用于鉴别病毒性感染与细菌性感染的方法和设备技术

本发明专利技术涉及一种用于检测和区分病毒性感染与细菌性感染的即时检测分析法，其可有效地协助快速区分病毒性感染与细菌性感染。更具体地，本发明专利技术涉及一种快速地区分病毒性感染和/或细菌性感染的免疫分析方法，其中病毒标记物为干扰素诱导Mx‑B蛋白，细菌标记物为CRP/PCT/BPI。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于鉴别病毒性感染与细菌性感染的方法和设备
本专利技术涉及用于鉴别病毒性感染与细菌性感染的即时检测(pointofcare，POC)分析领域。更具体地，本专利技术涉及一种快速区分病毒性感染和/或细菌性感染的免疫分析法。
技术介绍
发烧是导致儿童到全科诊所和儿科诊所的急诊中心就诊的常见原因。最常见的是，发烧与呼吸道感染或肠胃炎有关。儿童发烧的高发率和预防性施用不必要的抗生素，是对指示病毒性和/或细菌性感染的生物标记物进行快速筛选检测的开发的原因。在大约60％的病例中，严重的社区获得性肺炎是由细菌性感染引起的，大约10％的患者需要进入重症监护病房(ICU)。其余40％与呼吸道病毒有关。大多数呼吸道感染涉及咽炎，其中40％由病毒引起，而25-50％由A族β溶血性链球菌引起。后者会导致急性细支气管炎和肺炎。所有抗菌药物中约有80％会在初级治疗中被开出处方，其中多达80％的处方用于呼吸道适应症。迄今为止，呼吸道感染是初级治疗中最常见的咳嗽原因。医生经常开广谱抗生素的处方来治疗咳嗽，包括急性支气管炎，而且其中许多处方对患者的益处微乎其微，并且可能引起副作用和可能增强抗生素耐药性。促使医生施用抗生素的因素包括缺乏适当的细菌性感染诊断标记物、对患者缺乏随访的担忧以及时间压力。快速区分病毒性感染与细菌性感染仍然具有挑战性。最近，已经鉴别了许多新的诊断标记物。这些标记物中的数种表现出区分病毒性与细菌性感染的巨大前景。这类蛋白包括Mx-GTP酶和C反应蛋白(CRP)。Mx同源蛋白是高分子量GTP酶超家族的成员。因此，这些GTP酶由I型α/β或II型干扰素(IFN)上调。MxGTP酶仅在IFNα/β而不在IFNγ处理的细胞中过度表达。I型干扰素在先天免疫反应中起重要作用，并具有免疫调节、抗增殖和抗病毒的功能。专利技术人自己的研究表明，Mx-同源人体蛋白具有以下优点：1)在人体中的Mx-同源人体蛋白主要在细胞内表达。可以通过细胞内染色在大多数细胞室中看到它们[16]。2)Mx-同源蛋白通过剂量依赖的方式进行诱导[6]。3)Mx-同源人体蛋白由I型干扰素特异性诱导，而并非由IFN-γ、IL-I、TNF-α或细菌性感染引起的其他任何细胞因子诱导[8,12]。4)与外周血系统中的I型干扰素相比，Mx-同源人体蛋白具需要更长的检测时间[6]。因此，这些蛋白质是鉴别病毒性疾病的标记物[7,14,15]。此外，这些蛋白可用作标记物，以鉴别接受I型干扰素治疗的患者的IFN治疗是否成功[5,9,10,11]。在早期研究中，专利技术人通过SDS-PAGE后的WesternBlotting检测到了这些蛋白质。12但是该过程需要两天以上。因此，专利技术人建立了ELISA，以在两天内检测这些蛋白质[13]。基于这些事实和假设，即在细菌性感染患者体内I型干扰素保持在正常水平内，外周血中的Mx-同源蛋白表达是对病毒性感染灵敏且特异的标记物。同样地，据报道，大多数病毒性感染引起的急性期反应浓度很小、C反应蛋白(CRP)浓度小、降钙素原(PCT)水平低和杀菌/通透性增强蛋白(BPI)浓度小。因此，这些蛋白质将用于区分病毒源性疾病与细菌性病因疾病。由于CRP的血浆浓度在刺激后迅速增加，并以很短的半衰期迅速降低，因此CRP在诊断和监测感染和炎性疾病中可成为非常有用的工具。在斯堪的纳维亚，一般情况下，即时检测CRP测试是对呼吸道感染患者进行例行评估的一部分，其应用具有成本效益。一般情况下，已发现CRP在诊断细菌性疾病以及部分区分细菌性与病毒性感染中具有重要价值。通常发现CRP的诊断价值优于红细胞沉降率(ESR)，优于或等于白细胞计数(WBC)。即时检测的缺点是检测时间长。这些测试需要至少30分钟到2个小时。在临床上，区分某些全身性病毒性感染与细菌性感染可能具有挑战性。通常在严重感染(例如肺炎)的情况下，或者当缺少诊断的结果导致严重并发症(例如链球菌性喉炎)时进行细菌培养。通常很难得到培养物。不幸的是，由于接收结果的显著时间延迟，病毒培养无法按常规进行。新的病毒筛选PCR组合(panel)是有用的，但价格昂贵，而且无法即时检测提供信息，因为结果只能在24小时后才能得到。因此，仍然需要一种简单，易于使用的诊断测试，其能够在短时间内区分病毒性和细菌性感染！WO2010/033963公开了一种侧流免疫分析法，用于检测和区分病毒性感染与细菌性感染。细菌性标记物是CRP，病毒性标记物是Mx-A-蛋白。该分析法在欧洲以商标名上市。然而，根据一项研究，鉴别细菌性和病毒性感染的准确度分别仅为63％和84％17。