PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体及其制备方法技术

本发明专利技术公开了PARP15蛋白与其抑制剂3‑氨基苯甲酰胺复合物晶体及其制备方法，包括如下步骤：把PARP15蛋白与其抑制剂3‑氨基苯甲酰胺按比例混合；再把所得混合物采用气相扩散法中的悬滴法进行结晶，得到PARP15蛋白与其抑制剂3‑氨基苯甲酰胺复合物晶体。本发明专利技术优点有：成功获取高纯度的PARP15蛋白，并且首次获得该蛋白与其抑制剂3‑AB复合物晶体，能够促进关于PARP15蛋白的研究，为靶向PARP15蛋白药物设计、优化提供分子基础。

【技术实现步骤摘要】
PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体及其制备方法
本专利技术涉及蛋白质结晶
，尤其涉及PARP15蛋白结晶技术。
技术介绍
PARP15蛋白(聚腺苷二磷酸核糖聚合酶家族成员15)在弥漫性大B细胞淋巴瘤中过表达。研究报道，PARP15蛋白具有甲基化活性。由于肿瘤抑制基因(TsGs)通常是通过体细胞突变和/或启动子甲基化失活，因此PARP15蛋白对肿瘤具有抑制作用。目前，关于PARP15蛋白的研究较少，对其生物学功能的研究更是少之甚少。但PARP家族对癌症影响甚大，并且有学者认为PARP15蛋白是癌症发展的候选基因，具有调节基因转录的能力。此外，据报道它与细胞凋亡有关。蛋白质的三维结构在了解其生物功能以及针对靶标蛋白质的小分子药物研究中起到了非常重要的作用，而蛋白质结晶又是其研究的主要难点。蛋白质结晶可以快速解析蛋白质-配体或先导化合物复合物的晶体结构，帮助人们理解小分子如何与蛋白质结合，并利用其相关结构信息设计新的药物分子。因此，获得高质量的蛋白质晶体是解析蛋白质三维结构的首要解决的问题。蛋白质晶体是本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体。/n

【技术特征摘要】
1.PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体。


2.一种如权利要求1所述的PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体的制备方法，其特征在于：
包括如下步骤：
(1)把PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺按比例混合；
(2)把(1)所得混合物采用气相扩散法中的悬滴法进行结晶，得到PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体。


3.根据权利要求2所述的PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体的制备方法，其特征在于：
所述PARP15蛋白的浓度为5～10mg/ml。


4.根据权利要求2所述的PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体的制备方法，其特征在于：
所述步骤(1)中3-氨基苯甲酰胺与PARP15蛋白的混合比例为3-氨基苯甲酰胺摩尔数：PARP15蛋白摩尔数＝1:5；
所述步骤(1)中3-氨基苯甲酰胺与PARP15蛋白混合后冰上孵育30min。


5.根据权利要求2所述的PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体的制备方法，其特征在于：
所述步骤(2)的过程是：先用晶体枪吸取1μl蛋白质混合物液点到盖玻片上，然后快速按比例取结晶试剂点到蛋白质混合物液滴上，将点好蛋白混合物和结晶试剂的盖玻片反盖到边缘涂有真空脂的盛有1000μl结晶试剂的容器上，压紧，使液滴与容器内的结晶试剂能够在同一个密闭的空间内，3-5天生成复合物结晶。


6.根据权利要求2所述的PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体的制备方法，其特征在于：
所述结晶试剂是0.1MHEPES，质量分数为22％的PEG3350，pH＝6.5的混合物。


7.根据权利要求2-6任一所述的PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体的制备方法，其特征在于：
所述PARP15蛋白和3-氨基苯甲酰胺的混合物与结晶试剂混合的体积比例是1:1；
所述步骤(2)结晶的温度是20℃。


8.根据权利要求2所述的PARP15蛋白与其抑制剂3-氨基苯甲酰胺复合物晶体的制备方法，其特征在于：
所述PARP15蛋白获得步骤包括：构建PARP15蛋白表达质粒；将PARP15蛋白表达质粒转化，诱导培养表达PARP1...

【专利技术属性】
技术研发人员：李健，张进，周学兰，万双燕，
申请(专利权)人：李健，张进，周学兰，万双燕，
类型：发明
国别省市：上海;31