针对蛋白S的特异性siRNA在治疗血友病中的用途制造技术

本发明专利技术提供了针对蛋白S的siRNA在治疗血友病的方法中的用途。在本发明专利技术的范围内，还有在有需要的患者中治疗血友病的方法，所述方法包括向所述患者施用包含根据本发明专利技术的siRNA的分子和用于预防或治疗血友病的剂型，所述剂型包括包含根据本发明专利技术的siRNA的分子。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对蛋白S的特异性siRNA在治疗血友病中的用途
本专利技术涉及使用针对蛋白S的siRNA治疗血友病。
技术介绍
血友病A(HA)和B(HB)是遗传性X连锁疾病。它们分别是由因子VIII(FVIII)(F8)或因子IX(FIX)基因(F9)的突变引起的，从而导致编码蛋白质的缺失，而该蛋白质是凝血内在途径的重要组成部分(图1A)。患有严重血友病的患者经常会在肌肉骨骼系统内自发性出血，例如关节积血(hemarthrosis)。如果不及时治疗，可能导致年轻时的残疾。目前的血友病治疗包括因子替代治疗。这种疗法可改善生活质量(qualityoflife)(QoL)，但仍存在一些缺点。因子是通过静脉内施用的，由于其半衰期短，因此必须反复输注，这种方式会使患者感到严重不适，并有感染和静脉损伤的风险。更重要的是，接受因子替代疗法的患者会发展成抑制性同种抗体(alloantibodies)。抑制剂会使得替代疗法无效，并限制了患者获得安全有效的标准护理，并增加了他们的易发病率和死亡风险。新疗法专注于开发能够减少预防性(prophylactic)输注频率的产品，从而有可能同时提高对疗法和QoL的依从性(compliance)。除了持久的FVIII和FIX，新方法还包括替换产生内源性凝血因子所需的基因，模仿缺失因子的凝血功能的双特异性抗体技术以及靶向凝血抑制剂(例如组织因子途径抑制剂)(tissuefactorpathwayinhibitor，TFPI)或抗凝血酶作为血友病患者凝血功能再平衡的策略。最近，研究表明，在血友病小鼠模型中，活化蛋白C(APC)特异的丝氨酸蛋白酶抑制蛋白可在体外(invitro)拯救凝血酶的产生并恢复止血作用。基于上述现有技术，本专利技术的目的是提供新颖的血友病治疗方法和手段。该目的通过本说明书的权利要求书实现。
技术实现思路
本专利技术的第一方面提供了针对蛋白S的siRNA在治疗血友病的方法中的用途。在本说明书的上下文中，术语血友病涉及身体的使血液凝结的能力受损的病症(condition)。血友病的基因型包括遗传性血友病A，血友病B和血友病C。在本说明书的上下文中，蛋白S涉及由基因PROS1(NCBI基因ID：5627)编码的人“维生素K依赖性蛋白S”(UniProtIDP07225)。存在人蛋白S的两个转录本变体。与转录本变体1相比，转录本变体2在5′编码区缺少一个选择性框内外显子。编码的同种型(isoform)2比同种型1短。转录本变体2的特征在于SEQIDNO001。转录本变体1的特征在于SEQIDNO002。在本说明书的上下文中，术语siRNA(小/短干扰RNA)涉及能够干扰包含与该序列互补的核酸序列的基因的表达(换句话说：阻止表达)的RNA分子，该过程称为RNA干扰。术语siRNA旨在涵盖单链siRNA和双链siRNA。SiRNA通常以17-24bp的长度为特征。双链siRNA衍生自1个较长的双链RNA分子(dsRNA)。长的dsRNA被内切核糖核酸酶(称为Dicer)切割，形成双链siRNA。在核蛋白复合体(称为RISC)中，双链siRNA解螺旋(unwound)形成单链siRNA。RNA干扰通常通过将siRNA分子与具有互补序列的mRNA分子结合而起作用，从而导致mRNA降解。RNA干扰也可能通过将siRNA分子与细胞核内的pre-mRNA(未成熟的，未剪接的mRNA)的内含子(intronic)序列结合而发生，从而导致pre-mRNA降解。专利技术人研究了靶向蛋白S(PS)是否可以通过重新平衡凝血来促进血友病中的止血(图1B)。由PROS1基因编码的PS，在因子Va(FVa)和FVIIIa失活时，充当APC的辅助因子，在FXa抑制中，充当TFPI的辅助因子。这种双重作用使PS成为凝血酶生成的关键调节剂。在某些实施方案中，siRNA包含17-24个核苷酸。在某些实施方案中，siRNA包含18-22个核苷酸。在某些实施方案中，siRNA包含19个核苷酸。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于，其是与SEQID001反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于，其是与SEQID002反向互补的序列。在某些实施方案中，所述其特征在于，其是与选自由SEQIDNO003、SEQIDNO004、SEQIDNO005、SEQIDNO006、SEQIDNO007、SEQIDNO008、SEQIDNO009、SEQIDNO010、SEQIDNO011、SEQIDNO012、SEQIDNO013、SEQIDNO014、SEQIDNO015、SEQIDNO016、SEQIDNO017和SEQIDNO018组成的组的序列反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO003反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO004反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO005反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO006反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO007反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO008反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO009反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO010反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO011反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO012反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO013反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO014反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO015反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO016反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO017反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与SEQIDNO018反向互补的序列。在某些实施方案中，siRNA其特征在于与通过并列上文定义的序列的任何两个连续序列形成的序列反向互补的序列。作为非限制性实例，siRNA其特征在于与通过并列SEQIDNO014和SEQIDNO015形成的序列反向互补的序列。在某些实施方案中，所述siRNA其特征在于与选自SEQIDNO014(外显子12)、SEQIDNO011(外显子9)、SEQIDNO006(外显子4)、SEQIDNO012(外显子10)和SEQIDNO013(外显子11)组成的组的序列反向互补。在某些实施方案中本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种针对蛋白S的siRNA在治疗血友病的方法中的用途。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171101 EP PCT/EP2017/0779861.一种针对蛋白S的siRNA在治疗血友病的方法中的用途。


