响应面法提取独一味中黄酮类化合物的方法技术

本发明专利技术提供了一种响应面法提取独一味中黄酮类化合物的方法，包括：A)将独一味粉碎，过筛，得到药材粉末；B)将药材粉末按照固液比1:10～1:50g/mL加入10～90％乙醇溶液浸泡2～8h、超声提取10～30min，过滤，得到黄酮类化合物提取液；所述浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比的超声提取条件采用响应面法优化。本发明专利技术通过单因素和响应面法实验优化超声法提取独一味中黄酮的提取工艺，从而得到最佳的提取条件。是解决传统方法提取独一味中总黄酮提取率低的问题,为独一味中黄酮的大规模生产以及植物中黄酮类化合物的开发提供了理论依据。

【技术实现步骤摘要】
响应面法提取独一味中黄酮类化合物的方法
本专利技术涉及天然产物的提取
，尤其是涉及响应面法提取独一味中黄酮类化合物的方法。
技术介绍
独一味(Lamiophlomisrotata(Benth.)Kudo)是来自青藏高原的一种特有的植物。它广泛分布在西藏、青海、甘肃和四川等地。它的地上部分表现出广泛的药理活性，例如：治疗跌打损伤、外伤出血、黄水病、风湿痹痛、活血化瘀以及祛风止痛等。独一味中主要存在两大类成分：环烯醚萜苷类和黄酮类。人们对于环烯醚萜苷的研究较多，而对黄酮的关注较少。但是黄酮的药理活性很重要，例如：抗氧化、抗抑郁、抗糖尿病、抗炎、抗肿瘤和神经保护等作用。因此，独一味中黄酮的提取至关重要。黄酮类化合物的常规提取方法包括浸渍法、回流提取法以及索氏提取法等，主要存在以下问题：消耗大量有机溶剂、费时且提取率低。与之相比，超声提取是近年来发展起来的，它不仅可以保留组分的结构及其分子特性，还可以减少溶剂和能源消耗，节省时间并简化操作。传统的优化方法正交实验提取独一味中的总黄酮，提取率较低，无法清晰找到响应值与自变量之间的函数表达式。开发一种方法，解决传统方法提取独一味中总黄酮提取率低的问题是必要的。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种响应面法提取独一味中黄酮类化合物的方法，本专利技术提供的方法提取率高，纯度高。本专利技术提供了一种响应面法提取独一味中总黄酮的方法，包括：A)将独一味粉碎，过筛，得到药材粉末；B)将药材粉末按照固液比1:10～1:50g/mL加入10～90％乙醇溶液浸泡2～8h、超声提取10～30min，过滤，得到黄酮类化合物提取液；所述浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比的超声提取条件采用响应面法优化，具体为：i)单因素考察：采用超声提取技术进行独一味中总黄酮的提取，按照浸泡时间、乙醇体积分数、固液比、提取时间以及超声功率分别设计单因素实验；ii)所述在单因素实验的基础上，采用统计软件DesignExpert11，以独一味中黄酮类化合物提取率为响应值，选择对黄酮提取率影响较大的浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比为响应因素，应用中心复合设计实验设计原理，设计三因素五水平的响应面实验；iii)将药材粉末进行超声提取，得到药材在浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比条件下的药材中总黄酮的提取率；应用DesignExpert11，对数据进行多元回归拟合分析，得到独一味中总黄酮的最佳超声提取条件。优选的，步骤A)所述过筛具体为过40目筛。优选的，步骤B)所述提取的次数为1～3次。优选的，所述步骤iii)包括：利用紫外-可见光谱仪测定待测样品溶液和标准样品溶液中的黄酮类化合物含量。优选的，所述步骤iii)包括：应用DesignExpert11，建立实验因素对响应值影响的二次多项式方程模型，并对响应面多元回归模型进行方差分析和显著性检验。优选的，所述步骤iii)最佳超声提取条件具体为：浸泡时间5h；提取溶剂中乙醇体积分数57％；固液比1:57g/mL。优选的，所述步骤iii)最佳超声提取条件具体为：浸泡时间5.04h；提取溶剂中乙醇体积分数56.94％；固液比1:57.44g/mL。优选的，步骤B)所述过滤后还包括旋蒸至浸膏。优选的，所述多元回归分析得到独一味黄酮的提取率的二次多项式方程具体为：Y＝6.59+0.19A-0.30B+0.68C+0.07AB+0.09AC+0.06BC-0.16A2-0.64B2-0.31C2。与现有技术相比，本专利技术提供了一种响应面法提取独一味中总黄酮的方法，包括：A)将独一味粉碎，过筛，得到药材粉末；B)将药材粉末按照固液比1:10～1:50g/mL加入10～90％乙醇溶液浸泡2～8h、超声提取10～30min，过滤，得到黄酮类化合物提取液；所述浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比的超声提取条件采用响应面法优化，具体为：i)单因素考察：采用超声提取技术进行独一味中总黄酮化合物的提取，按照浸泡时间、乙醇体积分数、固液比、提取时间以及超声功率分别设计单因素实验；ii)所述在单因素实验的基础上，采用统计软件DesignExpert11，以独一味中黄酮类化合物提取率为响应值，选择对黄酮提取率影响较大的浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比为响应因素，应用中心复合设计实验设计原理，设计三因素五水平的响应面实验；iii)将药材粉末进行超声提取，得到药材在浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比条件下的药材中总黄酮的提取率；应用DesignExpert11，对数据进行多元回归拟合分析，得到独一味中总黄酮的最佳超声提取条件。本专利技术通过单因素和响应面法实验优化超声法提取独一味中总黄酮的提取工艺，从而得到最佳的提取条件。是解决传统方法提取独一味中总黄酮提取率低的问题，为独一味中黄酮的大规模生产以及植物中黄酮类化合物的开发提供了理论依据。附图说明图1是芦丁的标准曲线示意图；图2是浸泡时间对独一味总黄酮提取率的影响示意图；图3是乙醇体积分数对独一味总黄酮提取率的影响示意图；图4是固液比对独一味总黄酮提取率的影响示意图；图5是超声功率对独一味总黄酮提取率的影响示意图；图6是提取时间对独一味总黄酮提取率的影响示意图；图7是浸泡时间和乙醇体积分数交互影响独一味黄酮提取率的响应面图；图8是浸泡时间和固液比交互影响独一味黄酮提取率的响应面图；图9是乙醇体积分数和固液比交互影响独一味黄酮提取率的响应面图。具体实施方式本专利技术提供了响应面法提取独一味中总黄酮的方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都属于本专利技术保护的范围。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。本专利技术提供了一种响应面法提取独一味中总黄酮的方法，包括：A)将独一味粉碎，过筛，得到药材粉末；B)将药材粉末按照固液比1:10～1:50g/mL加入10～90％乙醇溶液浸泡2～8h、超声提取10～30min，过滤，得到总黄酮提取液；所述浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比的超声提取条件采用响应面法优化，具体为：i)单因素考察：采用超声提取技术进行独一味中总黄酮化合物的提取，按照浸泡时间、乙醇体积分数、固液比、提取时间以及超声功率分别设计单因素实验；ii)所述在单因素实验的基础上，采用统计软件DesignExpert11，以独一味中黄酮类化合物提取率为响应值，选择对黄酮提取率影响较大的浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比为响应因素，应用中心复合设计实验设计原理，设计三因素五水平的响应面实验；iii)将药材粉末进行超声提取，得到药材在浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比条件下的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种响应面法提取独一味中总黄酮的方法，其特征在于，包括：/nA)将独一味粉碎，过筛，得到药材粉末；/nB)将药材粉末按照固液比1:10～1:50g/mL加入10～90％乙醇溶液浸泡2～8h、超声提取10～30min，过滤，得到总黄酮提取液；/n所述浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比的超声提取条件采用响应面法优化，具体为：/ni)单因素考察：采用超声提取技术进行独一味中总黄酮化合物的提取，按照浸泡时间、乙醇体积分数、固液比、提取时间以及超声功率分别设计单因素实验；/nii)所述在单因素实验的基础上，采用统计软件Design Expert 11，以独一味中黄酮类化合物提取率为响应值，选择对黄酮提取率影响较大的浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比为响应因素，应用中心复合设计实验设计原理，设计三因素五水平的响应面实验；/niii)将药材粉末进行超声提取，得到药材在浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比条件下的药材中黄酮类化合物的提取率；应用Design Expert 11，对数据进行多元回归拟合分析，得到独一味中黄酮类化合物的最佳超声提取条件。/n

