卡达巴木碱在制备抑制脑啡肽酶活性治疗疼痛产品中的用途制造技术

本发明专利技术提供了一种刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱在制备抑制脑啡肽酶活性治疗疼痛产品中的用途和制备方法。经体外试验证实，卡达巴木碱对脑啡肽酶活性有明显的的抑制作用，经醋酸扭体法小鼠模型、热板法小鼠模型和福尔马林大鼠模型试验证实，卡达巴木碱对醋酸和热板引起的小鼠疼痛和福尔马林引起的大鼠疼痛有止痛作用。卡达巴木碱是脑啡肽酶抑制剂，可用于制备抑制脑啡肽酶活性治疗疼痛产品。

【技术实现步骤摘要】
卡达巴木碱在制备抑制脑啡肽酶活性治疗疼痛产品中的用途
本专利技术属于医药领域，涉及一种刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱在制备抑制脑啡肽酶活性治疗疼痛产品中的用途和制备方法。
技术介绍
疼痛是组织损伤或潜在组织损伤所引起的不愉快感觉和情感体验，可分为生理性疼痛和病理性疼痛。剧烈疼痛不仅给患者带来痛苦和紧张不安的情绪反应，而且可引起机体生理功能紊乱，甚至诱发休克。现今临床上使用的治疗疼痛药物常伴有毒副作用，如阿片类止痛药长期使用则可能导致成瘾、躯体依赖性与耐受性等，非甾体类抗炎药可引起胃肠道和肝功能损坏等不良反应，对患者的身心造成一定的伤害，不利于临床上疾病的治疗。因此，临床上迫切需求不良反应小、无耐受性、无成瘾性的治疗疼痛药物。脑啡肽（Enkephalin）包括甲硫氨酸（蛋氨酸）脑啡肽和亮氨酸脑啡肽，广泛存在于神经系统中，内源性脑啡肽通过与其受体结合降低神经细胞内环磷酸腺苷水平和钙传导而抑制神经传递，从而构成内源性痛觉调制系统发挥镇痛作用。脑啡肽酶（Enkephalinase或Neprilysin）是一种含锌的金属肽酶，位于细胞表面的Ⅱ型膜蛋白，特异性地切割蛋白质或多肽的疏水氨基酸残基间的肽键，特别是P1'位为苯丙氨酸或酪氨酸的底物，如脑啡肽，导致脑啡肽失活。研究提示，脑啡肽酶是治疗疼痛的靶点，抑制脑啡肽酶活性的化合物可用于治疗疼痛。为筛选脑啡肽酶抑制剂，本案专利技术人构建了体外和体内活性评价体系，从毒副作用小的天然产物中寻找脑啡肽酶抑制剂，发现了高活性化合物刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱，是由下述式表示的化合物，。刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱，是由上述式表示的化合物，英文名称cadabicine，主要存在于刺山柑（CapparisspinosaL.）、卡达巴木（CadabafarinosaForssk.）和CapparisdeciduaForssk.等植物中。但未见刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱生物活性的研究报道，更未见刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱抑制脑啡肽酶活性和治疗疼痛作用的研究报道。
技术实现思路
本案专利技术人以组分结构理论为指导，从宏观到微观解析，微观到宏观表征刺山柑根止痛作用有效部位组分结构，以脑啡肽酶为靶点寻找活性化合物。采用脑啡肽酶抑制活性指标指导下的导向分离模式研究刺山柑止痛活性成分，从有效部位中分离鉴定了一种刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱，发现刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱对脑啡肽酶活性有显著地抑制作用，因而完成了本专利技术。本专利技术目的是提供一种刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱在制备抑制脑啡肽酶活性治疗疼痛产品中的应用。一种刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱是如下结构式的化合物：。刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱抑制脑啡肽酶活性，可在制备脑啡肽酶抑制剂中应用，通过抑制脑啡肽酶活性止痛，可在制备抑制脑啡肽酶活性治疗疼痛产品中应用。本专利技术采用体外酶抑制活性评价体系评价刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱对脑啡肽酶的抑制作用，刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱能剂量依赖地抑制脑啡肽酶活性，刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱对脑啡肽酶活性的半数抑制浓度IC50为3.66μM，脑啡肽酶抑制剂沙库巴曲（sacubitril）对脑啡肽酶活性的半数抑制浓度IC50为1.70μM。醋酸扭体法小鼠模型和热板法小鼠模型是常用的镇痛药筛选模型，操作简便、便于观察、效果明显，其优点是刺激部位和刺激性质的特异性较强。舔后足反射和扭体反射是小鼠受到伤害性刺激时发生的一种反应，表现为受到热的刺激造成疼痛，小鼠会表现舔后足的反应。