低温绿球藻的培养液、低温绿球藻的培养方法及应用技术

本发明专利技术属于藻类培养技术领域，公开了一种低温绿球藻的培养液、低温绿球藻的培养方法及应用，首先按下述组分配制培养液：自来水中添加无水葡萄糖、氯化铵、磷酸氢二钾、七水硫酸镁、氯化钠、硫酸亚铁、氯化钙、硼酸、氯化锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、硝酸钴；然后通过配置的培养液对绿球藻进行培养。本发明专利技术培养得到的每毫升藻液中活藻数量多，培养时间短，能在初春低温条件下满足水产养殖动物饵料的需求，并能快速降低水产畜禽养殖水体、湖泊、河流中氨氮、亚硝酸盐、磷的含量，吸附重金属；增加水体溶氧，能快速增强水体自净能力，填补了初春低温微生物净化水质的市场产品的空白。

【技术实现步骤摘要】
低温绿球藻的培养液、低温绿球藻的培养方法及应用
本专利技术属于藻类培养
，尤其涉及一种低温绿球藻的培养液、低温绿球藻的培养方法及应用。
技术介绍
目前，藻类是水体物质循环和能量循环的基础，藻类能在光照的条件下吸收空气中的二氧化碳，利用水体中可溶性的氨氮、亚硝酸盐、磷、重金属进行繁殖代谢，并释放出氧气，降低水体氨氮、亚硝酸盐、磷、重金属的含量，是水体自净的生物基础。同时藻类本身营养丰富，在水产养殖中能为水产动物苗种提供优质的生物饵料，并能降解水体有害的氨氮、亚硝酸盐、重金属，增加水体溶解氧，从而净化水质，促进水产动物摄食和生长。随着现代水产养殖水平的提高，种苗放养密度加大，在年度水产养殖前期，由于自然养殖水体水温低藻类生长繁殖慢，为养殖水体针对性补充有益的低温绿球藻，可以为种苗补充大量的藻类生物饵料，促进水产动物苗种快速生长，提高养殖效益。另外随着社会经济发展加快和人民生活水平的提高以及城镇化的快速发展，湖泊、河流和生活污水的富营养化日益严重，生物需氧量、总氮、总磷是水体污染的主要超标指标，而藻类是分解利用和降低水体有机质(生物需氧量)、总氮、总磷的简单快速方法。畜禽养殖废水也是目前水体污染的重要源头，养殖废水的主要污染物是生物需氧量、总氮，而这些污染物也是藻类生长利用的必需营养，主动补充绿球藻来降解水畜禽养殖废水中有害物质的原位原生态修复方式是未来畜禽养殖废水处理的发展方向。绿球藻是一种淡水的单细胞绿藻，在分类学上属于绿藻门、绿藻纲、绿球藻目、绿球藻科、绿球藻属，目前对绿球藻的研究不多。绿球藻含高蛋白，营养丰富，是水产养殖动物的优质饵料。绿球藻存在于天然水体，在水温12-15℃开始缓慢生长，是自然水体较低温度下最先开始生长的绿藻。能分解利用水体中的氨氮、亚硝酸盐、磷，吸附水体中的有害重金属，同时利用光合作用增加水体溶解氧，是早春水产养殖中水生动物的优质生物饵料和养殖水体净化器；并能对湖泊、河流、畜禽养殖废水中低温期的氨氮、亚硝酸盐、磷进行快速降解，对水体中金属进行吸附。目前，对绿球藻高密度快速培养研究很少。按传统普通的培养方式，(由于温度低、藻类生长慢，)培养时间长(15-30天一批)、藻液中活藻数量少、藻体浓度低，藻液内杂菌多，不能满足水产养殖动物优质饵料的需求，以及对低温期养殖水体有害物质氨氮、亚硝酸盐、磷、重金属等降解和吸附的需求；也不能对畜禽养殖废水、湖泊、河流水体进行净化；满足不了藻类促进水体能量循环和物质循环的要求。通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：采用普通的培养方式对绿球藻进行培养时，在低温时，藻类繁殖生长速度慢，对水体氨氮、亚硝酸盐、磷、重金属降解较慢，影响水体自净速度。解决以上问题及缺陷的难度为：由于藻类普通培养的方式，藻种不纯，其中含有杂菌，杂菌容易争夺培养液中的养分，培养周期长，培养好的藻液内活藻浓度低(每毫升藻液含活藻百万个左右)。解决以上问题及缺陷的意义为：(通过使用本专利技术培养出大量高含量的适应低温水体生长繁殖的绿球藻，投入水体中增加有益绿球藻含量，)快速降低水产畜禽养殖水体、湖泊、河流中氨氮、亚硝酸盐、磷的含量，吸附重金属；增加水体溶氧，能快速增强水体自净能力，填补初春低温微生物净化水质的市场产品的空白。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种低温绿球藻的培养液、低温绿球藻的培养方法及应用。