2.如权利要求1所述的针对蛋白S的siRNA在治疗血友病的方法中的用途，其中所述siRNA包含17-24个核苷酸。


3.如上述任一权利要求所述的针对蛋白S的siRNA在治疗血友病的方法中的用途，其中所述siRNA其特征在于，其是与SEQID001或SEQID002反向互补的序列。


4.如上述任一权利要求所述的针对蛋白S的siRNA在治疗血友病的方法中的用途，其中所述siRNA其特征在于，其是与选自由SEQIDNO003、SEQIDNO004、SEQIDNO005、SEQIDNO006、SEQIDNO007、SEQIDNO008、SEQIDNO009、SEQIDNO010、SEQIDNO011、SEQIDNO012、SEQIDNO013、SEQIDNO014、SEQIDNO015、SEQIDNO016、SEQIDNO017和SEQIDNO018组成的组的序列反向互补的序列。


5.如上述任一权利要求所述的针对蛋白S的siRNA在治疗血友病的方法中的用途，其中所述siRNA其特征在于，其是与以SEQIDNO001的核苷酸1-100、101-200、201-300、301-400、301-400、401-500、501-600、601-700、701-800、801-900、901-1000、1001-1100、1101-1200、1201-1300、1301-1400、1501-1600、1701-1800、1801-1900、1901-2000、2001-2100、2101-2200、2201-2300、2301-2400、2501-2600、2701-2800、2801-2900、2901-3000、3001-3100、3101-3200、3201-3300、3301-3400、3401-3500或3501-3580为特征的序列反向互补的序列。


6.如上述任一权利要求所述的针对蛋白S的siRNA在治疗血友病的方法中的用途，其中所述siRNA其特征在于，包含选自以下的序列或由其组成的序列组成：SEQIDNO019(siRNA_1)、SEQIDNO020(siRNA_2)、SEQIDNO021(siRNA_3)、SEQIDNO022(siRNA_4)、SEQIDNO023(siRNA_5)、SEQIDNO024(siRNA_6)、SEQIDNO025(siRNA_7)、SEQIDNO026(siRNA_8)、SEQIDNO027...

【专利技术属性】
技术研发人员：拉贾·普林斯·埃尔·阿达尼，安妮·安吉利略谢勒，
申请(专利权)人：伯尔尼大学，
类型：发明
国别省市：瑞士;CH