【技术实现步骤摘要】
一种提高神经干细胞诱导效率和促进神经元分化的方法
本专利技术涉及神经干细胞诱导及神经元分化
，尤其涉及一种提高神经干细胞诱导效率和促进神经元分化的方法。
技术介绍
传统针对神经干细胞诱导及其神经元分化的研究方法较为复杂，且研究操作过程较为麻烦，诱导效率不高，且不利于神经干细胞诱导及神经元分化的发生。为此，我们提出了一种提高神经干细胞诱导效率和促进神经元分化的应用方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种提高神经干细胞诱导效率和促进神经元分化的方法。为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：一种提高神经干细胞诱导效率和促进神经元分化的方法，包括如下步骤：S1、SMSINS细胞的程序性诱导：在第1天和第2天用LDN193189(SelleckS2618，0.25|μM)、SB431542(SelleckS1067，1|μM)处理MEFs(小鼠胚胎成纤维细胞)；第3天和第4天使用CHIR99021(SelleckS2924，3|...
【技术保护点】
1.一种提高神经干细胞诱导效率和促进神经元分化的方法，其特征在于，包括如下步骤：/nS1、SMSINS细胞的程序性诱导：/n在第1天和第2天用LDN193189(Selleck S2618，0.25|μM)、SB431542(Selleck S1067，1|μM)处理MEFs(小鼠胚胎成纤维细胞)；第3天和第4天使用CHIR99021(Selleck S2924，3|μM)、DAPT(Selleck S2215，5|μM)和VPA(Sigma P4543，0.5mM)；第5天和第6天使用CHIR99021(Selleck S2924，3|μM)、DAPT(Selleck S...
【技术特征摘要】
1.一种提高神经干细胞诱导效率和促进神经元分化的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、SMSINS细胞的程序性诱导：
在第1天和第2天用LDN193189(SelleckS2618，0.25|μM)、SB431542(SelleckS1067，1|μM)处理MEFs(小鼠胚胎成纤维细胞)；第3天和第4天使用CHIR99021(SelleckS2924，3|μM)、DAPT(SelleckS2215，5|μM)和VPA(SigmaP4543，0.5mM)；第5天和第6天使用CHIR99021(SelleckS2924，3|μM)、DAPT(SelleckS2215，5|μM)；在第7天和第8天改善神经分化添加Shh(Peprotech315225，100ng/ml)和Purmorphamine(selleckS3042，1|μM)；在第9天和第10天移除所有的小分子化合物，换NSC全培养基；此时SMSINS细胞可被胰蛋白酶化为单细胞，可在NSC全培养基中接种到未涂覆PDL/L的24孔板中；
S2、SMSINS细胞的体外神经元分化：
将SMSINS接种于涂覆PDL/L的N2-B27培养基中[50％NeurobasalPlus(Gibco)和50％DMEM/F12培养基中，添加1×N2supplement，1×B27supplement，1×GlutaMax]，补充10ng/mlBDNF(Peprotech)和200|μM抗坏血酸(Sigma)中培养至少2周；进...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭阳，张培东，段青蕊，
申请(专利权)人：南方医科大学珠江医院，
类型：发明
国别省市：广东;44
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