高三尖杉酯碱靶向治疗剂及其应用制造技术

本发明专利技术提供了新的抗人CD79b的单克隆抗体以及其与高三尖杉酯碱的缀合物，用于抗癌或肿瘤。另外，本发明专利技术还涉及上述化学产品的制备方法、药物组合物和医药应用等。

【技术实现步骤摘要】
高三尖杉酯碱靶向治疗剂及其应用
本专利技术属于医药和抗体
，具体而言，本专利技术涉及新的CD79抗体及其与高三尖杉酯碱的缀合物，用于抗癌或肿瘤。另外，本专利技术还涉及上述化学产品的制备方法、药物组合物和医药应用等。
技术介绍
高三尖杉酯碱(omacetaxinemepesuccinate,简称为HHT)用是提取自三尖杉属植物的一种有效抗癌成分，对多种癌细胞株有显著的抑制生长作用。它早在上世纪九十年代就被我国卫生部批准为常用抗癌药物。近年来其抗癌效果也得到了国际上的承认，美国FDA于2012年批准了高三尖杉酯碱注射液(Synribo)用于治疗慢性粒细胞白血病。CD79b蛋白是一种B细胞表面抗原，在多种癌细胞中表达，尤其是在超过90％的非霍奇金B细胞淋巴瘤中表达。所以其被作为靶位而开发抗体也被得到了广泛关注，例如国际专利申请WO2014011519、WO2014011521、WO2014177615、WO2016040856、WO2016090210、WO2016205176、WO2016021621、WO2017009474等记载的。然而，现有技术公开的靶向CD79b的抗体中效果优异的单克隆抗体十分有限，无法满足对癌症和肿瘤的治疗需要。在现有技术无法预期能获得效果优异的靶向CD79b的单克隆抗体的情况下，经过十分艰巨的努力，并且凭借一些运气，本专利技术人令人意外地筛选得到了一种鼠源单克隆抗体，并通过自主平台优化出了它的人源化抗体，它们与CD79b的结合亲和力高，尤其是与高三尖杉酯碱缀合后，产生的抗体药物缀合物能高效地抑制肿瘤细胞增殖。
技术实现思路
本专利技术的要解决的技术问题在于提供新的CD79抗体及其与高三尖杉酯碱等抗癌药物化合物的缀合物，用于抗癌或肿瘤。另外，本专利技术还涉及上述化学产品的制备方法和医药应用等。具体而言，在第一方面，本专利技术提供了抗人CD79b的单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区和轻链可变区，其中，重链可变区包含的HCDR1、HCDR2和HCDR3的氨基酸序列分别如SEQIDNO：2、3和4所示，轻链可变区包含的LCDR1、LCDR2和LCDR3的氨基酸序列分别如SEQIDNO：7、8和9所示。在本文中，重链可变区和轻链可变区的互补决定簇(CDR)的氨基酸由Chothia编号系统确定并注释。优选在本专利技术第一方面的抗体或其抗原结合片段中，所述抗体为鼠源抗体、嵌合抗体、人抗体或人源化抗体。例如，所述抗体为鼠源抗体，其轻链可以包含鼠源κ、λ链或其变体的轻链FR区和/或轻链恒定区，其重链可以包含鼠源IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其变体的重链FR区和/或重链恒定区。在本专利技术的一个具体实施方式中，鼠源抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：6所示。又如，所述抗体为人源化抗体，其轻链可以包含人源κ、λ链或其变体的轻链FR区和/或轻链恒定区，其重链可以包含人源IgG1、IgG2、IgG3或IgG4或其变体的重链FR区和/或重链恒定区。在本专利技术的一个具体实施方式中，人源化抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：5所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：10所示。在本文中，抗体的抗原结合片段是保留了完整抗体的抗原结合活性的任何片段。优选在本专利技术第一方面的抗体或其抗原结合片段中，所述抗原结合片段可以是Fab、(Fab’)2、Fv、线性抗体、scFv、、sdAb、sdFv、纳米抗体、peptibody、结构域抗体或多特异性抗体(如，双特异性抗体、diabody、triabody等)，优选是Fab、(Fab’)2、Fv或scFv。在第二方面，本专利技术提供了多核苷酸，其编码本专利技术第一方面的抗体或其抗原结合片段。本专利技术的多核苷酸，可以是DNA形式，也可以是RNA形式，优选DNA形式。在第三方面，本专利技术提供了载体，其含有本专利技术第二方面所述的多核苷酸。本文中的术语“重组表达载体”、“表达载体”或“载体”，在此可以交互替换使用，是指本领域中常用的细菌质粒、粘粒、噬菌粒、酵母质粒、植物细胞病毒、动物病毒及其它各种病毒载体。在第四方面，本专利技术提供了细胞，其含有本专利技术第二方面所述的多核苷酸。该细胞可以用本专利技术第三方面所述的载体转化或转染而获得。细胞可以是原核细胞，也可以是真核细胞，如，细菌细胞、酵母细胞、植物细胞、昆虫细胞、哺乳动物细胞等。优选的细胞可以是大肠杆菌、毕赤酵母、中国仓鼠卵巢细胞(CHO)或人胚肾(HEK)293细胞。