一种金针菇抗冻多糖的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种金针菇抗冻多糖的提取方法，包括以下步骤：将冷诱导处理得到的金针菇菌丝体粉碎，在高温高压热水浴中提取；离心所得沉淀溶于碱溶液中提取；提取所得沉淀溶于质量分数较大的碱溶液中再次提取；将提取得到的上清液用酸中和并浓缩、干燥，得到所述金针菇抗冻多糖。本发明专利技术提取抗冻多糖操作简单、省时高效、节能环保，且提取出的金针菇抗冻多糖具有较高的抗冻活性。

【技术实现步骤摘要】
一种金针菇抗冻多糖的提取方法
本专利技术属于金针菇多糖提取
，涉及一种金针菇菌丝体抗冻多糖的提取方法。
技术介绍
金针菇，又名金钱菌，在真菌分类中属于担子菌亚门层菌纲伞菌目口蘑科小火焰菌属。金针菇味道鲜美，营养丰富，是百姓家中常见的食用菌类。金针菇富含多种生物活性物质，如多糖、维生素、蛋白质、多元酚和膳食纤维等。目前人们已知金针菇多糖具有良好的免疫调节、抗肿瘤、抗氧化及其它生理活性，但对金针菇菌丝体内抗冻多糖的研究较少。抗冻多糖具有重结晶抑制活性，能够有效控制冰晶的生长，防止细胞外冰结晶造成的损伤，而引起人们的关注。目前，关于金针菇多糖提取方法的研究报道有很多，CN110563856A公开了一种用热水浸提提取金针菇多糖的方法。CN103788223A公开了一种对金针菇超微粉使用纤维素酶、果胶酶、木聚糖酶提取并复合超声提取的方法。CN103113487A公开了一种使用纤维素酶预处理，微波辅助萃取的同时制备金针菇多糖和蛋白的方法。CN104231103A公开了一种先用热水提取金针菇多糖，再用碱溶液提取金针菇中的多糖的方法。以上公开的多糖的提取方法均影响其生物活性。
技术实现思路
为克服上述现有技术中存在的缺陷，本专利技术的目的是提供一种便捷、高效的提取高抗冻活性金针菇多糖的方法。为了达到上述目的，本专利技术采取的技术方案是：本专利技术提供了一种金针菇抗冻多糖的提取方法，将冷诱导处理得到的金针菇菌丝体粉碎，在高压热水浴中提取；离心所得沉淀溶于碱溶液中提取；提取所得沉淀溶于质量分数较大的碱溶液中再次提取；将提取得到的上清液用酸中和并浓缩、干燥，得到所述金针菇抗冻多糖。具体步骤如下：(1)将冷诱导处理后的金针菇菌丝体粉碎，将金针菇菌丝体与蒸馏水按质量/体积比1:(20～40)(W:V)溶于蒸馏水中，并在高温高压100℃～121℃热水浴中提取；然后离心得到沉淀。(2)将步骤(1)中得到的沉淀溶于质量分数为0.5％～5％的碱溶液，并在高温高压100℃～121℃热水浴中提取；然后离心得到沉淀。(3)将步骤(2)中得到的沉淀溶于质量分数为10％～30％的碱溶液，并在高温高压100℃～121℃热水浴中提取，然后离心得到上清液。(4)将步骤(3)得到的上清液用酸进行中和并浓缩、干燥，得到金针菇抗冻多糖干粉。步骤(1)中，冷诱导处理的温度为2～10℃；优选地，为4℃。步骤(1)中，冷诱导处理的时间为5～10天；优选地，为7天。本专利技术将金针菇菌丝体进行“冷诱导处理”的目的为通过温度的降低使金针菇菌丝体受到低温胁迫，从而响应并产生抗冻活性物质，即生成抗冻多糖。将步骤(1)冷诱导处理后的金针菇菌丝体进行粉碎前还包括过滤、水洗、干燥的步骤。其中，所述金针菇菌丝体的过滤可以用纱网或者纱布过滤；优选地，为纱网。其中，所述金针菇菌丝体的清洗所用水可以是蒸馏水、去离子水等。其中，所述水洗的次数为2～4次，直至将培养基洗净；优选地，为3次。其中，所述干燥可以是真空冷冻干燥或烘干；优选地，为真空冷冻干燥。所述真空冷冻干燥的条件为：冷肼温度为-40℃～-56℃(优选40℃)，真空为1Pa，冷冻干燥时间为11～24小时(优选13小时)，直至金针菇菌丝体完全干燥。所述烘干的温度为55℃～60℃；优选地，为55℃。所述烘干的时间为10～14小时，以使菌丝体完全干燥；优选地，为12小时。步骤(1)中优选采用打磨机高速打碎金针菇菌丝体。步骤(1)中，将金针菇菌丝体与蒸馏水优选按1:20(W:V)的质量/体积比溶于蒸馏水中。步骤(1)中，所述提取的条件为：在饱和蒸气压温度为100℃～121℃条件下进行提取；优选地，为115℃。步骤(1)中，所述提取的时间为20～40min；优选地，为30min。步骤(1)中，离心的条件为9000rpm离心10～30min；优选地，为20min。步骤(2)中，所述碱为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡等中的一种或几种；优选地，为氢氧化钾溶液。步骤(2)中，所述碱溶液的质量分数优选为2％。步骤(2)中，所述沉淀与碱溶液的质量/体积比为1:(20～40)(W:V)；优选为1：20(W:V)。步骤(2)中，所述提取的温度优选为115℃。步骤(2)中，所述提取的时间为20～40min；优选地，为30min。步骤(2)中，离心的条件为9000rpm离心10～30min；优选地，为20min。。步骤(3)中，所述碱为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化钡等中的一种或几种；优选地，为氢氧化钾。步骤(3)中，所述碱溶液的质量分数优选为25％。步骤(3)中，所述沉淀与碱溶液的质量/体积比为1:(20～40)(W:V)；优选地，为1：20(W:V)。步骤(3)中，所述提取的温度优选为115℃。步骤(3)中，所述提取的时间为20～40min；优选地，为30min。步骤(3)中，所述离心的条件为9000rpm离心10～30min；优选地，为20min。。步骤(4)中，所述酸为冰醋酸、盐酸、硫酸、乳酸等中的一种或几种；优选地，为冰醋酸。步骤(4)中，用酸中和至溶液pH＝6.5～7.5；优选地，为pH＝7.0。步骤(4)中，所述浓缩的方法为旋转蒸发，浓缩至1/10～1/15体积得到浓缩液。所述浓缩的温度为50℃～65℃；优选地，为55℃。步骤(4)中，所述浓缩之前还包括透析步骤，所述透析的具体条件为将中和液分装至透析袋中，用蒸馏水透析过夜。步骤(4)中，所述干燥的方法为真空冷冻干燥；所述冷冻干燥的条件为：冷肼温度为-40℃～-56℃，真空为1Pa，冷冻干燥时间为11～24小时，直至金针菇抗冻多糖完全干燥。在一具体实施方式中，所述金针菇抗冻多糖的提取方法如下：将液体培养且冷诱导处理后的金针菇菌丝体干燥后打磨成粉末，按一定料液比用水、质量分数为2％的碱溶液在115℃高压热水中依次提取，提取后的残渣用质量分数为25％的碱溶液在115℃高压下提取，上清液用酸中和、透析过夜并浓缩干燥得到抗冻多糖。在另一具体实施方式中，所述金针菇抗冻多糖的提取方法如下：(a)将金针菇菌丝体放入4℃冰箱内进行冷诱导处理。(b)将步骤(a)冷诱导处理后的金针菇菌丝体过滤、用水清洗之后干燥。(c)将步骤(b)干燥后的金针菇菌丝体用打磨机高速打碎成粉末后，按1：20(W/V)的料液比溶于蒸馏水中，并在高温高压115℃沸水浴中提取30min。离心去除上清液后，得到沉淀。(d)将步骤(c)中得到的沉淀溶于质量分数2％的碱溶液，并在高温高压115℃沸水浴中提取30min。离心去除上清液后，得到沉淀。(e)将步骤(d)中得到的沉淀溶于质量分数25％的碱溶液，并在高温高压115℃沸水浴中提取30min，离心，得到上清液。(f)将步骤本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种金针菇抗冻多糖的提取方法，其特征在于，将冷诱导处理得到的金针菇菌丝体粉碎，在高温高压热水浴中提取；离心所得沉淀溶于碱溶液中提取；提取所得沉淀溶于质量分数较大的碱溶液中再次提取；将提取得到的上清液用酸中和并浓缩、干燥，得到所述金针菇抗冻多糖。/n

