一种抗鸡心包积液综合征饲料添加剂制备方法及应用技术

一种抗鸡心包积液综合征饲料添加剂制备方法及其应用，本发明专利技术涉及一种饲料添加剂制备方法及应用。本发明专利技术解决了目前采用疫苗预防鸡心包积液综合征的方法成本高、效果差的问题。制备方法：一、制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液；二、制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体冻干粉；三、卵黄冻干粉与黄芪多糖、当归多糖、枸杞多糖混合得到饲料添加剂。本发明专利技术饲料添加剂在抗鸡心包积液综合征的应用。本发明专利技术方法简单，成本低，在抗鸡心包积液综合征的应用中，因鸡心包积液综合征病鸡的死亡率降低到8％以下，效果好。

【技术实现步骤摘要】
一种抗鸡心包积液综合征饲料添加剂制备方法及应用
本专利技术涉及一种饲料添加剂制备方法及应用。
技术介绍
鸡心包积液综合征主要是由4型禽腺病毒感染引起一种以心包内出现淡黄色液体为主要临床症状的鸡急性传染病，也常见包涵体肝炎症状，病鸡通常表现精神沉郁，死亡率可达90％。自2015年以来开始在中国的河南、河北、辽宁、吉林、新疆、安徽、山东、江西、湖北和江苏等省份迅速传播，2016年以来，黑龙江省内不同地区出现爆发的现象，给养鸡业造成了严重的经济损失。目前4型禽腺病毒引起的鸡心包积液综合征主要通过接种疫苗的方式预防，但国内尚未见自主研发的商品化疫苗，一般使用国外的疫苗，成本较高，在国内的应用效果却一般。另外，疫苗主要在于预防该病，在发病之后紧急接种，很难控制发病。
技术实现思路
本专利技术为了解决目前采用疫苗预防鸡心包积液综合征的方法成本高、效果差的问题，而提供了一种抗鸡心包积液综合征饲料添加剂制备方法及应用。本专利技术抗鸡心包积液综合征饲料添加剂制备方法按照以下步骤进行：一、制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液：含有鸡心包积液综合征抗体的蛋黄液、浓度为1.5％～2％氯化钠水溶液和浓度为10％～11％的PEG6000溶液按体积比为1：1：1的比例搅拌混合，然后用60目筛子过滤后置于温度为3～5℃的条件下静置11～13h，然后离心去沉淀得到上清液，上清液过滤、除菌，即得到鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液；二、制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体冻干粉：步骤一中的鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液与甲醛、硫柳汞、维生素C、聚乙烯比咯烷酮、甘氨酸、山梨醇、葡萄糖按照重量份数比为95～97:0.2～0.4:0.01～0.03:0.05～0.15:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2的比例混合得到混合液，混合液经过冷冻干燥后得到含有鸡心包积液综合征抗体的卵黄冻干粉；三、步骤二中得到的卵黄冻干粉与黄芪多糖、当归多糖、枸杞多糖按照重量份数比为3～5：25～28：8～12：8～12的比例混合即得到抗鸡心包积液综合征饲料添加剂。上述饲料添加剂在抗鸡心包积液综合征上的应用。具体的应用方法：上述抗鸡心包积液综合征饲料添加剂按照质量比为3～10：100的比例添加到鸡饲料中进行饲喂。本专利技术在制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液时，采用PEG6000作为主要提取试剂，PEG6000无毒、无刺激性，具有良好的水溶性，不需要使用任何有污染试剂或材料，本专利技术的方法安全环保；另外，卵黄抗体溶液在3～5℃条件下进行反应，经过一步离心取上清过滤即可，制备方法简便，易于规模化生产。本专利技术制备过程中的添加剂—多糖具有提高免疫力，增强机体适应性和抵抗能力、抗菌、抗病毒、调节机体代谢的作用，本专利技术中分别添加了黄芪多糖、当归多糖以及枸杞多糖。黄芪多糖是黄芪的主要成分，黄芪，归肺经，益气升阳，固表止汗，利水消肿，脱毒生肌，主治一切气虚血亏之症，主要作用于肾，有利尿作用，可以缓解心包的积水，减轻心包积水对心脏的损伤作用，减弱临床症状，而且黄芪多糖能够促进细胞中DNA合成，提高淋巴细胞的增殖和白细胞诱生干扰素能力的增强，增强抗病毒效果。当归多糖是当归的主要成分，当归，甘、辛、苦、温。归心、肝经，补血活血，强心保肝，有研究表明，当归多糖能够有效修复心肌细胞损伤，对于4型禽腺病毒感染导致的心肌损伤、包涵体肝炎具有缓解作用。枸杞多糖是枸杞的主要有效成分，枸杞，归肾经，养肝补肾，能够有效缓解肾脏排水代谢造成的肾负担，另外，枸杞多糖在抑制脂肪肝方面效果显著。本专利技术鸡心包积液综合征的卵黄抗体冻干粉通过与多重辅料复配，大大延长了卵黄抗体的保存时间，保证了卵黄抗体的稳定性，同时，本专利技术的添加剂加入多糖，有效的避免患病鸡在治疗过程中的应激损伤，减少死亡率，本专利技术的饲料添加剂制备方法简单，成本低，用本专利技术添加剂进行饲喂，患因鸡心包积液综合征病鸡的死亡率降低到8％以下，本专利技术饲料添加剂效果好。具体实施方式具体实施方式一：本实施方式抗鸡心包积液综合征饲料添加剂制备方法按照以下步骤进行：一、制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液：含有鸡心包积液综合征抗体的蛋黄液、浓度为1.5％～2％氯化钠水溶液和浓度为10％～11％的PEG6000溶液按体积比为1：1：1的比例搅拌混合，然后用60目筛子过滤后置于3～5℃的条件下静置11～13h，然后离心去沉淀得到上清液，上清液过滤、除菌，即得到鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液；二、制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体冻干粉：向步骤一中的鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液与甲醛、硫柳汞、维生素C、聚乙烯比咯烷酮、甘氨酸、山梨醇、葡萄糖按照重量份数比为95～97:0.2～0.4:0.01～0.03:0.05～0.15:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2的比例混合得到混合液，混合液经过冷冻干燥后得到含有鸡心包积液综合征抗体的卵黄冻干粉；三、步骤二中得到的卵黄冻干粉与黄芪多糖、当归多糖、枸杞多糖按照重量份数比为3～5：25～28：8～12：8～12的比例混合即得到抗鸡心包积液综合征饲料添加剂。