【技术特征摘要】
1.一种响应面法提取独一味中总黄酮的方法，其特征在于，包括：
A)将独一味粉碎，过筛，得到药材粉末；
B)将药材粉末按照固液比1:10～1:50g/mL加入10～90％乙醇溶液浸泡2～8h、超声提取10～30min，过滤，得到总黄酮提取液；
所述浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比的超声提取条件采用响应面法优化，具体为：
i)单因素考察：采用超声提取技术进行独一味中总黄酮化合物的提取，按照浸泡时间、乙醇体积分数、固液比、提取时间以及超声功率分别设计单因素实验；
ii)所述在单因素实验的基础上，采用统计软件DesignExpert11，以独一味中黄酮类化合物提取率为响应值，选择对黄酮提取率影响较大的浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比为响应因素，应用中心复合设计实验设计原理，设计三因素五水平的响应面实验；
iii)将药材粉末进行超声提取，得到药材在浸泡时间、乙醇体积分数以及固液比条件下的药材中黄酮类化合物的提取率；应用DesignExpert11，对数据进行多元回归拟合分析，得到独一味中黄酮类化合物的最佳超声提取条件。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤A)所述过筛具体为过40目筛。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B)所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔勐，孙丽影，杜杨，赵凤娇，
申请(专利权)人：中国科学院长春应用化学研究所，
类型：发明
国别省市：吉林;22