本专利技术是这样实现的，一种低温绿球藻的培养液，每升自来水中添加无水葡萄糖0.05-1g、氯化铵0.1-1g、磷酸氢二钾0.02-0.2g、七水硫酸镁0.01-0.1g、氯化钠0.01-0.1g、硫酸亚铁0.05-0.1g、氯化钙0.01-0.1g、硼酸0.0001-0.001g、氯化锰0.0001-0.001g、硫酸锌0.0001-0.001g、钼酸钠0.0001-0.001g、硫酸铜0.0001-0.001g和硝酸钴0.0001-0.001g。本专利技术的另一目的提供一种低温绿球藻的培养方法，包括以下步骤：步骤一，配制培养液按下述组分配制培养液：每升自来水中添加无水葡萄糖0.05-1g、氯化铵0.1-1g、磷酸氢二钾0.02-0.2g、七水硫酸镁0.01-0.1g、氯化钠0.01-0.1g、硫酸亚铁0.05-0.1g、氯化钙0.01-0.1g、硼酸0.0001-0.001g、氯化锰0.0001-0.001g、硫酸锌0.0001-0.001g、钼酸钠0.0001-0.001g、硫酸铜0.0001-0.001g、硝酸钴0.0001-0.001g，混合均匀后调节pH＝7.0，即为1L培养液；步骤二，绿球藻的培养a取5mL培养液置于玻璃试管中，在118-125℃下高温杀菌12-30min，冷却至室温后，挑取无菌绿球藻藻种10-20株，在无菌条件下接入培养液中，在12-25℃(优选25℃)、1000-1500Lux光照下培养22-26h；本藻株在12-25℃能快速生长，但在25℃生长最快。本专利技术的目的是在25℃条件下大量培养藻液，再投放至12-15℃的低温水体繁殖，满足水产养殖动物饵料的需求，并能快速降低水产畜禽养殖水体、湖泊、河流中氨氮、亚硝酸盐、磷的含量，吸附重金属；增加水体溶氧，能快速增强水体自净能力。b再取200mL培养液置于玻璃三角瓶中，在118-125℃下高温杀菌12-20min，冷却至室温后，在无菌条件下将培养好的5mL绿球藻种接入培养液中，12-25℃(优选25℃)、1000-1500Lux光照下，通入无菌空气培养22-26h；c再配制5L培养液置于玻璃瓶中，在118-125℃下高温杀菌25-35min，冷却至室温后，在无菌条件下将培养好的200mL绿球藻种接入培养液中，在12-15℃(优选25℃)、1000-1500Lux光照下，通入无菌空气培养16-20h；d配制800L培养液置于含内置光源发酵罐中，在118-125℃下高温杀菌25-35min，冷却至20℃后，在无菌条件下接入4第步骤c中培养好的5L绿球藻种，搅拌20-30min，混合均匀后，在12-15℃(优选25℃)、1000-1500Lux光照下，通入无菌空气培养22-26h，得到淡绿色的藻液，pH＝7.0-7.5，藻液中有少量藻体沉淀。本专利技术的另一目的在于提供一种利所述低温绿球藻的培养液构建的新水产养殖体系。结合上述的所有技术方案，本专利技术所具备的优点及积极效果为：本专利技术是从天然水体富集培养后无菌平板分离获得，不含杂菌，因此生长繁殖(培养)过程不受杂菌干扰，同时培养液中添加了葡萄糖，生长速度比常规培养快。本专利技术培养出的绿球藻每毫升藻液中含活藻高达一个亿左右、藻体浓度高，每级扩大培养时间只需24-48h左右，能在低温条件下满足水产养殖动物饵料的需求，可用于快速降低水产畜禽养殖水体、湖泊、河流中氨氮、亚硝酸盐、磷的含量，吸附重金属；增加水体溶氧，能快速增强水体自净能力。该应用扩大了绿球藻的应用领域，填补了低温微生物净化水质的市场产品的空白。本专利技术中所述绿球藻本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种低温绿球藻的培养液，其特征在于，所述低温绿球藻的培养液每升自来水中添加无水葡萄糖0.05-1g、氯化铵0.1-1g、磷酸氢二钾0.02-0.2g、七水硫酸镁0.01-0.1g、氯化钠0.01-0.1g、硫酸亚铁0.05-0.1g、氯化钙0.01-0.1g、硼酸0.0001-0.001g、氯化锰0.0001-0.001g、硫酸锌0.0001-0.001g、钼酸钠0.0001-0.001g、硫酸铜0.0001-0.001g和硝酸钴0.0001-0.001g。/n

