一种胶原蛋白及其制备方法技术

本申请要求保护一种胶原蛋白的制备方法及由这种方法生产的胶原蛋白产品。本申请的制备方法包括去除外杂、低温冷冻、切片、低温酶解、多次盐析、制剂、成型、冷冻干燥等步骤。经测试，本申请的胶原蛋白产品纯度高，并且产品中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量较高，具有良好的生物相容性、可生物降解性以及生物活性，可以广泛应用于医药、组织工程、化妆品等领域。

【技术实现步骤摘要】
一种胶原蛋白及其制备方法
本申请涉及一种胶原蛋白产品及其制备方法，属于生物工程
生物工程是国家重点扶持的高科技产业，市场前景广阔。本申请旨在采用牛、羊屠宰后的副产品，经分离，提取，获得高活性的动物源性产品胶原蛋白。
技术介绍
对于我国各地的大型牧区而言，每年屠宰牛羊量数千万头，在获取大量的牛羊肉用于食品的同时，也产生大量的副产品，虽然可以用于食品，但营养价值不高，食用品质也不高，相当部分副产品被直接抛弃或直接喂养动物，既是对畜牧资源的浪费，也会造成环境污染，甚至给当地带来很多不利影响。高端原材料是制备护肤品的核心，国外对于动物源性的美容产品的开发、研究和生产具有较多的实践经验和成果，譬如瑞士、德国、法国等国家的高端护肤品牌、生物保健品牌往往都使用很多利用生物工程开发的动物源性高端原材料，譬如胶原蛋白、羊胎素、胜肽脑活性肽、脑垂体提取物、睾丸素等等，基于这些原料可再开发各种终端产品，譬如护肤品类的面膜、精华液、冻干球等，保健品类的片剂、胶囊、口服液等。然而国内该方面，极为匮乏。胶原蛋白就是利用畜牧业副产品可以获得的一种高端原材料。胶原蛋白是一种生物性高分子物质，在动物细胞中扮演结合组织的角色，是人体内含量最丰富的蛋白质，占全身总蛋白质的30％以上。胶原蛋白是生物科技产业最具关键性的原材料之一，也是需求量十分庞大的最佳生医材料。其应用领域包括生医材料、化妆品、食品工业、研究用途等。胶原蛋白能够防止皮肤老化、去皱纹。随着年龄的增长，胶原蛋白会逐渐的流失，从而导致支撑皮肤的胶原肽键和弹力网断裂，其螺旋网状结构随即被破坏，皮肤组织被氧化、萎缩、塌陷，肌肤就会出现干燥、皱纹、松弛无弹性等衰老现象，所以，女性补充胶原蛋白是一种延衰的必须。在胶原蛋白的制备过程中，存在以下难点：原料选择及预处理方式不正确会导致活性成分产率低；工艺步骤选择不适当导致生产过程存在污染，终产品中杂质多；终产品物理性质不佳，吸收困难。本申请克服了现有技术中胶原蛋白制备工艺的难点，提供了一种产率高、活性保持好、无污染的胶原蛋白制备方法，所制得的产品收率高、纯度高，易吸收。
技术实现思路
本申请涉及一种利用畜牧业屠宰后的副产品，采用生物工程技术提取高端原材料的制备方法，可有效弥补现在市场不足，同时实现资源价值的最大利用化，减少环境污染，保护生态环境。本申请要求保护一种胶原蛋白的制备方法及由这种方法生产的胶原蛋白产品，本申请的制备方法产率高、活性保持好，制备步骤科学合理，无污染，制得的胶原蛋白产品收率高、纯度高，品质细腻，易吸收。本申请的制备方法包括去除外杂、低温冷冻、切片、低温酶解、多次盐析、制剂、成型、冷冻干燥等步骤。经测试，本申请获得的胶原蛋白产品纯度高，并且产品中甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)和谷氨酸(Glu)含量较高，具有良好的生物相容性、可生物降解性以及生物活性，因此可以广泛应用于食品、医药、组织工程、化妆品等领域。本申请的胶原蛋白产品含有大量极性基团，是保湿因子，且有阻止皮肤中的酪氨酸转化为黑色素的作用，有纯天然保湿、美白、防皱、祛斑等作用，可广泛应用于美容用品中。本申请的胶原蛋白产品与人体皮肤胶原的结构相似，为非水溶性纤维状含糖蛋白质，分子中富含大量氨基酸和亲水基，具有一定的表面活性和很好的相容性，同时由于其分子中含有大量的羟基，因此它有着相当好的保湿作用，在相对湿度70％时，仍可保持其自身重量45％的水分，试验证明本申请的0.01％的胶原蛋白纯溶液就能形成很好的保水层，供给皮肤所需要的全部水分。本申请的胶原蛋白产品非常适合应用于化妆品、护肤品领域。本申请涉及一种胶原蛋白的制备方法，其特征在于制备步骤包括：取动物跟腱，预处理后使用盐酸酸解，收集酸解液中的沉淀物，蒸馏水清洗后烘干，使用胶体磨粉碎，蛋白酶酶解，盐析，复溶冻干即得。