用于质谱检测的羧基衍生化试剂组合物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种用于质谱检测的羧基衍生化试剂组合物及其用途。具体涉及式I化合物与酰胺缩合剂的组合物及其作为羧基衍生化试剂的用途。所述式I化合物在酰胺缩合剂存在下，能与羧基化合物中的羧基发生衍生化反应，将羧基化合物中的羧基酰胺化。所述衍生化试剂羧基衍生化效率高，产物质谱响应好，可以实现在质谱中同时检测脂肪酸和磷脂和MALDI质谱中脂肪酸和磷脂的同时成像。

【技术实现步骤摘要】
用于质谱检测的羧基衍生化试剂组合物及其用途
本专利技术涉及分析化学领域，具体涉及一种用于质谱检测的羧基衍生化试剂组合物及其用途。
技术介绍
脂肪酸(fattyacids)和磷脂作为重要的小分子代谢物，对调节生物体内各项生理和生物功能起着重要作用。随着生命科学技术的发展，脂肪酸和磷脂的定性、定量研究为医学基础科研和临床检验提供了重要的依据。质谱成像作为一种灵敏的原位分析技术，可同时检测组织中分布的多种代谢物。而其中基质辅助激光解吸离子化(MALDI)质谱成像技术作为一种发展最成熟，待测物分析范围最广的一种成像技术，可用于分析蛋白，多肽，脂质，以及小分子代谢物。但MALDI质谱成像技术对于同时检测和成像脂肪酸和磷脂类化合物还存在难点。首先是由于MALDI质谱成像技术灵敏度有限，对于组织中化合物分子的成像只能成功应用于相对丰度高的物质，另外这些高丰度的物质还会对丰度低的物质存在离子抑制效应。因此对于丰度低，离子化效率低的物质像是脂肪酸这类物质的成像仍然存在挑战。另外脂肪酸的分析需要在负离子模式下检测，而磷脂则需要在正离子模式下检测所以没法同时对组织中的脂肪酸和磷脂类化合物进行检测和成像。虽然最近几年也不断有一些新的基质开发出来用于常规的MALDI分析脂肪酸。但是没有常规的MALDI分析脂肪酸基质可以同时用来对脂肪酸和磷脂进行质谱成像。这些新型基质要么不能在MALDI成像中在真空条件下稳定存在，要么就是在专一测定脂肪酸时损失磷脂的相关峰。因此筛选出合适的衍生化试剂，使脂肪酸和磷脂能同时在质谱中检测是非常必要的。
技术实现思路
本专利技术提供了一种羧基衍生化效率高，产物质谱响应好的衍生化试剂组合物和利用所述衍生化试剂组合物在质谱中同时检测脂肪酸和磷脂的方法。本专利技术第一方面，提供了一种用于质谱检测的羧基衍生化试剂组合物，所述组合物包括：(i)式I化合物，其中，所述R、R1各自独立地为C1-6烷基、C1-6烯基或C1-6炔基；X-为卤素负离子或酸根离子；和(ii)酰胺缩合剂。在另一优选例中，所述R、R1各自独立地为C1-6烷基。在另一优选例中，所述R、R1各自独立地为C1-4烷基。在另一优选例中，所述R、R1各自独立地为甲基、乙基、丙基或异丙基。在另一优选例中，所述R、R1各自独立地为甲基或乙基。在另一优选例中，所述卤素负离子为Cl-、Br-或I-，较佳地，I-。在另一优选例中，所述酸根离子为NO3-或HSO4-，较佳地，NO3-。在另一优选例中，所述式I化合物为N1，N1-二甲基哌嗪碘盐或N1，N1-甲基乙基哌嗪碘盐。在另一优选例中，所述酰胺缩合剂选自：O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、6-氯苯并三氮唑-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯(HCTU)、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸(TBTU)、2-琥珀酰亚胺基-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸酯(TSTU)、2-(5-降冰片烯-2，3-二甲酰亚胺基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸季铵盐(TNTU)，或其组合，较佳地，HATU。在另一优选例中，所述组合物为N1，N1-二甲基哌嗪碘盐或N1，N1-甲基乙基哌嗪碘盐与O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)的组合。在另一优选例中，所述酰胺缩合剂与化合物I摩尔比为0.1-5∶1，较佳地，0.5-3∶1，更佳地，1-2∶1。在另一优选例中，所述组合物为溶液形式。在另一优选例中，所述溶液的溶剂选自：甲醇、乙醇、乙腈、水，或其组合。在另一优选例中，所述溶剂中水的体积比小于50％，较佳的，10-30％，更佳地，10-20％。在另一优选例中，所述溶液的溶剂为乙腈与水体积比为1-20∶1的混合溶液，较佳地，2-10∶1，更佳地，5-10∶1。在另一优选例中，所述溶液具有一个或多个下述特征：(a)所述式I化合物浓度为0.01-100mg/mL，较佳地，0.05-10mg/mL，更佳地，0.1-5mg/mL，最佳地，0.5-2.5mg/mL。(b)所述酰胺缩合剂与化合物I摩尔比为0.1-5∶1，较佳地，0.5-3∶1，更佳地，1-2∶1。本专利技术第二方面，还提供了一种如本专利技术第一方面的式I化合物作为羧基衍生化试剂的用途，其中，所述R、R1各自独立地为C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基；和X-为卤素负离子或酸根离子；所述化合物在酰胺缩合剂存在下，能与羧基化合物中的羧基发生衍生化反应，将羧基化合物中的羧基酰胺化。在另一优选例中，所述R、R1各自独立地为C1-6烷基。在另一优选例中，所述R、R1各自独立地为C1-4烷基。在另一优选例中，所述R、R1各自独立地为甲基、乙基、丙基或异丙基。在另一优选例中，所述R、R1各自独立地为甲基或乙基。在另一优选例中，所述卤素负离子为Cl-、Br-或I-，较佳地，I-。在另一优选例中，所述酸根离子为NO3-或HSO4-，较佳地，NO3-。在另一优选例中，所述酰胺缩合剂选自：O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、6-氯苯并三氮唑-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯(HCTU)、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸(TBTU)、2-琥珀酰亚胺基-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸酯(TSTU)、2-(5-降冰片烯-2，3-二甲酰亚胺基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸季铵盐(TNTU)，较佳地，HATU。在另一优选例中，所述羧基化合物的分子量＜10000Da，较佳地，＜5000Da，更佳地，＜2000Da，最佳地，＜1800Da。在另一优选例中，所述羧基化合物选自：脂肪酸、芳香酸、氨基酸、肽，或其组合。在另一优选例中，羧基化合物选自：脂肪酸、芳香酸、氨基酸，或其组合。在另一优选例中，所述脂肪酸为C1-24饱和或不饱和脂肪酸，较佳地，C6-22，更佳地，C12-22，最佳地，C16-22。在另一优选例中，所述脂肪酸具有0-8个不饱和度，较佳地，0-6。在另一优选例中，所述脂肪酸为月桂酸、十四酸、软脂酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸、芥酸、脱落酸，或其组合。在另一优选例中，所述肽含有2-20个氨基酸，较佳地，2-12，更佳地，2-10。在另一优选例中，所述衍生化反应的反应式为：其中，所述R、R1各自独立地为C1-6烷基、C1-6烯基或C1-6炔基；X-为卤素负离子或酸根离子；R2-COOH为所述羧基化合物。在另一优选例中，所述衍生化试剂将本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于质谱检测的羧基衍生化试剂组合物，其特征在于，所述组合物包括：/n(i)式I化合物，/n

