人工驯化栽培研究的技术现状，本专利技术旨在提供一种适用于野生毛柄钉灰包的培养基及野生毛柄钉灰包菌株的培养方法。通过菌种分离、基础培养基、母种培养基和培养条件的筛选试验，得到野生毛柄钉灰包菌适用的培养基，利用该培养基培养的野生毛柄钉灰包菌丝体生长速度较快，菌丝长势强，能够满足开展生物学研究的要求，便于开展毛柄钉灰包菌种的人工驯化栽培研究，为其人工驯化栽培奠定了技术基础。为了达到以上技术目的，本专利技术采用的技术方案包括为：本专利技术具体提供的一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基，按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨5-15，酵母粉4-6，NaCl8-12，营养土20-30，芦苇基质20-30，琼脂粉10-30，蒸馏水800-1500。优选的，一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基，按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨10，酵母粉5，NaCl10，营养土25，芦苇基质25，琼脂粉20，蒸馏水1000。本专利技术中，所述芦苇基质使用前需晒干粉碎，过40目筛。本专利技术中，所述的营养土使用前需晒干粉碎，过40目筛。同时，本专利技术提供一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养方法，采用上述提供的培养基，具体野生毛柄钉灰包菌株的培养方法包括如下步骤：(1)培养基的制备：在去离子水中加入胰蛋白胨、酵母粉和NaCl，搅拌直至各溶质溶解，摩尔浓度为1.0mol/L的NaOH溶液调节pH值至6.0，然后加入营养土、芦苇基质和琼脂粉，最后用去离子水定容至1000mL，将已制备好的培养基趁热分装于试管内，每支10ml，用硅胶塞塞紧试管口，按每10支为一捆，用报纸或牛皮纸包紧有硅胶塞的一端，放入高压灭菌锅内灭菌，压力为1.0-1.5kg/cm2，温度为115-120℃，时间为20-30min，取出试管摆斜面，冷却凝固后为母种培养基；(2)野生毛柄钉灰包子实体组织分离：在野生毛柄钉灰包分布区采集其幼嫩子实体，以未开伞为宜，用报纸或透气袋包裹子实体，带回实验室进行菌种分离，用刷子将子实体表面杂质清理干净，用75％酒精仔细擦拭子实体表面进行消毒，在无菌条件下，将子实体纵向掰开，用灼烧杀菌的镊子或手术刀在掰开的新鲜子实体截面上取出黄豆粒大小的子实体菌肉组织，接种至步骤(1)所得专用母种培养基斜面上；(3)将接种好的菌种放置于22-28℃恒温培养箱暗培养，待菌丝体长好后备用，取生长快，无杂菌污染的菌丝块再次移入另一斜面培养基表面，22-28℃培养，菌丝长满斜面且无杂菌，即为野生毛柄钉灰包菇母种，制备获得野生毛柄钉灰包的培养。本专利技术通过以上技术方案，最终形成一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基及培养方法，具有以下技术效果：(1)本专利技术提供一种适用于野生毛柄钉灰包的培养基及野生毛柄钉灰包菌株的培养方法，野生毛柄钉灰包菌以LB为基础培养基时，菌丝体的生长速度为0.23mm/d，长势最佳，在常用的PDA培养基上基本不吃料，进而以LB为基础培养基，设置不同的母种培养基配方，野生毛柄钉灰包菌菌丝体的生长速度为0.23-0.61mm/d，其中在本专利技术提供的培养基及培养条件下菌丝体的生长速度达0.51-0.64mm/d，且菌丝长势强。(2)本专利技术提供的一种适用于野生毛柄钉灰包的培养基及野生毛柄钉灰包菌株的培养方法，克服了现有技术未见报道有关野生毛柄钉灰包菌株适合的培养基，结合本专利技术培养基及野生毛柄钉灰包菌株的培养方法，能够满足开展生物学研究的要求，便于开展毛柄钉灰包菇菌种的人工驯化栽培研究，为其人工驯化栽培方面具有现实的实用价值和应用推广价值。附图说明无具体实施方式下面举实施例说明本专利技术，但是本专利技术并不限于下述的实施例。本专利技术中野生毛柄钉灰包的分离培养中选用的营养土、芦苇基质、胰蛋白胨、琼脂粉、酵母粉、蒸馏水等均可通过公共渠道购买，工艺中所采用的设备和仪器均为本领域常见的设备。实施例1：适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，NaCl10g/L，营养土25g/L，芦苇基质25g/L，琼脂粉20g/L，蒸馏水1000g/L。实施例2：适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨5g/L，酵母粉6g/L，NaCl12g/L，营养土20g/L，芦苇基质30g/L，琼脂粉10g/L，蒸馏水1000g/L。实施例3：适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨15g/L，酵母粉4g/L，NaCl8g/L，营养土25g/L，芦苇基质20g/L，琼脂粉20g/L，蒸馏水800g/L。实施例4：适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，NaCl10g/L，营养土30g/L，芦苇基质30g/L，琼脂粉25g/L，蒸馏水1200g/L。实施例5：适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基按照质量体积比计本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基，其特征在于，按照质量体积比计，培养基包括：胰蛋白胨5-15，酵母粉4-6，NaCl 8-12，营养土20-30，芦苇基质20-30，琼脂粉10-30，蒸馏水800-1500。/n

【技术特征摘要】
1.一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基，其特征在于，按照质量体积比计，培养基包括：胰蛋白胨5-15，酵母粉4-6，NaCl8-12，营养土20-30，芦苇基质20-30，琼脂粉10-30，蒸馏水800-1500。


2.根据权利要求1所述的一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基，按照质量体积比计，其特征在于，培养基包括：胰蛋白胨10，酵母粉5，NaCl10，营养土25，芦苇基质25，琼脂粉20，蒸馏水1000。


3.根据权利要求1所述的一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基，其特征在于，所述芦苇基质使用前需晒干粉碎，过40目筛。


4.根据权利要求1所述的一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基，其特征在于，所述的营养土使用前需晒干粉碎，过40目筛。


5.一种采用适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基的培养方法，其特征在于，所述毛柄钉灰包的培养方法包括以下步骤：
(1)培养基的制备：在去离子水中加入胰蛋白胨、酵母粉和NaCl，搅拌直至各溶质溶解用，摩尔浓度为1mol/L的NaOH溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：努尔孜亚·亚力买买提，贾培松，罗影，贾文婕，魏鹏，郝敬喆，高海峰，宋博，关永强，丁丽丽，
申请(专利权)人：新疆农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：新疆;65