【技术实现步骤摘要】
一种提高免疫组化效率的方法
本专利技术属于生物
,具体涉及一种提高免疫组化效率的方法。
技术介绍
免疫组织化学(IHC)是通过化学反应标记抗体的显色剂,利用抗原与抗体特异性结合的原理,定性定量的研究组织或细胞中的未知抗原。近年来,随着免疫组化技术的发展,许多疑难肿瘤得到了明确的诊断。免疫组化技术用于临床切片诊断肿瘤细胞上处于非常重要的地位。我国免疫组化技术是从上个世纪60年代发展起来的,然而,现阶段我国免疫组化用于临床诊断仍然存在许多技术瓶颈,例如,免疫组化所耗费的时间很长,通常情况下,免疫诊断反应需过夜,时间超过24小时,无法达到现场快速检测的目的。因此大大缩短反应时间尤为重要,如何在不损坏抗原抗体蛋白活性的前提下,提高其反应结合率,减少反应所需时间,依然是现阶段免疫组化技术面临的挑战。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术的目的是对以上不足进行了深度改良和机理分析,提供一种提高免疫组化效率的方法,该方法的特点在于整个免疫组化过程在电场环境下进行,从而实现低环境负荷型微量液滴无损搅拌,进而大幅度降低抗体的使用量,节约成本,更重要的是能大幅度缩短组织免疫诊断的反应时间,甚至可将组织免疫诊断的反应时间由现今177min的水平缩短到19min,另外该方法还可以用在核酸快速诊断上,将反应时间由现今720min的水平缩短到30min,极大地提高诊断效率。具体技术方案如下:一种提高免疫组化效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一,切片的制备:取组织切片,展片、捞片后固定2mi ...
【技术保护点】
1.一种提高免疫组化效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:/n步骤一,切片的制备:取组织切片,展片、捞片后固定2min,于低温下保存;/n步骤二,脱蜡和水化:将蜡片置于二甲苯中浸泡后,甩去多余液体置于无水乙醇中浸泡,再依次由自来水,PBS溶液冲洗;/n步骤三,抗原修复:取配置好的抗原修复液放入抗原修复盒中,液体超过组织切片上边缘0.5cm,盖上盖子锡箔纸外围封盖2min;/n步骤四,冲洗:将步骤三中的组织切片用PBS溶液冲洗1min;/n步骤五,加入一抗:甩去多余液体后,加入1mg/mL的一抗试剂50uL,室温孵育5min;/n步骤六,封闭:加入封闭液封闭1min;/n步骤七,加入二抗:甩去多余液体后,加入1mg/mL 的二抗酶标聚合物50μL,室温孵育5min;/n步骤八,显色:甩去多余的液体后,加入50uL DAB显色液,室温孵育1min,显微镜下观察染色结果,防止过染,自来水冲洗;/n其中,以上步骤均在电场环境下进行。/n
【技术特征摘要】
1.一种提高免疫组化效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一,切片的制备:取组织切片,展片、捞片后固定2min,于低温下保存;
步骤二,脱蜡和水化:将蜡片置于二甲苯中浸泡后,甩去多余液体置于无水乙醇中浸泡,再依次由自来水,PBS溶液冲洗;
步骤三,抗原修复:取配置好的抗原修复液放入抗原修复盒中,液体超过组织切片上边缘0.5cm,盖上盖子锡箔纸外围封盖2min;
步骤四,冲洗:将步骤三中的组织切片用PBS溶液冲洗1min;
步骤五,加入一抗:甩去多余液体后,加入1mg/mL的一抗试剂50uL,室温孵育5min;
步骤六,封闭:加入封闭液封闭1min;
步骤七,加入二抗:甩去多余液体后,加入1mg/mL的二抗酶标聚合物50μL,室温孵育5min;
步骤八,显色:甩去多余的液体后,加入50uLDAB显色液,室温孵育1min,显微镜下观察染色结果,防止过染,自来水冲洗;
其中,以上步骤均在电场环境下进行。
2.根据权利要求1所述的提高免疫组化效率的方法,其特征在于,步骤一中切...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘静静,程希彤,
申请(专利权)人:苏州泽岑生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏;32
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