包含人胰高血糖素和共聚氨基酸的可注射水溶液形式的组合物制造技术

本发明专利技术还涉及呈可注射水溶液形式的物理稳定的组合物，其pH包括6.0至8.0，包含至少：a)人胰高血糖素，和b)带有羧酸根电荷及Hy疏水基的共聚氨基酸，在一个实施方案中，根据本发明专利技术的组合物还包含胃肠激素。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含人胰高血糖素和共聚氨基酸的可注射水溶液形式的组合物人胰高血糖素是一种短效的高血糖激素，其使得有可能增加糖血，从而纠正可能会导致胰岛素过量的低血糖水平。其允许通过刺激肝糖分解而释放葡萄糖，并且其具有胰岛素的拮抗特性(降血糖)。当检测到低血糖时，人胰高血糖素通常由胰腺中的郎格罕氏岛的α细胞分泌。人胰高血糖素用于治疗目的，如严重低血糖症的紧急治疗，也称为“急救”，但也用于医学检查期间的诊断框架，例如用以抑制胃肠蠕动。还设想了人胰高血糖素的其它应用，特别是其在调节糖血的双激素系统(也称为人工胰腺)中的用途，以及在先天性高胰岛素血症中的用途，这是一种以胰岛素水平非常高为特征的罕见疾病。由于人胰高血糖素的一些特性不利于开发旨在用于治疗用途的稳定药物产品，因此其临床使用受到限制。实际上，由于人胰高血糖素在很宽的pH范围内倾向于形成原纤维，因此其在生理pH下的溶解度非常低，具有高度的物理不稳定性。正是由于这个原因，基于人胰高血糖素的仅有的商业产品(NOVONORDISK和注射用胰高血糖素，ELILILLY)呈用于进行临时复溶的冻干形式。Onoue等人的工作(Pharm.Res.2004，21(7)，1274-83)表明这些原纤维有潜在的危害性：因为原纤化的人胰高血糖素对培养物中的哺乳动物细胞具有细胞毒性。人胰高血糖素除了具有物理不稳定性之外，其还会经历各种类型的化学劣变。在水溶液中，其快速劣变，形成若干劣变产物。Kirsh等人确认了人胰高血糖素的至少16种劣变产物(InternationalJournalofPharmaceutics，2000，203，115-125)。因此这种人胰高血糖素的化学劣变快速且复杂。人胰高血糖素在溶液中的不良化学和物理稳定性导致制药公司如NOVONORDISK、ELILILLY以及近来的FRESENIUSKABI以冻干物的形式销售这种人胰高血糖素，冻干物要在临注射之前在酸性pH(pH＜3)下复溶。呈冻干物形式的人胰高血糖素更稳定，并且在临使用之前在酸性pH下制备制剂使得有可能获得澄清溶液。然而，一旦将产品复溶，则必须快速使用，因为其在酸性复溶缓冲液中会经历极其快速的化学和物理劣变，在复溶后24小时内出现人胰高血糖素原纤维，和/或出现组合物的凝胶化。然而，产品的这种呈现方式差强人意，因为其需要非常快速地使用制剂。这种不稳定性不仅使泵无法使用，而且还涉及到在诊断使用中导致产品显著损失的问题。实际上，由于这种类型的组合物仅可在制备后的几个小时使用，这就会造成浪费。最后，即使是在对糖尿病患者实行胰岛素治疗期间可能会发生的严重低血糖反应进行紧急治疗的应用中，要复溶的制剂也不是理想的，因为其需要冗长且复杂的制备过程，例如，的患者信息描述了一种5步过程以制备推荐的剂量。此外，Locemia的研究表明，在紧急情况下必须完成复溶的人中极少数(约10％的参与者)能够递送适当的剂量。最后，在注射到患者体内后，人胰高血糖素溶液的pH可引起疼痛。因此，需要开发即用型人胰高血糖素溶液。现今，从临床角度来看，实现递送人胰高血糖素的最先进的溶液以不同的方式规避了人胰高血糖素在水溶液中的稳定性问题。Locemia完善了冻干人胰高血糖素的喷雾剂，其目前正在进行3期临床试验的测试，旨在用于鼻内施用。这种喷雾剂适于所谓的“营救”用途，即严重低血糖的情况，因为其是即用的，并因此易于使用，这与必须制备的溶液形成对照。然而，这种产品不适合泵用或需要精确控制人胰高血糖素递送量的任何用途。Xeris开发了一种人胰高血糖素的液体制剂，其基于极性非质子溶剂如DMSO，目前正进行临床试验的测试。然而，如果设想注射有机溶剂溶液用于“营救”类型的用途，则非常优选的是具有用于长期使用的人胰高血糖素的水溶液。