一种动物去细胞化肺生物支架材料的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种动物去细胞化肺生物支架材料的制备方法，属于组织工程和再生医学领域。传统的去细胞化肺生物支架材料，是通过灌注去垢剂来去除细胞的，去垢剂在去除细胞的同时，会有损细胞外基质(ECM)，进而影响支架结构。本发明专利技术的方法创造性地提出了使用右旋糖溶液等ECM保护剂灌注气管，减少去垢剂对ECM的破坏，由此更容易平衡ECM保留与细胞成分去除两者之间的矛盾，得到细胞去除更彻底、ECM更完好的支架材料。

【技术实现步骤摘要】
一种动物去细胞化肺生物支架材料的制备方法
本专利技术属于组织工程和再生医学领域。
技术介绍
由慢性阻塞性肺炎、肺间质纤维化等疾病引发的肺功能衰竭已经成为困扰医学界的一大难题。迄今为止，肺移植是临床上唯一有效的根治方法，但其开展受到供体肺短缺、供体肺转运中储存困难、手术过程繁复等因素的制约。作为原位器官移植的潜在替代治疗手段，组织工程器官技术具有来源多样、治疗方式简便等优点，正在逐渐受到重视。多项研究表明，生物支架对支持细胞的分布、分化、再生、维持功能起到关键作用，是组织工程和再生医学领域研究的核心之一。其中，细胞外基质(ECM)无疑是一种优秀的天然生物支架材料。其具有与原组织相同的基质成分(如胶原、纤连蛋白、弹力蛋白等)和三维立体微结构，同时含有丰富的细胞因子和生长因子，与人工合成材料相比具有明显优势。在众多细胞外基质制备方法中，全器官灌注去细胞化无疑是最具潜力的一种。其原理是通过肺脏天然的脉管和气管结构，在保持器官完整性的情况下，灌注去垢剂、核酸酶、酸、碱、盐或螯合剂等试剂脱细胞，获得完整的细胞外支架网络。去垢剂是高效脱除细胞必不可少本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种动物去细胞化肺生物支架材料的制备方法，其特征在于，包括：取肺脏，从气管灌注ECM保护剂后，再通过肺内血管灌注去垢剂，除去细胞成分；/n所述ECM保护剂为渗透压10～160mOsm/L的右旋糖溶液、右旋糖酐溶液、蔗糖溶液、含葡萄糖的生理盐水或羟乙基淀粉溶液。/n

【技术特征摘要】
1.一种动物去细胞化肺生物支架材料的制备方法，其特征在于，包括：取肺脏，从气管灌注ECM保护剂后，再通过肺内血管灌注去垢剂，除去细胞成分；
所述ECM保护剂为渗透压10～160mOsm/L的右旋糖溶液、右旋糖酐溶液、蔗糖溶液、含葡萄糖的生理盐水或羟乙基淀粉溶液。


2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述ECM保护剂为10mOsm/L的右旋糖溶液。


3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述肺脏为大型动物的肺脏；优选的，所述大型动物为犬、猪、羊或灵长类动物；进一步优选的，所述大型动物为猪。


4.如权利要求1～3任一所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)从气管灌注ECM保护剂；
2)从肺动脉或静脉灌注离子型去垢剂水溶液；
3)洗涤去除残留离子型去垢剂。


5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：
步骤2)中的离子型去垢剂水溶液是0.25％～1.5％v/v的SLES，优选的，SLES浓度为1％v/v；
和/或，灌注时间为12～36h，优选的，灌注时间为24h。

【专利技术属性】
技术研发人员：李奕，李为民，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：四川;51