【技术特征摘要】
1.一种金针菇抗冻多糖的提取方法，其特征在于，将冷诱导处理得到的金针菇菌丝体粉碎，在高温高压热水浴中提取；离心所得沉淀溶于碱溶液中提取；提取所得沉淀溶于质量分数较大的碱溶液中再次提取；将提取得到的上清液用酸中和并浓缩、干燥，得到所述金针菇抗冻多糖。


2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括以下步骤：
(1)将冷诱导处理后的金针菇菌丝体粉碎，将金针菇菌丝体与蒸馏水按质量/体积比W:V为1:(20～40)溶于蒸馏水中，并在高温高压100℃～121℃热水浴中提取；然后离心得到沉淀；
(2)将步骤(1)中得到的沉淀溶于质量分数为0.5％～5％的碱溶液，并在高温高压100℃～121℃热水浴中提取；然后离心得到沉淀；
(3)将步骤(2)中得到的沉淀溶于质量分数为10％～30％的碱溶液，并在高温高压100℃～121℃热水浴中提取，然后离心得到上清液；
(4)将步骤(3)得到的上清液用酸进行中和并浓缩、干燥，得到金针菇抗冻多糖干粉。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述冷诱导处理的温度为2～10℃；和/或，所述冷诱导处理的时间为5～10天。


4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，将冷诱导处理后的金针菇菌丝体进行粉碎前还包括过滤、水洗、干燥的步骤。


5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述水洗所用的水是蒸馏水、去离子水；所述水洗的次数为2～4次；所述干燥为真空冷冻干燥或烘干，所述真空冷冻干燥的条件为：冷肼温度-40℃～-56℃，...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾彩凤，秦璐婕，袁志怡，常忠义，董建华，李超文，潘建泽，
申请(专利权)人：华东师范大学，上海奕农生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31