人凝血酶受体PAR4的结合蛋白制造技术

本公开涉及人蛋白酶活化受体4(PAR4)结合蛋白(例如抗体)。特别地，作为人PAR4的拮抗剂的抗PAR4结合蛋白以及其方法和用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】人凝血酶受体PAR4的结合蛋白【以引用的方式并入】本文所引用或参考的所有文件和本文引用的文件中引用或参考的所有文件，以及本文提及的任何产品或在本文中以引用的方式并入的任何文件中的任何制造商说明书、描述、产品说明书和产品清单特此以引用的方式整体并入本文。本申请要求2017年9月11日提交的澳大利亚专利申请2017903685的优先权，所述申请的全部内容以引用的方式并入本文。序列表电子提交的全部内容出于所有目的以引用的方式整体并入。
本公开涉及人蛋白酶活化受体4(PAR4)结合蛋白(例如抗体)。特别地，作为人PAR4的拮抗剂的抗PAR4结合蛋白以及其方法和用途。【专利技术背景】活化的血小板是动脉血栓形成的关键细胞组分，动脉血栓形成是世界上死亡和残疾的最常见原因(RosendaalFR等人(2014)384:1653-4)，占许多国家的死亡的近40％(MozaffarianD等人(2015)Circulation131e29-322)，包括澳大利亚(澳大利亚统计局，CausesofDeath,Australia本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛋白酶活化受体4(PAR4)结合蛋白，所述蛋白酶活化受体4(PAR4)结合蛋白是抗PAR4重组或合成或单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述结合蛋白在凝血酶存在下将细胞表面表达的人PAR4的切割抑制等于或大于50％。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170911 AU 20179036851.一种蛋白酶活化受体4(PAR4)结合蛋白，所述蛋白酶活化受体4(PAR4)结合蛋白是抗PAR4重组或合成或单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述结合蛋白在凝血酶存在下将细胞表面表达的人PAR4的切割抑制等于或大于50％。


2.根据权利要求1所述的PAR4结合蛋白，其中所述蛋白质在凝血酶存在下抑制细胞表面表达PAR4的(i)60％或更高或(ii)70％或更高或(iii)80％或更高的切割。


3.根据权利要求1或2所述的PAR4结合蛋白，其中所述蛋白质在凝血酶存在下抑制细胞表面表达的PAR4的90％或更高的切割。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的PAR4结合蛋白，所述PAR4结合蛋白特异性地结合至跨越PAR4的凝血酶切割位点的表位。


5.根据权利要求4所述的PAR4结合蛋白，其中所述表位包含序列APRGY，并且其中所述凝血酶切割位点对应于RG。


6.根据权利要求4或5所述的PAR4结合蛋白，其中所述表位包含选自ILPAPGRGY或APRGYPGQV的序列或由选自ILPAPGRGY或APRGYPGQV的序列组成。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的PAR4结合蛋白，其中所述抗体结合至人PAR4的Ala120和/或Thr120变体。


8.根据权利要求1至7中任一项所述的PAR4结合蛋白，其中所述蛋白质不结合或基本上不结合至人PAR1、PAR2或PAR3。


9.根据权利要求1至8中任一项所述的PAR4结合蛋白，所述PAR4结合蛋白包含以下中列出的可变重链(VH)序列：
QX1QLVESGGGVVQPGRSLRLSCX2ASGFX3X4SX5X6GMHWVRQAPGKGLEWVX7VIWX8DGX9X10X11X12YX13DSVX14GRFX15ISRDX16SKNTX17X18LQMNX19LRAEDTAVYYCAREX20X21X22X23X24X25X26PFDYWGQGTLVTVSS
其中
X1是V或I；
X2是A或V；
X3是T或A；
X4是L或F；
X5是N或S；
X6是Y或D；
X7是S或A；
X8是Y或F；
X9是S或R；
X10是N或S；
X11是K或R；
X12是H或Y；
X13是A、L或T；
X14是K或R；
X15是T或D；
X16是N或T；
X17是L或Q；
X18是Y或F；
X19是S或I；
X20是S或T；
X21是I、S或A；
X22是V、I、M或L；
X23是E、S、V或I；
X24是V、T、R或G；
X25是L、R或G；并且
X26是P或V。


10.根据权利要求1至9中任一项所述的PAR4结合蛋白，所述PAR4结合蛋白包含以下中列出的可变轻链(VL)序列：
X1IVLTQSPGTLSLSPGERX2TLSCX3X4SQX5X6RX7X8YLAWX9QQKPGQAPRL
X10IYGASSRATGX11PDRFSGSGSGTDFX12X13TIX14RLEPEDFAX15YYCQQYGX16SYTFGQGTKLEIK
其中
X1是K或E；
X2是V或A；
X3是R或G；
X4是A或T；
X5是R或S；
X6是V或I；
X7是N或S；
X8是N或S；
X9是F或Y；
X10是F或L；
X11是I或T；
X12是I或T；
X13是F或L；
X14是S或T；
X15是V或L；并且
X16是N、R或S。