在第五方面，本专利技术提供了制备本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段的方法，其包括在适合蛋白质表达的条件下培养本专利技术第四方面所述的细胞，然后从培养物中分离出本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段。在第六方面，本专利技术提供了抗体药物缀合物，其包含有抗癌药物化合物和本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段。优选其中，抗癌药物化合物和本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段通过接头连接，优选是共价连接。优选在本专利技术第六方面中，所述抗癌药物化合物可以选自毒素、化疗剂、抗生素、放射性同位素和溶核酶。优选在本专利技术的具体实施方式中，所述抗癌药物化合物是高三尖杉酯碱。在第七方面，本专利技术提供了药物组合物，其包括本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段或者本专利技术第六方面所述的抗体药物缀合物，以及药学上可接受的载体。本文中所用的“药物组合物”或“药物”或“药品”，如不特别指明，指的是人用的药物组合物或药物或药品。本文中使用的药学上可接受的载体指无毒的填充剂、稳定剂、稀释剂或其他制剂辅料。本领域的技术人员可以根据治疗目的、给药途径(如注射)的需要将药物组合物制成各种剂型，优选该组合物为单位剂量形式，如冻干剂或水针剂。在单位剂量形式中，本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段或者本专利技术第六方面所述的抗体药物缀合物的量可以为0.1mg至2000mg，如为1mg至1000mg。在第八方面，本专利技术提供了本专利技术第一方面所述的抗体或其抗原结合片段或者本专利技术第六方面所述的抗体药物缀合物在制备用于抗癌或肿瘤的药物中的应用。优选在本专利技术第八方面中，所述癌症或肿瘤是淋巴瘤或白血病。示例性的淋巴瘤包括，弥漫大B细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、小淋巴细胞性淋巴瘤或套细胞淋巴瘤，优选是非霍奇金淋巴瘤，例如，攻击性NHL、复发性攻击性NHL、复发性无痛性NHL、顽固性NHL或顽固性无痛性NHL。示例性的白血病包括慢性淋巴细胞性白血病、毛细胞白血病或急性淋巴细胞性白血病。本专利技术取得的有益效果在于：提供了高亲和力的抗CD79b抗体及其与高三尖杉酯碱缀合的高效的抗癌缀合物，效果超出现有技术的预期，具备更广阔的成药前景。为了便于理解，本专利技术引用了公开文献，这些文献是为了更清楚地描述本专利技术，其全文内容均纳入本文进行参考。以下将通过具体的实施例对本专利技术进行详细地描述。需要特别指出的是，这些描述仅仅是示例性的描述，并不构成对本专利技术范围的限制。依据本说明书的论述，本专利技术的许多变化、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.抗人CD79b的单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区和轻链可变区，其中，重链可变区包含的HCDR1、HCDR2和HCDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：2、3和4所示，轻链可变区包含的LCDR1、LCDR2和LCDR3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：7、8和9所示。/n

【技术特征摘要】
1.抗人CD79b的单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含重链可变区和轻链可变区，其中，重链可变区包含的HCDR1、HCDR2和HCDR3的氨基酸序列分别如SEQIDNO：2、3和4所示，轻链可变区包含的LCDR1、LCDR2和LCDR3的氨基酸序列分别如SEQIDNO：7、8和9所示。


2.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗体为鼠源抗体、嵌合抗体、人抗体或人源化抗体。


3.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述抗原结合片段选自Fab、(Fab’)2、Fv或scFv。


4.权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其中，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQIDNO：1或5所示。


5.权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴建中，
申请(专利权)人：西安迪赛生物药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61