一种高速逆流色谱结合制备液相色谱从钩吻生物碱中分离钩吻生物碱单体的方法技术

本发明专利技术公开了一种高速逆流色谱结合制备液相色谱从钩吻生物碱中分离钩吻生物碱单体的方法，该方法是将钩吻提取物采用高效液相色谱确定目标钩吻生物碱单体组分后，依次通过高速逆流色谱法初步分离和制备液相色谱法二次分离，分别收集各目标钩吻生物碱单体组分。该方法采用多个色谱仪联用分离钩吻单体，具有制备量大，周期短，纯度高等优点，可同时分离获得8个钩吻生物碱单体，具备可控性和自动化生产性，且具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种高速逆流色谱结合制备液相色谱从钩吻生物碱中分离钩吻生物碱单体的方法
本专利技术涉及一种从钩吻生物碱中分离钩吻生物碱单体的方法，特别涉及一种联合应用高速逆流色谱法和制备液相色谱法从钩吻生物碱中分离制备钩吻生物碱单体的方法，属于天然药物活性成分分离

技术介绍
钩吻(Gelsemiumelegans)又名断肠草、大茶药、大炮叶、黄花苦蔓、黄猛菜等，为马钱科钩吻属常绿木质藤本植物，产于江西、福建、台湾、湖南、广东、海南、广西、贵州、云南等省区，具有消肿止痛、拔毒杀虫之效，常用作中兽医草药，对猪、牛、羊有驱虫功效，亦可作农药，防治水稻螟虫(中国科学院《中国植物志》编辑委员会，中国植物志，第61卷[M]，北京:科学出版社，1992:251-253.)。钩吻有大毒，为世界著名的有毒植物。但由于钩吻的根茎叶都可入药，研究者们对钩吻的研究在药物代谢和残留、生理和毒理方面越来越深。研究表明，生物碱是钩吻中的主要活性成分，它们具有显著的镇痛、镇静、抑制血小板聚集、促进造血、抗肿瘤和免疫调节等作用(张志阳；伍勇；孙志良，钩吻药效学的研究进展[J]本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高速逆流色谱结合制备液相色谱从钩吻生物碱中分离钩吻生物碱单体的方法，其特征在于：将钩吻提取物采用高效液相色谱确定目标钩吻生物碱，依次通过高速逆流色谱法初步分离和制备液相色谱法二次分离，分别收集各目标钩吻生物碱单体组分。/n

【技术特征摘要】
1.一种高速逆流色谱结合制备液相色谱从钩吻生物碱中分离钩吻生物碱单体的方法，其特征在于：将钩吻提取物采用高效液相色谱确定目标钩吻生物碱，依次通过高速逆流色谱法初步分离和制备液相色谱法二次分离，分别收集各目标钩吻生物碱单体组分。


2.根据权利要求1所述的一种高速逆流色谱结合制备液相色谱从钩吻生物碱中分离钩吻生物碱单体的方法，其特征在于：
所述高效液相色谱法的条件：
色谱柱：安捷伦ZORBAXSB-C18色谱柱；
流动相：0.1～0.3wt％磷酸-0.4～0.6wt％三乙胺混合水溶液和乙腈；
采用梯度洗脱程序：0～65min，乙腈体积百分比由12％匀速升高至47％；
高效液相色谱参数：流速为0.8～1.2mL/min；柱温为28～32℃；进样量为15～25μL。


3.根据权利要求1所述的一种高速逆流色谱结合制备液相色谱从钩吻生物碱中分离钩吻生物碱单体的方法，其特征在于：所述高速逆流色谱法的条件：
采用的两相体系由0.5～1.5wt％三乙胺水溶液、正己烷、乙酸乙酯、乙醇按体积比3～5:1～3:2～4:1～3组成；
高速逆流色谱仪参数：转速为800～900rpm/min，柱温箱为20～30℃，流速为1.5～2.5mL/min。


4.根据权利要求3所述的一种高速逆流色谱结合制备液相色谱从钩吻生物碱中分离钩吻生物碱单体的方法，其特征在于：在高速逆流色谱进行初步分离过程中，依据高速逆流色谱图谱收集各目标钩吻生物碱单体组分：流分I：80～100min；流分II：128～143min；流分III：187～230min；流分IV：249～298min；高速逆流色谱图谱采集至4...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘兆颖，陆英，唐其，
申请(专利权)人：湖南农业大学，
类型：发明
国别省市：湖南;43