设想了包含与其它肽缔合的组合物，特别是胰淀素或GLP-1RA(胰高血糖素样肽-1受体激动剂)。最后，考虑到人胰高血糖素制剂的困难，大型制药公司如NOVONORDISK、SANOFI或ELILILLY正在开发人胰高血糖素的类似物，以便获得稳定性与药物用途相容的制剂。然而，与来源于人的肽相比，这些肽的一级序列被修饰，这可能会对患者构成安全风险。因此，有可能改善人胰高血糖素在接近生理pH(即6.0至8.0)的pH下的水溶液中的溶解性以及化学和物理稳定性的溶液非常受关注。这可使得有可能获得患者在紧急情况下更容易使用的药物产品，而且也开辟了人胰高血糖素的新的治疗应用领域，比如其在双激素人工胰腺中的用途。现有技术提出了试图解决这一问题的解决方案。某些文件提出采用碱性pH。例如，US2015291680教导了通过采用8.8至9.4的pH和使用阿魏酸或四氢姜黄素以1mg/ml溶解人胰高血糖素。然而，除了采用碱性pH的事实之外，这种解决方案还存在着导致人胰高血糖素随时间的推移稳定性非常有限的问题。Jackson等人的文章(Curr.Diab.Rep.，2012，12，705-710)提出在碱性pH(约10)下配制人胰高血糖素，以便限制原纤维的形成。然而，这一解决方案并未阻止人胰高血糖素的快速化学劣变。相反，申请WO2014096440(NOVOZYME)考虑在白蛋白和聚山梨醇酯存在下采用略微酸性的pH(约5.5)，以便通过降低原纤化的速度来提高稳定性。然而，这种解决方案提供的稳定性提高有限。现有技术中描述的使得有可能获得人胰高血糖素的澄清溶液并阻止人胰高血糖素的聚集、凝胶化或沉淀的大多数解决方案都涉及使用已知的表面活性剂、清洁剂或增溶剂。例如，Matilainen等人(J.Pharm.Sci，2008，97，2720-2729和Eur.J.Pharm.Sci.，2009，36，412-420)描述了使用环糊精来限制人胰高血糖素原纤维的形成速率。然而，所提供的改进似乎不足以考虑在泵中使用。提出的解决方案当中有亲水性表面活性剂：-GB1202607(NOVONORDISK)描述了使用阴离子或阳离子洗涤剂；-US6384016(NOVONORDISK)和US2011097386(BIODEL)使用溶血磷脂(或溶血卵磷脂)。-WO2015095389(AEGIS)描述了非离子表面活性剂，如十二烷基麦芽糖苷，用以在通过施加于粘液或表皮进行递送的情况下、特别是在经眼、经鼻、口服或经鼻泪管递送的情况下提高治疗剂的生物利用度。该文件描述了烷基糖苷的存在导致经眼施用的人胰高血糖素的吸收得到改善。-申请WO2012059764(ARECOR)描述了阳离子表面活性剂，和更具体为芳族氯化铵。上述文件中引用的表面活性剂对于长期皮下使用来说可能毒性太大或有刺激性。例如，已知溶血磷脂(或溶血卵磷脂)由于其具有溶血特性而裂解红细胞。在皮下注射之时，这可能会导致组织局部损伤和注射部位疼痛。在通过泵连续注射的情况下，这可能会导致插针部位疼痛和/或刺激。国际申请WO2011138802(SunPharma)描述了一种在聚乙二醇化脂质(聚乙二醇化二硬脂酰-磷脂酰乙醇胺)存在下的人胰高血糖素在pH为5至7本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种呈可注射水溶液形式的组合物，其pH包括6.0至8.0，包含至少：/na)人胰高血糖素；/nb)带有羧酸根电荷及疏水基Hy的共聚氨基酸，所述共聚氨基酸由谷氨酸或天冬氨酸单元组成，并且所述疏水基Hy根据如下所定义的式X选择：/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171207 FR 1761809;20180629 FR 1855939;20171207 U1.一种呈可注射水溶液形式的组合物，其pH包括6.0至8.0，包含至少：
a)人胰高血糖素；
b)带有羧酸根电荷及疏水基Hy的共聚氨基酸，所述共聚氨基酸由谷氨酸或天冬氨酸单元组成，并且所述疏水基Hy根据如下所定义的式X选择：