本申请涉及一种胶原蛋白的制备方法，其特征在于所述预处理是指浸泡并去除外部杂质，晾干后冷冻2-5小时，取出切片，使用乙醇浸泡切片2-5小时，后用蒸馏水清洗。本申请涉及一种胶原蛋白的制备方法，，其特征在于所述盐析的次数为2次。本申请涉及一种胶原蛋白的制备方法，，其特征在于制备步骤包括：取动物跟腱，浸泡并去除外部杂质，晾干后放入冷库冷冻，取出切片，使用乙醇浸泡切片2-5小时，蒸馏水清洗后，使用盐酸酸解跟腱切片，收集酸解液中的沉淀物，蒸馏水清洗后烘干，使用胶体磨粉碎，蛋白酶酶解，盐析2次，复溶冻干即得。本申请涉及一种胶原蛋白产品，其特征在于是由如上权利要求1-4中任一项的制备方法制得。本申请涉及一种胶原蛋白产品，其特征在于产品为白色纤维状固体。本申请涉及一种胶原蛋白产品，如权利要求5所述的胶原蛋白产品，其特征在于产品纯度为90％以上。本申请涉及一种胶原蛋白产品，其特征在于含有权利要求5至7中任一项的胶原蛋白产品。附图说明图1为按照本申请所述胶原蛋白制备方法制得的胶原蛋白产品的SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳)测定结果。图2为按照本申请所述胶原蛋白制备方法制的的胶原蛋白产品的HPLC(高效液相色谱)测定结果。具体实施方式实施例1、胶原蛋白的制备工艺流程(1)设备清单(品名/规格/数量)：操作台面/约80cmX5m/1，不锈钢托盘/约40cmX60cmX8cm/10，剪刀/医用一头圆头，一头尖头/10，冷库/-20℃，20m^2/1(一半用于原料)，切片机/20kg/h/1，不锈钢桶/圆形50L/5，不锈钢滤网/与不锈钢桶口配套/5，搅拌系统/300rpm/5，胶体磨/60-200目可调/1，冷冻干燥机/2m^2/1。(2)制备步骤：取动物跟腱，浸泡3-24小时，去除外部杂质。晾干原料后放入冷库冷冻2-5小时，取出切片。使用乙醇浸泡切片2-5小时。取出浸泡后的切片，蒸馏水清洗后，使用盐酸酸解跟腱切片24-48小时。收集酸解液中的沉淀物，蒸馏水清洗后烘干，使用胶体磨彻底粉碎，之后使用蛋白酶酶解后，盐析2次，复溶冻干即得。最终获得的胶原蛋白产品性状为白色纤维状固体，无气味，纯度为90％以上，无菌检测小于200cfu。实施例2、SDS-PAGE测定十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis，简称SDS-PAGE)是聚丙烯酰胺凝胶电泳中最常用的一种蛋白表达分析技术。此项技术的原理，是根据检体中蛋白质分子量大小的不同，使其在电泳胶中分离，其通常用于检测蛋白的表达情况(表达量，表达分布)，以及分析目的蛋白的纯度等。实验操作流程为：(1)清洗玻璃板；(2)灌胶、上样；(3)电泳；(4)染色、脱色；(5)结果处理：测量脱色后凝胶板的长度和每个蛋白质样品移动距离(即蛋白质带中心到加样孔的距离)，测量指示染料迁移的距离。按以下公式计算蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胶原蛋白的制备方法，其特征在于制备步骤包括：取动物跟腱，预处理后使用盐酸酸解，收集酸解液中的沉淀物，蒸馏水清洗后烘干，使用胶体磨粉碎，蛋白酶酶解，盐析，复溶冻干即得。/n

【技术特征摘要】
1.一种胶原蛋白的制备方法，其特征在于制备步骤包括：取动物跟腱，预处理后使用盐酸酸解，收集酸解液中的沉淀物，蒸馏水清洗后烘干，使用胶体磨粉碎，蛋白酶酶解，盐析，复溶冻干即得。


2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述预处理是指浸泡并去除外部杂质，晾干后冷冻2-5小时，取出切片，使用乙醇浸泡切片2-5小时，后用蒸馏水清洗。


3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述盐析的次数为2次。


4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于制备步骤包括：取动物跟腱，浸泡并去除外部杂质，晾干后放入冷...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴紫琳，韩雪，戴东升，
申请(专利权)人：戴东升，
类型：发明
国别省市：北京;11