腹腔受到醋酸的刺激造成疼痛，小鼠会表现收缩腹部，伸展后肢，抬高臀部等扭体反应，此类反射的初级中枢位于脊髓，反射弧较简单，刺激与反应之间的对应性好，采用醋酸扭体法小鼠模型研究刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱止痛作用，结果表明，刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg剂量组对醋酸所致小鼠疼痛反应均有明显抑制作用，其中100mg/kg剂量组作用强于阿司匹林100mg/kg剂量组，所给药剂量范围内有明显量效关系；采用热板法小鼠模型研究刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱止痛作用，结果表明，刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg剂量组对热所致小鼠疼痛反应均有明显抑制作用，其中100mg/kg剂量组作用强于吗啡5mg/kg剂量组，所给药剂量范围内有明显量效关系。福尔马林大鼠模型是一个较好的慢性疼痛模型，当皮下注射福尔马林立即引致C纤维自发活动剧增，经快速的单突出递质传递到脊髓投射神经元，并继以第二相传入爆发，反映为广动力背角神经元激活，引发疼痛。此外持续的C纤维刺激使广动力细胞对C纤维传入表现出过强的放电，诱发中枢神经痛觉易化状态。其疼痛特点是疼痛分两个时相，第一时相是由于直接刺激外周神经末稍所致，第二时相则主要为炎症介质的产生释放引起，采用福尔马林大鼠模型研究刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱止痛作用，结果表明，刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg剂量组剂量组对福尔马林所致大鼠疼痛反应的第一时相和第二时相均有明显抑制作用。本专利技术另一目的是提供一种刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱的制备方法，其特征在于包括以下步骤：刺山柑根粉碎成粗粉，加70%乙醇回流提取三次，每次用量为以公斤计刺山柑根重量的8倍以升计体积量，每次2小时，滤过，滤液合并，减压回收乙醇得提取物，避光条件下提取物加甲醇使溶解，用量为以公斤计刺山柑根重量的0.2倍以升计体积量，经中性氧化铝柱色谱，填充中性氧化铝体积为以公斤计山柑根重量的0.5倍以升计体积量，用甲醇洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，减压浓缩，干燥得刺山柑总亚精胺生物碱部位，避光条件下刺山柑总亚精胺生物碱部位经制备高效液相色谱分离，色谱柱：耐碱性十八烷基键合硅胶，流动相为25%体积甲醇、74.9%体积水和0.1%体积二乙胺，同步采用紫外检测器280nm波长处监视流出曲线以指导产品收集，避光条件下收集液经减压浓缩，干燥后得刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱，是由下述式表示的化合物，。本专利技术的刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱在制备抑制脑啡肽酶活性治疗疼痛产品的用途优点为作用机制明确，刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱从刺山柑植物根中分离，毒副作用小。本专利技术的刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱的制备方法工艺简单，操作方便，技术易掌握，能耗小，溶剂可回收循环使用，生产成本低。本专利技术还提供用本专利技术所述的刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱以及药学上可接受的载体或赋形剂制备的药物制剂。这些药物制剂选自以下剂型：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、泡腾片剂、舌下片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、微球剂、颗粒剂、丸剂、滴丸剂、散剂、膏剂、口服液、混悬剂、溶液剂、气雾剂、注射剂，注射乳剂、冻干粉针，还可以根据需要制备成缓释或控释制剂。本专利技术的含有所述刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱的药物制剂，在制备药物制剂时可加入药物可接受的载体，所述药物可接受的载体来自：抗氧剂、鏊合剂、表面活性剂、填充剂、崩解本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱在制备抑制脑啡肽酶活性治疗疼痛产品中的用途，其特征在于，所述的刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱是如下结构式的化合物：

【技术特征摘要】
1.一种刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱在制备抑制脑啡肽酶活性治疗疼痛产品中的用途，其特征在于，所述的刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱是如下结构式的化合物：。


2.一种刺山柑亚精胺生物碱卡达巴木碱的制备方法，其特征在于包括以下步骤：刺山柑根粉碎成粗粉，加70%乙醇回流提取三次，每次用量为以公斤计刺山柑根重量的8倍以升计体积量，每次2小时，滤过，滤液合并，减压回收乙醇得提取物，避光条件下提取物加甲醇使溶解，用量为以公斤计刺山柑根重量的0.2倍以升计体积量，经中性氧化铝柱色谱，填充中性氧化铝体积为以公斤计山柑根重量...

【专利技术属性】
技术研发人员：王威，孙世伟，刘小红，刘洋，王炜，秦国庆，师海波，
申请(专利权)人：青岛大学，
类型：发明
国别省市：山东;37