功能性嵌合凋亡小体及其制备方法和应用技术

提供一种功能性嵌合凋亡小体，所述功能性嵌合凋亡小体包含凋亡小体膜和包裹于所述凋亡小体膜中的介孔二氧化硅纳米粒子，所述凋亡小体膜为来源于免疫细胞的凋亡小体膜，所述介孔二氧化硅纳米粒子负载有MicroRNA‑21。为构建具有靶向运载功能和精确药物释放功能的特异性治疗产品提供有效的手段。

【技术实现步骤摘要】
功能性嵌合凋亡小体及其制备方法和应用
本专利技术属于生物
，尤其涉及一种功能性嵌合凋亡小体及其制备方法和应用。
技术介绍
细胞外囊泡（Extracellularvesicles，EVs）是细胞间通讯中传递信号转导分子的载体，可携带核酸、蛋白质、脂类等多种功能分子发挥作用。同时，天然膜赋予细胞外囊泡免疫原性低、同源靶向性强、循环时间长、生物屏障可达等诸多优点，是人工材料无法比拟的。受这些卓越性能的启发，细胞外囊泡被视为新一代的交付系统。制备具有多种生物活性分子或靶向配体修饰的工程化细胞外囊泡，在理想位点产生治疗效果，成为疾病治疗的一种有吸引力的策略。凋亡小体(Apoptoticbodies，ABs)是由凋亡细胞分泌的一种细胞外囊泡，由细胞膜向外起泡产生。有确凿的证据表明，吞噬凋亡细胞可以调节免疫应答的抗炎方向。类似的结果也只反映在凋亡细胞/囊泡膜的吞噬，这可能与表面的磷脂酰丝氨酸密切相关。工程化细胞外囊泡的制备采用了多种治疗性分子加载方法，主要包括电穿孔法、预络合法、胞外囊泡分离前亲代细胞转染法、皂素渗透法和超声法。然而，现本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.功能性嵌合凋亡小体，其特征在于，所述功能性嵌合凋亡小体包含凋亡小体膜和包裹于所述凋亡小体膜中的介孔二氧化硅纳米粒子，所述凋亡小体膜为来源于免疫细胞的凋亡小体膜，所述介孔二氧化硅纳米粒子负载有MicroRNA-21。/n

【技术特征摘要】
1.功能性嵌合凋亡小体，其特征在于，所述功能性嵌合凋亡小体包含凋亡小体膜和包裹于所述凋亡小体膜中的介孔二氧化硅纳米粒子，所述凋亡小体膜为来源于免疫细胞的凋亡小体膜，所述介孔二氧化硅纳米粒子负载有MicroRNA-21。


2.根据权利要求1所述的功能性嵌合凋亡小体，其特征在于，所述免疫细胞选自淋巴细胞，所述淋巴细胞选自T细胞。


3.根据权利要求1所述的功能性嵌合凋亡小体，其特征在于，所述MicroRNA-21通过靶细胞内多肽的作用可响应性释放于靶细胞内。


4.根据权利要求1所述的功能性嵌合凋亡小体，其特征在于，所述MicroRNA-21上标记有Cy5。


5.根据权利要求3所述的功能性嵌合凋亡小体，其特征在于，所述MicroRNA-21通过靶细胞胞浆中的谷胱甘肽破坏二硫键导致MicroRNA-21释放于靶细胞内。


6.权利要求1-5任一项所述的功能性嵌合凋亡小体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）负载MicroRNA-21的介孔二氧化硅纳米粒子制备：将介孔二氧化硅纳米粒子和3-巯基丙基三甲氧基硅烷加入乙醇溶液中，超声混合10min后，在60℃、氮气条件下搅拌8-14小时，然后加入2,2'-二硫基联吡啶和2-二甲胺基乙硫醇，继续反应10-12h，获得反应产物；反应产物使用乙醇清洗数次后离心获得沉淀，将所述沉淀在真空下干燥，获得活化的介孔二氧化硅纳米粒子，将0.06mg活化的介孔二氧化硅纳米粒子和15nmolMicroRNA-21加入无酶水中，在4℃条件下吹打混匀，离心后弃去上清液，即得负载MicroRNA...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘文娜，
申请(专利权)人：西安组织工程与再生医学研究所，
类型：发明
国别省市：陕西;61