因此，仍然需要一种快速的即时检测诊断分析法，以更准确和可靠地鉴别患者中的细菌性与病毒性感染。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种改进的、更准确和特异的诊断分析法，用于在短时间内可靠地鉴别患者的细菌性感染与病毒性感染。通过本专利技术的主题来解决该目的。根据本专利技术，提供了一种即时检测(POC)免疫分析设备，其包括：a.加样区，和b.检测区，该检测区具有对Mx-B蛋白(Mx-B)有结合亲和力的第一检测试剂，和对C反应蛋白(CRP/PCT)有结合亲和力的第二检测试剂，并且其中，该设备配置为检测受试者样品中的Mx-B和CRP/PCT，以鉴别细菌性感染与病毒性感染。根据本专利技术另一实施例，提供了一种即时检测(POC)免疫分析设备，其包括：a.加样区，和b.检测区，该检测区具有对Mx-B蛋白(Mx-B)有结合亲和力的第一检测试剂，对C反应蛋白(CRP)有结合亲和力的第二检测试剂，对降钙素原(PCT)有结合亲和力的第三检测试剂和/或对杀菌/通透性增强蛋白BPI有结合亲和力的第四检测试剂，并且其中，该设备配置为检测受试者样品中的Mx-B和CRP/PCT，以鉴别细菌性感染与病毒性感染。本专利技术的一个实施例涉及如本文所述的设备，还包括对BPI有结合亲和力的第三检测试剂。本专利技术的一个实施例涉及如本文所述的设备，其中所述检测试剂选自合成分子、核苷酸、核酸、适体、肽、蛋白质、酶和抗体。本专利技术的一个实施例涉及如本文所述的设备，其中所述检测试剂用可检测的标记物进行标记。本专利技术的另一实施例涉及如本文所述的设备，其中可检测的标记物选自酶标签、荧光标签、放射性标签、颗粒标签、有色乳胶颗粒、有色塑料颗粒、有色荧光颗粒和荧光颗粒。本专利技术的另一实施例涉及如本文所述的设备，还包括测试窗口，其配置为允许观察测试结果。本专利技术的另一实施例涉及如本文所述的设备，其中所述检测试剂化学缀合至所述可检测的标记物，以形成永久的、不可逆的试剂标记物复合物。本专利技术的另一实施例涉及如本文所述的设备，其中与检测试剂缀合的可检测的标记物配置为，当样品对Mx-B和/或CRP和/或PCT和/或BPI呈阳性时对用户可见。本专利技术的另一实施例涉及如本文所述的设备，其中所述设备配置为/或是人类血液样品中的PCT和/或BPI。本专利技术的一个实施例涉及一种用于鉴别受试者中的细菌性感染与病毒性感染的方法，其包括以下步骤：<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种即时检测(POC)分析设备，所述即时检测(POC)分析设备包括：/na.加样区，和/nb.检测区，所述检测区具有对Mx-B蛋白(Mx-B)有结合亲和力的第一检测试剂，和对C反应蛋白(CRP/PCT)有结合亲和力的第二检测试剂，并且/n其中，所述设备配置为检测受试者样品中的Mx-B和CRP/PCT，以鉴别细菌性感染与病毒性感染。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171122 EP 17203120.51.一种即时检测(POC)分析设备，所述即时检测(POC)分析设备包括：
a.加样区，和
b.检测区，所述检测区具有对Mx-B蛋白(Mx-B)有结合亲和力的第一检测试剂，和对C反应蛋白(CRP/PCT)有结合亲和力的第二检测试剂，并且
其中，所述设备配置为检测受试者样品中的Mx-B和CRP/PCT，以鉴别细菌性感染与病毒性感染。


2.根据权利要求1所述的设备，还包括对BPI有结合亲和力的第三检测试剂。


3.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述检测试剂选自合成分子、核苷酸、核酸、适体、肽、蛋白质、酶和抗体。


4.根据权利要求3所述的设备，其中所述检测试剂用可检测的标记物进行标记。


5.根据权利要求4所述的设备，其中所述可检测的标记物选自酶标签、荧光标签、放射性标签、颗粒标签、有色乳胶颗粒、有色塑料颗粒、有色荧光颗粒和荧光颗粒。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的设备，还包括测试窗口，所述设备配置为允许观察测试结果。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的设备，所述检测试剂化学缀合至所述可检测的标记物，以形成永久的、不可逆的试剂标记物复合物。


8.根据权利要求1至7中任一项所述的设备，其中与检测试剂缀合的可检测的标记物配置为，当样品对Mx-B和/或CRP和/或PCT和/或BPI呈阳性时对用户可见。


9.根据权利要求1至8中任一项所述的设备，其中所述设备...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·雅克希斯，
申请(专利权)人：D·雅克希斯，D·冯穆蒂乌斯，W·埃贝尔，
类型：发明
国别省市：德国;DE