一种用于分离纯化α-葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法及其分离纯化方法技术

本发明专利技术提供了一种用于分离纯化α‑葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法及其分离纯化α‑葡萄糖苷酶的方法，所述亲和层析介质的制备方法包括以下步骤：S1、首先采用脱脂棉作为基质，经高碘酸钠溶液醛基化反应，制备得到醛基化脱脂棉；S2、其次将阿卡波糖作为亲和配基，偶联在步骤S1制备得到的醛基化脱脂棉上，制备得到偶联产物；S3、再次采用硼氢化钠溶液还原步骤S2制备得到的偶联产物，制备得到稳定的亲和层析介质；S4、最后将步骤S3制备得到的亲和层析介质用蒸馏水洗涤抽干，储存在乙醇溶液中备用。本发明专利技术提供的制备方法原料容易获得、价格低廉、操作简单、提纯方法稳定可靠、具有很大的应用前景和良好的经济、社会效益。

【技术实现步骤摘要】
一种用于分离纯化α-葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法及其分离纯化方法
本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种用于分离纯化α-葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法及其分离纯化α-葡萄糖苷酶的方法。
技术介绍
α-葡萄糖苷酶，又称葡萄糖基转移酶（α-glucosidase，EC.3.2.1.20），系统命名为α-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶。α-葡萄糖苷酶能催化α-1,4-糖苷键水解，使小肠内麦芽糖、蔗糖等寡糖水解。通过抑制α-葡萄糖苷酶的活性，可使葡萄糖的生成及吸收减缓，降低餐后血糖峰值，调整血糖水平，在调节糖代谢的同时也调节了脂肪的生成，因此α-葡萄糖苷酶抑制剂成为近年来生物
的研究热点。传统的筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂方法主要是采用微生物（包括黑曲霉和酵母菌等）来源的商品化α-葡萄糖苷酶，这些酶与人体小肠的α-葡萄糖苷酶存在较大的差异性，并不完全适合用于α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选。也有部分研究者采用动物小肠来源α-葡萄糖苷酶粗酶液，试图代替商品化α-葡萄糖苷酶，以保证研究结果更加合理。由于动物小肠来源α-葡萄糖苷酶粗酶液中存本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于分离纯化α-葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、首先采用脱脂棉作为基质，经高碘酸钠溶液醛基化反应，制备得到醛基化脱脂棉；/nS2、其次采用阿卡波糖作为亲和配基，偶联在步骤S1制备得到的醛基化脱脂棉上，制备得到偶联产物；/nS3、再次采用硼氢化钠溶液还原步骤S2制备得到的偶联产物，制备得到稳定的亲和层析介质；/nS4、最后将步骤S3制备得到的亲和层析介质用蒸馏水洗涤抽干，储存在乙醇溶液中备用。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于分离纯化α-葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、首先采用脱脂棉作为基质，经高碘酸钠溶液醛基化反应，制备得到醛基化脱脂棉；
S2、其次采用阿卡波糖作为亲和配基，偶联在步骤S1制备得到的醛基化脱脂棉上，制备得到偶联产物；
S3、再次采用硼氢化钠溶液还原步骤S2制备得到的偶联产物，制备得到稳定的亲和层析介质；
S4、最后将步骤S3制备得到的亲和层析介质用蒸馏水洗涤抽干，储存在乙醇溶液中备用。


2.根据权利要求1所述的一种用于分离纯化α-葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法，其特征在于：所述脱脂棉与所述高碘酸钠的质量比为100:1-5。


3.根据权利要求1所述的一种用于分离纯化α-葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法，其特征在于：所述醛基化脱脂棉与所述阿卡波糖的质量比为100:1-5。


4.根据权利要求1所述的一种用于分离纯化α-葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法，其特征在于：所述偶联产物与所述硼氢化钠的质量比为100:1-5。


5.根据权利要求1-4中任意一项权利要求所述的一种用于分离纯化α-葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中，醛基化反应的温度为10-50℃，时间为0.5-5h，转速为50-500rpm。


6.根据权利要求1-4中任意一项权利要求所述的一种用于分离纯化α-葡萄糖苷酶的亲和层析介质的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中，偶联反应的温度为10-40℃，时间为2-30h，转速为50-500rpm。

...

【专利技术属性】
技术研发人员：阳文静，游清徽，孙晨松，蔡险峰，徐贤柱，王曼莹，徐婧然，陈妮，陈盈盈，杨尚祝，叶秋子，
申请(专利权)人：江西师范大学，
类型：发明
国别省市：江西;36