本实施方式步骤一中含有鸡心包积液综合征抗体的蛋黄液的制备方法按照以下步骤进行：1、病毒增殖利用保存于黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院兽药研究室的4型禽腺病毒种毒接种9日龄SPF鸡胚卵黄囊，37℃培养72～96h。4型禽腺病毒种毒记载于2019年发表在动物医学进展杂志上，作者是朱庆贺等，文献名称是《黑龙江省1群4型禽腺病毒分离鉴定及致病性试验》；2、病毒的收集24h死亡鸡胚弃去，收集72～96h死亡鸡胚尿囊液，于-20℃反复冻融两次，10000r/min4℃10min后收集上清液，即病毒原液；对上清病毒液进行效价测定，即为疫苗病毒液；3、病毒含量测定将疫苗病毒液用生理盐水做10倍稀释，10-4、10-5、10-6、10-7、10-8，5个稀释度接种spf鸡胚，每个鸡胚每个稀释度重复4次，同时设生理盐水对照孔。37℃培养7天，观察鸡胚存活情况，计算LED50，每0.1ml病毒含量，10-4.33/0.1mLELID50以上，方可用于制备疫苗；4、病毒灭活疫苗病毒液中加入终浓度0.3％的甲醛溶液37℃灭活24h，即为疫苗抗原；5、疫苗制备油相制备：按照重量份数取优质注射用96份的白油，4份的司本-80。先将白油缓缓加温，加入4％的司班-80，边搅拌边加温，直到充分溶解至透明，高压灭菌备用；水相制备：按照重量份数取96份疫苗抗原加入灭菌后的4份吐温-80中，开始搅拌使吐温80完全溶解为止，制成水相。利用IKA乳化机乳化油相与水相6min，即得灭活疫苗(4型禽腺病毒)。6、蛋鸡免疫基础免疫：开产前2～3周健康产蛋鸡，颈部皮下注射4型禽腺病毒灭活疫苗(简称免疫原)，1.0mL/只。加强免疫：在基础免疫后14日进行第2次接种，颈部皮下注射免疫原，1.0mL本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗鸡心包积液综合征饲料添加剂制备方法，其特征在于抗鸡心包积液综合征饲料添加剂制备方法按照以下步骤进行：/n一、制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液：含有鸡心包积液综合征抗体的蛋黄液、浓度为1.5％～2％氯化钠水溶液和浓度为10％～11％的PEG6000溶液按体积比为1：1：1的比例搅拌混合，然后用60目筛子过滤后置于3～5℃的条件下静置11～13h，然后离心去沉淀得到上清液，上清液过滤、除菌，即得到鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液；/n二、制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体冻干粉：向步骤一中的鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液与甲醛、硫柳汞、维生素C、聚乙烯比咯烷酮、甘氨酸、山梨醇、葡萄糖按照重量份数比为95～97:0.2～0.4:0.01～0.03:0.05～0.15:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2的比例混合得到混合液，混合液经过冷冻干燥后得到含有鸡心包积液综合征抗体的卵黄冻干粉；/n三、步骤二中得到的卵黄冻干粉与黄芪多糖、当归多糖、枸杞多糖按照重量份数比为3～5：25～28：8～12：8～12的比例混合即得到抗鸡心包积液综合征饲料添加剂。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗鸡心包积液综合征饲料添加剂制备方法，其特征在于抗鸡心包积液综合征饲料添加剂制备方法按照以下步骤进行：
一、制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液：含有鸡心包积液综合征抗体的蛋黄液、浓度为1.5％～2％氯化钠水溶液和浓度为10％～11％的PEG6000溶液按体积比为1：1：1的比例搅拌混合，然后用60目筛子过滤后置于3～5℃的条件下静置11～13h，然后离心去沉淀得到上清液，上清液过滤、除菌，即得到鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液；
二、制备鸡心包积液综合征的卵黄抗体冻干粉：向步骤一中的鸡心包积液综合征的卵黄抗体溶液与甲醛、硫柳汞、维生素C、聚乙烯比咯烷酮、甘氨酸、山梨醇、葡萄糖按照重量份数比为95～97:0.2～0.4:0.01～0.03:0.05～0.15:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2的比例混合得到混合液，混合液经过冷冻干燥后得到含有鸡心包积液综合征抗体的卵黄冻干粉；
三、步骤二中得...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱庆贺，苗艳，杨旭东，王观悦，王爽，陈曦，刘雪松，兰世捷，张鹏宇，田秋丰，张备，张红，刘秋瑾，秦平伟，姚瑞，武晓东，邱景会，江波涛，史同瑞，高佳滨，宋国希，姚橹，李白，
申请(专利权)人：黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23