【技术特征摘要】
1.一种用于质谱检测的羧基衍生化试剂组合物，其特征在于，所述组合物包括：
(i)式I化合物，



其中，所述R、R1各自独立地为C1-6烷基、C1-6烯基或C1-6炔基；
X-为卤素负离子或酸根离子；和
(ii)酰胺缩合剂。


2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述酰胺缩合剂选自：O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、6-氯苯并三氮唑-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯(HCTU)、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸(TBTU)、2-琥珀酰亚胺基-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸酯(TSTU)、2-(5-降冰片烯-2，3-二甲酰亚胺基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸季铵盐(TNTU)，或其组合，较佳地，HATU。


3.式I化合物作为羧基衍生化试剂的用途，



其中，所述R、R1各自独立地为C1-6烷基、C2-6烯基或C2-6炔基；和
X-为卤素负离子或酸根离子；
所述化合物在酰胺缩合剂存在下，能与羧基化合物中的羧基发生衍生化反应，将羧基化合物中的羧基酰胺化。


4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述酰胺缩合剂选自：O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、6-氯苯并三氮唑-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯(HCTU)、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸(TBTU)、2-琥珀酰亚胺基-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸酯(TSTU)、2-(5-降冰片烯-2，3-二甲酰亚胺基)-1，1，3...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭寅龙，王珊珊，张菁，张立，王蕾，
申请(专利权)人：中国科学院上海有机化学研究所，
类型：发明
国别省市：上海;31