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彩虹明樱蛤的种质鉴定方法技术

技术编号:2518191 阅读:230 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术是一种彩虹明樱蛤的种质鉴定方法,其特征在于,其步骤如下,取至少30个待测样品彩虹明樱蛤进行7个形态学参数的测定,分别测定其壳长CD、壳顶到前闭壳肌痕最大距离AF、外套痕前后缘长IJ、壳顶到外套痕后缘长AE、壳高AB、壳宽SW和前后闭壳肌痕间距离GH这7个参数;然后以壳长CD参数值作分母、其余6个参数值作分子,获得6个比例参数值X↓[AF]∶AF/CD;X↓[IJ]∶IJ/CD;X↓[AE]∶AE/CL;X↓[AB]∶AB/CL;X↓[SW]∶SW/CD;X↓[GH]∶GH/CD;并将这6个比例参数值分别代入判别方程中进行结果判定,根据所得Y值的最大值出现频率最多的群体即为待测样品彩虹明樱蛤所处的来源。本发明专利技术方法可以快速、经济、相对准确和操作简便地鉴定中国主要产地彩虹明樱蛤的种质。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种种质鉴定方法,特别是一种。
技术介绍
彩虹明樱蛤(Moerella iridescens Benson)隶属于软体动物门、瓣鳃纲、樱蛤科(Tellinidae),俗称梅蛤、黄蛤、海瓜子、扁蛏。彩虹明樱蛤自然分布于我国各海区,且主要资源区为东海区杭州湾海涂中,因此该蛤成为江浙沪自然采捕的一种重要小型经济贝类,且价格逐年攀升。沿海渔民在高利润的趋动下,过度采捕及围滩养虾,自然生态被严重破坏,其资源量急剧下降,且由于贸易自由化,各海区自然苗种被采捕在各地进行人工养殖,这极易造成种质混杂和对天然资源破坏。生活在中国东海杭州湾和黄海海州湾近海海区的彩虹明樱蛤由于生活环境的不尽相同,水文因素的差异以及各海区地理位置的不同造成彩虹明樱蛤分属于各个不同的种群。对产于海州湾连云港海区(LYG)、杭州湾南岸的慈溪海区(CX)和杭州湾北岸平湖乍浦海区(ZP)的彩虹明樱蛤群体进行有效的鉴定或鉴别,对于彩虹明樱蛤的增养殖亲本选择和原产地资源保护具有重要的应用价值。 目前常用来进行评价生物遗传多样性和种质鉴定的分子标记均具有一定程度的缺陷,如RAPD技术(随机扩增序列多态性DNA,Random amplifiedpolymorphic DNA),常因RAPD引物过短10个碱基、退火温度过低一般36-37℃,导致扩增产物的一些非特异结果,其可靠程度和真实性是主要的缺陷;而AFLP技术(扩增片段长度多态性,Amplified fragment lengthpolymorphism),又因操作条件复杂如要求酶切、成本相对较高而限制了其广泛的应用,微卫星技术因分子标记难以筛选,要求技术和设备高尖而限制其广泛的应用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足,提供一种快速、经济、相对准确和操作简便的;用于对我国主要彩虹明樱蛤群体的种质鉴定。 本专利技术所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本专利技术是一种,其特点是,其步骤如下, (1)取至少30个待测样品彩虹明樱蛤进行7个形态学参数的测定,分别测定壳长CD、壳顶到前闭壳肌痕最大距离AF、外套痕前后缘长IJ、壳顶到外套痕后缘长AE、壳高AB、壳宽SW和前后闭壳肌痕间距离GH这7个参数;然后以壳长CD参数值作分母、其余6个参数值作分子,获得6个比例参数值XAFAF/CD;XIJIJ/CD;XAEAE/CL;XABAB/CL;XSWSW/CD;XGHGH/CD; (2)将XAF、XIJ、XAE、XAB、XSW和XGH 6个比例参数值分别代入下列方程中进行结果判定 YCX=388.7272XAF+141.2037XIJ-69.4791XAE-45.9566XAB+183.0137XSW+112.7836XGH-216.012 YZP=445.5594XAF+121.748XIJ-68.9081XAE-21.8706XAB+139.715XSW+118.5378XGH-228.234 YLYG=182.1849XAF+100.3651XIJ+31.72951XAE-85.5016XAB+215.011XSW+146.1427XGH-162.583 (3)根据所得Y值的最大值出现频率最多的群体即为待测样品彩虹明樱蛤所处的来源。 以下对专利技术人所作的研究试验进行阐述。 一、样本采集。 采集的试验材料均取自杭州湾南北岸和海州湾彩虹明樱蛤典型代表天然海区,分别是海州湾连云港海区(LYG)、杭州湾南岸的慈溪海区(CX)和杭州湾北岸平湖乍浦海区(ZP)海区的彩虹明樱蛤,各群体取样时间、地点和数目见表1,所得到的样本快速低温运送到实验室并在第一时间对其进行实验数据的测量。 表1 彩虹明樱蛤样本生物学数据 二、测量方法。 