【技术特征摘要】
1.一种低温绿球藻的培养液，其特征在于，所述低温绿球藻的培养液每升自来水中添加无水葡萄糖0.05-1g、氯化铵0.1-1g、磷酸氢二钾0.02-0.2g、七水硫酸镁0.01-0.1g、氯化钠0.01-0.1g、硫酸亚铁0.05-0.1g、氯化钙0.01-0.1g、硼酸0.0001-0.001g、氯化锰0.0001-0.001g、硫酸锌0.0001-0.001g、钼酸钠0.0001-0.001g、硫酸铜0.0001-0.001g和硝酸钴0.0001-0.001g。


2.一种利用权利要求1所述低温绿球藻的培养液的低温绿球藻的培养方法，其特征在于，所述低温绿球藻的培养方法包括以下步骤：
步骤一，按下述组分配制培养液：每升自来水中添加无水葡萄糖0.05-1g、氯化铵0.1-1g、磷酸氢二钾0.02-0.2g、七水硫酸镁0.01-0.1g、氯化钠0.01-0.1g、硫酸亚铁0.05-0.1g、氯化钙0.01-0.1g、硼酸0.0001-0.001g、氯化锰0.0001-0.001g、硫酸锌0.0001-0.001g、钼酸钠0.0001-0.001g、硫酸铜0.0001-0.001g、硝酸钴0.0001-0.001g，混合均匀后为1L培养液；
步骤二，取5mL培养液置于玻璃试管中，高温杀菌，冷却至室温后，挑取无菌绿球藻藻种10-20株，在无菌条件下接入培养液中，12～25℃进行光照培养，得到绿球藻种；
步骤三，再取200mL培养液置于玻璃三角瓶中，高温杀菌，冷却至室温后，在无菌条件下将步骤二中培养好的5mL绿球藻种接入培养液中，通入无菌空气进行25℃光照培养；
步骤四，再配制5L培养液置于玻璃瓶中，高温杀菌，冷却至室温后，在无菌条件下将步骤三中培养好的200...

【专利技术属性】
技术研发人员：王学良，夏江月，王畅，王宇晨，王宇凡，
申请(专利权)人：王学良，
类型：发明
国别省市：湖北;42