其中
-GpR选自根据式根据式VII、VII’或VII”的基团：



-相同或不同的GpG和GpH选自根据式XI或XI’的基团；

＊-NH-G-NH-＊式XI’
-GpA选自根据式VIII的基团



其中A’选自根据式VIII’、VIII”或VIII”’的基团



-GpL选自根据式XII的基团



-GpC是根据式IX的基团：



-*指示由酰胺官能团结合的不同基团的连接位点；
-a是等于0或等于1的整数，且如果a＝0，则a’＝1，并且如果a＝1，则a’＝1、2或3；
-a’是等于1、等于2或等于3的整数；
-b是等于0或等于1的整数；
-c是等于0或等于1的整数，且如果c等于0，则d等于1或等于2；
-d是等于0、等于1或等于2的整数；
-e是等于0或等于1的整数；
-g是等于0、等于1、等于2、等于3、等于4、等于5或等于6的整数；
-h是等于0、等于1、等于2、等于3、等于4、等于5或等于6的整数；
-l是等于0或等于1的整数，且如果l＝0，则l’＝1，并且如果l＝1，则l’＝2；
-r是等于0、1或等于2的整数；
-s’是等于0或等于1的整数；
-并且如果e不同于0，则g、h或l中的至少一者不同于0；
-并且如果a＝0，则l＝0；
-A、A1、A2和A3相同或不同，为包含1至8个碳原子且任选被来自饱和环、不饱和环或芳族环的基团取代的直链或支链烷基；
-B是未取代的包含4至14个碳原子和1至5个氧原子的基团醚或聚醚，或任选包含芳族环的包含1至9个碳原子的直链或支链烷基；
-Cx是任选包含环状部分的直链或支链单价烷基，其中x指示碳原子数，且：
-当疏水基-Hy带有1个-GpC时，则9≤x≤25，
-当疏水基-Hy带有2个-GpC时，则9≤x≤15，
-当疏水基-Hy带有3个-GpC时，则7≤x≤13，
-当疏水基-Hy带有4个-GpC时，则7≤x≤11，
-当疏水基-Hy带有至少5个-GpC时；6≤x≤11；
-G是1至8个碳原子的支链烷基，所述烷基带有一个或多个游离羧酸官能团。
-R是选自由以下组成的组的基团：包含1至12个碳原子的二价直链或支链烷基；带有一个或多个-CONH2官能团的包含1至12个碳原子的二价直链或支链烷基；或包含4至14个碳原子和1至5个氧原子的未取代的醚或聚醚基团。
-根据式X的一个或多个疏水基-Hy以如下方式与PLG结合：
o经由疏水基-Hy的羰基与PLG所带有的氮原子之间的共价键，从而形成由PLG所带有的胺官能团和疏水基-Hy的前体Hy’所带有的酸官能团反应得到的酰胺官能团，和
o经由疏水基-Hy的氮原子与PLG所带有的羰基之间的共价键；从而形成由疏水基-Hy的前体-Hy’的胺官能团和PLG所带有的酸官能团反应得到的酰胺官能团。
-疏水基数与谷氨酸或天冬氨酸单元数之间的比率M在0＜M≤0.5之间；
-当几个疏水基由共聚氨基酸所带有时，则它们是相同的或不同的，
-PLG链的谷氨酸或天冬氨酸单元的聚合度DP包括5至250；
-游离羧酸呈在由Na+和K+组成的组中选择的碱阳离子盐形式。