采用游标卡尺、分规、直尺等测量工具,精确到0.2mm,选取彩虹明樱蛤的壳高、壳宽、壳长、两侧闭壳肌到壳顶的长等,测量参数为11个可量性状,分别为CD、AB、AD、AC、SW、AE、AF、EF、GH、AI、IJ共测得990个形态学数据,测量部位见附图。 测量形态性状标识如下 1.CD壳长; 2.AB壳高; 3.AD壳顶到壳前缘长; 4.AC壳顶到壳后缘长; 5.SW壳宽; 6.AE壳顶到后闭壳肌痕外缘间距; 7.AF壳顶到前闭壳肌痕外缘最大距离; 8.EF前后闭壳肌痕外缘间距离; 9.GH前后闭壳肌痕内缘间距离; 10.AI壳顶到外套痕后缘的距离; 11.IJ外套痕前后缘长; 三、数据处理。 为消除个体规格大小对参数值的影响,先将每只蛤的所有参数分别除以壳长(CD)予以校正,得出10个形态学比例性状,使用STASTISTICA 99’edition软件中的判别分析方法对3个彩虹明樱蛤群体进行逐步判别分析,建立判别方程。 对所有样本进行逐个判别。判别准确率的计算公式为 判别准确率P1(%)=判别正确的数目/实测数目×100 判别准确率P2(%)=判别正确的数目/判别数目×100 其中,Ai为第i个种群判别正确的彩虹明樱蛤数目,Bi为第i个种群实际判别的彩虹明樱蛤数目,k为种群数。 判别方程如下 YCX=-2.014XAB-22.8113XAD+177.602XAC-15.0705XSW+381.9807XAE+128.325XAF+153.1449XEF-44.9978XGH+111.9315XAI-60.6417XIJ-230.015 YZP=0.1248XAB-2.49164XAD+132.5294XAC-17.5076XSW+441.1488XAE+115.7327XAF+155.1616XEF-45.3674XGH+93.80788XAI-49.5059XIJ-240.463 YLYG=28.54462XAB-70.1204XAD+199.5676XAC+62.06334XSW+166.5945XAE+140.1501XAF+187.9794XEF-36.3512XGH+70.25997XAI-72.9132XIJ-177.579 将10个参数的校正值分别代入上述判别函数中,比较函数值的大小,被判个体值最大的即归属于所对应的群体。 公式中XAB~XIJ分别代表AB/CD、AD/CD、......IJ/CD的对应测定数值,应用公式所作的判别分析结果见表2。判别准确率P1为90%~100%,判别准确率P2为84.38%~96.77%,3个地理种群的综合判别率为91.11%。 表2 3个地理种群彩虹明樱蛤判别分析测试结果 以上所述的建立判别方程所使用的计算应用软件为STATISTICA 99’EDITION。由美国StatSoft,Icn.公司提供,公司地址2300 East 14th Street;网址:http://statsoft.com。 下面对该软件应用步骤进行举例说明 1、首先将测定的数据输入MS-Excel中,建立3个群体的xls文件; 2、然后将这11个性状除以CD,建立3个群体除以CD的xls文件; 3、将步骤2的xls文件数据输入(拷贝)到STAT本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种彩虹明樱蛤的种质鉴定方法,其特征在于,其步骤如下, (1)取至少30个待测样品彩虹明樱蛤进行7个形态学参数的测定,分别测定壳长CD、壳顶到前闭壳肌痕最大距离AF、外套痕前后缘长IJ、壳顶到外套痕后缘长AE、壳高AB、壳宽SW和前后闭壳肌痕间距离GH这7个参数;然后以壳长CD参数值作分母、其余6个参数值作分子,获得6个比例参数值X↓[AF]:AF/CD;X↓[IJ]:IJ/CD;X↓[AE]:AE/CL;X↓[AB]:AB/CL;X↓[SW]:SW/CD;X↓[GH]:GH/CD; (2)将X↓[AF]、X↓[IJ]、X↓[AE]、X↓[AB]、X↓[SW]和X↓[GH]6个比例参数值分别代入下列方程中进行结果判定: Y↓[CX]=388.7272X↓[AF]+141.2037X↓[IJ]-69.4791X↓[AE]-45.9566X↓[AB]+183.0137X↓[SW]+112.7836X↓[GH]-216.012 Y↓[ZP]=445.5594X↓[AF]+121.748X↓[IJ]-68.9081X↓[AE]-21.8706X↓[AB]+139.715X↓[SW]+118.5378X↓[GH]-228.234 Y↓[LYG]=182.1849X↓[AF]+100.3651X↓[IJ]+31.72951X↓[AE]-85.5016X↓[AB]+215.011X↓[SW]+146.1427X↓[GH]-162.583 (3)根据所得Y值的最大值出现频率最多的群体即为待测样品彩虹明樱蛤所处的来源。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:董志国王美珍李晓英陈汉春孟学平程汉良阎斌伦
申请(专利权)人:淮海工学院慈溪市水产技术推广中心
类型:发明
国别省市:32[中国|江苏]

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