【技术实现步骤摘要】
一种羊A型产气荚膜梭菌菌株及其灭活疫苗和疫苗制备方法
本专利技术属于生物医药领域中的疫苗及其制备方法，特别是涉及一种羊A型产气荚膜梭菌菌株及其灭活疫苗和疫苗制备方法。
技术介绍
产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens)，又称魏氏梭菌，是一种存在于人和动物肠道中的条件致病菌。目前已发现产气荚膜梭菌至少可以产生16种毒力因子，包括12种毒素(α-v)和多种侵袭性酶类，基中α、β、ε、ι毒素是产气荚膜梭菌最重要的致死性毒素，其余的毒素为次要致死性和非致死性毒素。而α毒素是最为主要的一种毒素，虽各个菌型的产气荚膜梭菌都能产生，但以A型产气荚膜梭菌产生的α毒素量最多，不同菌型的产气荚膜梭菌可以引起不同的疾病。根据该菌分泌四种主要致死性外毒素的基因型不同，分为A、B、C、D、E型。当饲养和环境条件改变时，易引起畜禽的产气荚膜梭菌病。尤其对于牧区，轮牧式放养，春夏、秋冬季，因放牧草场的突变，猝死羊明显增多。且发病死亡羊大都是青壮年，营养比较好。临床症状表现为：羊只在放牧途中或正在吃草时即突然倒地，挣扎几下就死亡...
【技术保护点】
1.一种产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)菌株A/2018/NM/01，其保藏号为：CGMCC No.16894，保藏日期为：2018年11月27日，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC。/n
【技术特征摘要】
1.一种产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens)菌株A/2018/NM/01，其保藏号为：CGMCCNo.16894，保藏日期为：2018年11月27日，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC。
2.根据权利要求1所述的菌株A/2018/NM/01，其特征在于，所述菌株的筛选方法包括：
S1：将猝死羊病料接种于10％绵羊脱纤血平板，将所述血平板置厌氧菌培养盒，于37℃过夜培养；
S2：从所述血平板挑选独立、菌落边缘整齐、稍隆起、双溶血环明显、直径大小不同的3-5个菌落接种于新鲜的10％绵羊脱纤血平板，37℃温箱培养18-24小时；
S3：从S2中每个血平板同样挑选独立、菌落边缘整齐、稍隆起、双溶血环明显、直径大小不同的3-5个菌落接种于厌气肉肝汤，37℃温箱培养18-24小时；
S4：将S3所得培养物离心(4℃、3000rpm离心20min)、取上清液过滤(选用孔径为0.45μm的滤膜)，检测上清液毒素最小致死量，筛选出毒素含量最高的菌株即为菌株A/2018/NM/01。
3.根据权利要求1或2所述的菌株A/2018/NM/01，其特征在于，所述菌株的涂片镜检形态特征为：常散在，粗大革兰氏阳性杆菌；
溶血特性为：双溶血环，内层完全溶血，外层不完全溶血；
培养特性为：牛乳暴裂发酵：接种石蕊牛奶培养基6-12小时，出现颜色变浅、乳酪样物质；
PCR型特异性鉴定和血清中和法鉴定为A型产气荚膜梭菌。
4.一种由权利要求1-3中任一项所述的菌株A/2018/NM/01制备得到的羊A型产气荚膜梭菌灭活疫苗。
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【专利技术属性】
技术研发人员：韩四娥，张志丹，刘国英，魏学峰，范秀丽，郝鹏，黄海碧，徐丽媛，韩志玲，史文瑞，杨富贵，金鹰，
申请(专利权)人：内蒙古金宇保灵生物技术研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：内蒙古;15
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