11.根据权利要求9或10所述的PAR4结合蛋白，其中所述VH包含选自由以下组成的组的CDR1序列：
(i)GFTLSNYG(SEQIDNO:13)；
(ii)GFTFSSDG(SEQIDNO:59)；
(iii)GFTFSNYG(SEQIDNO:68)；
(iv)GFTFSSYG(SEQIDNO:55)；
(v)GFAFSSYG(SEQIDNO:70)；以及
(vi)GFTLSSYG(SEQIDNO:75)。


12.根据权利要求9至11中任一项所述的PAR4结合蛋白，其中所述VH包含选自由以下组成的组的CDR2序列：
(i)IWYDGSNK(SEQIDNO:14)；
(ii)IWFDGRNK(SEQIDNO:60)；
(iii)IWYDGSNR(SEQIDNO:71；以及
(iv)IWYDGSSK(SEQIDNO:76)。


13.根据权利要求9至12中任一项所述的PAR4结合蛋白，其中所述VH包含选自由以下组成的组的CDR3序列：
(i)ARESIVEVLPPFDY(SEQIDNO:15)；
(ii)ARESSISTRPPFDY(SEQIDNO:61)；
(iii)ARETIMVRGVPFD(SEQIDNO:69)；
(iv)ARETALVRGVPFDY(SEQIDNO:56)；
(v)ARETAMVRGVPFDY(SEQIDNO:72)；以及
(vi)ARETILIGGVPFDY(SEQIDNO:77)。


14.根据权利要求10所述的PAR4结合蛋白，其中所述VL包含选自由以下组成的组的CDR1序列：
(i)QRVRNNY(SEQIDNO:16)；
(ii)QSVRSSY(SEQIDNO:57)；以及
(iii)QSIRSNY(SEQIDNO:78)。


15.根据权利要求10或14所述的PAR4结合蛋白，其中所述VL包含CDR2序列GAS(SEQIDNO:28)。


16.根据权利要求10、14或15所述的PAR4结合蛋白，其中所述VL包含选自由以下组成的组的CDR3序列：
(i)QQYGNSYT(SEQIDNO:18)；
(ii)QQYGRSYT(SEQIDNO:62)；以及
(iii)QQYGSSYT(SEQIDNO:58)。


17.根据权利要求1至8中任一项所述的PAR4结合蛋白，所述PAR4结合蛋白包含以下中列出的可变重链(VH)序列：
QVQLQQWGAGLLKPSETLX1LX2CAX3X4X5GSX6SX7YX8WX9WIX10QPPGKGLEWIGEIX11HX12GX13TX14YNPSLKSRVTISVDTSKX15QX16SLX17LSSVTAADTAVYYCX18X19EX20SX21SX22GX23YYYGMDVWGQGTTVTVSS
其中
X1是A或S；
X2是T或A；
X3是V或I；
X4是Y或S；
X5是G或S；
X6是L或F；
X7是N、D或T；
X8是Y或F；
X9是S或R；
X10是R或H；
X11是N或I；
X12是S或T；
X13是T或S；
X14是N或T；
X15是K或N；
X16是F或L；
X17是K或N；
X18是A或K；
X19是I、F或V；
X20是Y或H；
X21是N或S；
X22是R、G或S；并且
X23是V或H。


18.根据权利要求1至9或17中任一项所述的PAR4结合蛋白，所述PAR4结合蛋白包含如以下所列出的可变轻链(VL)序列：
DIQMTQSPSSLSASX1GDRX2TITCRASQX3ISX4YLNWYQQX5PGKAPX6LLIYAASX7LX8SGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFX9X10YYCX11QX12YX13TPLTFGGGTKX14IK
其中
X1是V或A；
X2是V或I；
X3是S或T；
X4是S、Y或N；
X5是K或I；
X6是N或K；
X7是R或S；
X8是R或Q；
X9是T或A；
X10是T或S；
X11是Q或R；
X12是T、S或N；
X13是N或N；
X14是E或G。


19.根据权利要求18所述的PAR4结合蛋白，其中所述VH包含选自由以下组成的组的CDR1序列：
(i)GGSLSDYY(SEQIDNO:86)；
(iii)SGSFSTYF(SEQIDNO:47)；以及
(iv)GGSFSNYY(SEQIDNO:66)。


20.根据权利要求18或19所述的PAR4结合蛋白，其中所述VH包含选自由以下组成的组的CDR2序列：
(i)INHSGTT(SEQIDNO:87)；
(ii)IIHTGST(SEQIDNO:64)；或
(iii)INHSGST(SEQIDNO:48)。


21.根据权利要求18、19或20所述的PAR4结合蛋白，其中所述VH包含选自由以下组成的组的CDR3序列：
(i)AI...

【专利技术属性】
技术研发人员：J·哈米尔顿，M·斯利曼，
申请(专利权)人：莫纳什大学，
类型：发明
国别省市：澳大利亚;AU