2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，带有羧酸根电荷及疏水基的共聚氨基酸选自根据下式XXX的共聚氨基酸：



其中，
·D独立地表示-CH2-基团(天冬氨酸单元)或-CH2-CH2-基团(谷氨酸单元)，
·Hy是选自根据式X的疏水基的疏水基，其中r＝1，且GpR是根据式VII的基团。
·R1是选自根据式X的疏水基的疏水基，其中r＝0或r＝1，并且GpR是根据式VII’的基团，或选自由以下组成的组的基团：H、C2至C10的直链酰基、C3至C10的支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸根，
·R2是选自根据式X的疏水基的疏水基，其中r＝1，且GpR是根据式VII的基团或-NR’R”，R’和R”基团相同或不同，选自由H、C2至C10的直链、支链或环状烷基、苄基组成的组，且所述R’和R”烷基能够一起形成一个或多个饱和的、不饱和的和/或芳族的环，和/或能够包含选自由O、N和S组成的组的杂原子，
·X表示H或选自包括金属阳离子的组的阳离子实体；
·n+m表示共聚氨基酸的聚合度DP，即每一共聚氨基酸链的单体单元的平均数，且5≤n+m≤250；
·n+m表示共聚氨基酸的聚合度DP，即每一共聚氨基酸链的单体单元的平均数，且5≤n+m≤250。


3.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，所述带有羧酸根电荷及疏水基的共聚氨基酸选自根据式XXX的共聚氨基酸，其中根据下式XXXb，n＝0：



其中m、X、D、R1和R2具有上面给出的定义，并且至少R1或R2是根据式X的疏水基。


4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述带有羧酸根电荷及疏水基的共聚氨基酸选自根据式XXXb的共聚氨基酸，其中R2是根据式X的疏水基，其中r＝1，且GpR是根据式VII’。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其特征在于，所述带有羧酸根电荷及疏水基的共聚氨基酸选自根据式XXX、XXXb的共聚氨基酸，其中至少一种共聚氨基酸选自其中D基团是-CH2-基团(天冬氨酸单元)的共聚氨基酸。


6.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其特征在于，所述带有羧酸根电荷及疏水基的共聚氨基酸选自根据式XXX、XXXb的共聚氨基酸，其中至少一种共聚氨基酸选自其中D基团是-CH2-CH2-基团(谷氨酸单元)的共聚氨基酸。


7.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，带有羧酸根电荷及疏水基的共聚氨基酸的浓度至多为40mg/mL。


8.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，人胰高血糖素的浓度包括0.25至5mg/mL。


9.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，[疏水基]/[人胰高血糖素]摩尔比大于或等于15。


10.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，其还包含聚阴离子化合物。


11.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，其还包含锌盐。


12.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于，其还包含胃肠激素。


13.根据权利要求12所述的组合物，其特征在于，所述胃肠激素选自由艾塞那肽、利拉鲁肽、利西拉肽、阿必鲁肽和度拉糖肽...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈友平，亚历山大·盖斯勒，罗曼·诺埃尔，里夏尔·沙尔韦，尼古拉斯·劳伦特，
申请(专利权)人：阿道恰公司，
类型：发明
国别省市：法国;FR