一种透明质酸分子量的测定方法技术

技术编号:25344669 阅读:42 留言:0更新日期:2020-08-21 17:02
本申请公开了一种透明质酸分子量的测定方法,涉及生物医药检测技术领域。该测定方法基于透明质酸溶液的紫外吸收光谱的吸光度来测定透明质酸溶液中透明质酸的分子量。本申请解决了目前透明质酸分子量的测定方法复杂、检测范围有限,不能对透明质酸酶解液中的透明质酸及其盐的分子量进行快速检测,本申请的测定方法实现了对透明质酸酶解过程中透明质酸及其盐的分子量的实时监控。

【技术实现步骤摘要】
一种透明质酸分子量的测定方法
本申请涉及生物医药检测
,具体涉及一种透明质酸分子量的测定方法。
技术介绍
透明质酸(Hyaluronicacid,简称HA)又名玻璃酸或玻尿酸,是由(1-3)-2-乙酰氨基-2-脱氧-D-葡萄糖(1-4)-D-葡萄醛酸双糖重复单位所组成的高分子量的直链粘多糖,广泛的存在于人、动物的玻璃体、皮肤、脐带中,为人体中不可或缺的关键功能物质。透明质酸根据其分子量的不同,具有很多不同的功能。通常,我们将分子量≥1000kDa的透明质酸定义为高分子透明质酸,把分子量10kDa~1000kDa的透明质酸定义为低分子透明质酸,分子量≤10kDa定义为寡聚透明质酸。大分子透明质酸可通过透明质酸酶酶解来制备低分子及寡聚透明质酸及其盐。在采用透明质酸酶酶解生产低分子及寡聚透明质酸及其盐的过程中,需要对酶解液中的透明质酸及其盐进行实时监控,以便最终获得所需的目标分子量的低分子及寡聚透明质酸及其盐。然而,目前透明质酸及其盐的分子量的检测通常采用多角度激光光散射仪法(SEC-MALLS),即溶液中各分子量段的HA先经过分子排阻本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种透明质酸分子量的测定方法,其特征在于,基于透明质酸溶液的紫外吸收光谱的吸光度来测定透明质酸溶液中透明质酸的分子量。/n

【技术特征摘要】
1.一种透明质酸分子量的测定方法,其特征在于,基于透明质酸溶液的紫外吸收光谱的吸光度来测定透明质酸溶液中透明质酸的分子量。


2.根据权利要求1所述的透明质酸分子量的测定方法,其特征在于,所述吸光度为透明质酸溶液在232nm处的吸光度。


3.根据权利要求1所述的透明质酸分子量的测定方法,其特征在于,所述透明质酸溶液为透明质酸经酶裂解后所产生的透明质酸酶解液。


4.根据权利要求3所述的透明质酸分子量的测定方法,其特征在于,包括以下步骤:
建立透明质酸酶解液的S值与透明质酸酶解液中透明质酸的分子量M之间的函数关系“M-S函数”,所述S值由以下公式计算得到:



其中,A为透明质酸酶解液的稀释液的紫外吸收光谱的吸光度,V为透明质酸酶解液的总体积,T为透明质酸酶解液的稀释倍数,H为透明质酸酶解液酶解用的原料透明质酸盐的水分含量,W为透明质酸酶解液酶解用的原料透明质酸盐的质量,R为透明质酸在透明质酸盐中的分子量占比;
将待测透明质酸酶解液样品进行灭活稀释,测定其紫外吸收光谱的吸光度A,再根据所述公式计算待测透明质酸酶解液样品的S值,然后根据待测透明质酸酶解液样品的S值和“M-S函数”计算待测透明质...

【专利技术属性】
技术研发人员:乔莉苹陈玉娟石艳丽郭学平冯宁李德杰窦方
申请(专利权)人:华熙生物科技股份有限公司山东华熙海御生物医药有限公司
类型:发明
国别省市:山东;37

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