用于细胞毒性T细胞耗竭的组合物制造技术

提供了新型组合物。用于细胞毒性T细胞耗竭的组合物，所述组合物包含具有以下(i)至(iii)中描述的特性的抗LAG‑3抗体或其结合片段：(i)具有体外ADCC活性；(ii)以低岩藻糖形式减少体内LAG‑3阳性细胞的数量；和(iii)结合人活化的T细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于细胞毒性T细胞耗竭的组合物
本专利技术涉及，例如，包含抗体、其结合片段等的用于细胞毒性T细胞耗竭的组合物，所述抗体、其结合片段等用于细胞毒性T细胞耗竭的用途，和用于耗竭细胞毒性T细胞的方法，其包括施用所述抗体、其结合片段等的步骤。
技术介绍
T淋巴细胞(T细胞)是在免疫应答中发挥关键作用的细胞，且因此在体内存在具有各种抗原特异性的T细胞(其据说数量为1000万至十亿个克隆)，以便处理各种抗原。当抗原侵入机体时，此类巨大T细胞库中，只有非常有限数量的抗原特异性克隆被增殖并活化，以起作用以通过细胞因子产生和细胞毒性活性等来防护机体。在自身免疫性疾病中，各种病理状况被认为通过对一些自身抗原的异常免疫应答触发。甚至在此类情况下，大多数不具有这种抗原特异性的克隆也不被增殖和活化，且反而保持静息状态。因此，仅活化的T细胞的选择性除去可以特异性抑制免疫，而不影响大多数具有其他抗原特异性的T细胞，且因此可以是针对自身免疫性疾病、移植物排斥、过敏性疾病等的有用的治疗或预防方法。同时，在其中主要活化负性调节免疫系统的T细胞(诸如调节性T细胞)的情况下，此类细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于细胞毒性T细胞耗竭的组合物，其包含具有以下(i)至(iii)中描述的特性的抗LAG-3抗体或其结合片段：/n(i)具有体外ADCC活性；/n(ii)以低岩藻糖形式减少体内LAG-3阳性细胞的数量；和/n(iii)结合活化的人T细胞。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171005 JP 2017-1949451.用于细胞毒性T细胞耗竭的组合物，其包含具有以下(i)至(iii)中描述的特性的抗LAG-3抗体或其结合片段：
(i)具有体外ADCC活性；
(ii)以低岩藻糖形式减少体内LAG-3阳性细胞的数量；和
(iii)结合活化的人T细胞。


2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述细胞毒性T细胞选自：穿孔素阳性T细胞，颗粒酶B阳性T细胞，CD28阴性和CD4阳性T细胞，CD28阴性和CD8阳性T细胞，CD57阳性和CD4阳性T细胞，以及CD57阳性和CD8阳性T细胞。


3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中所述细胞毒性T细胞是LAG-3阳性的。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述抗LAG-3抗体或其结合片段结合人LAG-3的结构域3，并且具有以下(i)至(iii)中描述的特性：
(i)以低岩藻糖形式体内抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎；
(ii)在所述抗体或其结合片段存在的情况下，允许人LAG-3结合人主要组织相容性复合物II类分子；和
(iii)在所述抗体或其结合片段存在的情况下，允许人LAG-3发挥人T细胞抑制功能。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其用于治疗或预防与细胞毒性T细胞相关的免疫抑制剂抗性疾病。


6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述免疫抑制剂是类固醇。


7.根据权利要求5或6所述的组合物，其中所述免疫抑制剂是钙调神经磷酸酶抑制剂。


8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体或其结合片段。


9.根据权利要求4所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段包含：轻链，其包含：具有由SEQIDNO:50或图65所示的氨基酸序列的CDRL1，具有由SEQIDNO:51或图66所示的氨基酸序列的CDRL2，和具有由SEQIDNO:52或图67所示的氨基酸序列的CDRL3；和重链，其包含：具有由SEQIDNO:47或图62所示的氨基酸序列的CDRH1，具有由SEQIDNO:48或图63所示的氨基酸序列的CDRH2，和具有由SEQIDNO:49或图64所示的氨基酸序列的CDRH3。


10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段是人源化抗体或其结合片段。


11.根据权利要求10所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段包含：重链，其包含：衍生自由SEQIDNO:28或图43所示的氨基酸序列的氨基酸序列，其中对应于位置68的氨基酸是Gly或被Ala取代，且对应于位置103的氨基酸是Asn或被Asp取代；和轻链，其包含：衍生自由SEQIDNO:32或图47所示的氨基酸序列的氨基酸序列，其中对应于位置21的氨基酸是Asp或被Asn取代，对应于位置31的氨基酸是Leu或被Met取代，对应于位置33的氨基酸是Ala或被Ile取代，对应于位置41的氨基酸是Ile或被Met取代，对应于位置58的氨基酸是Gln或被Lys取代，对应于位置63的氨基酸是Ala或被Ser取代，对应于位置80的氨基酸是Ser或被Asp取代，对应于位置85的氨基酸是Ser或被Gly取代，对应于位置87的氨基酸是Ser或被Tyr取代，对应于位置98的氨基酸是Leu或被Val取代，对应于位置103的氨基酸是Phe或被Ala取代，对应于位置105的氨基酸是Thr或被Phe取代，对应于位置124的氨基酸是Val或被Leu取代，且对应于位置126的氨基酸是Ile或被Leu取代。


12.根据权利要求10或11所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段包含：
包含选自SEQIDNO:32、34、36、38和40的氨基酸序列的氨基酸21至氨基酸129的轻链可变区氨基酸序列，和包含选自SEQIDNO:28和30的氨基酸序列的氨基酸20至氨基酸140的重链可变区氨基酸序列。


13.根据权利要求10至12中任一项所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段包含：
包含选自SEQIDNO:32、34、36、38和40的氨基酸序列的氨基酸21至氨基酸234的轻链氨基酸序列，和包含选自SEQIDNO:28和30的氨基酸序列的氨基酸20至氨基酸470的重链氨基酸序列。


14.根据权利要求10至13中任一项所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段选自以下[i]至[x]：
[i]抗体或其结合片段，其包含：具有由SEQIDNO:30(图45)的氨基酸位置20至470组成的氨基酸序列的重链和具有由SEQIDNO:34(图49)的氨基酸位置21至234组成的氨基酸序列的轻链；
[ii]抗体或其结合片段，其包含：具有由SEQIDNO:28(图43)的氨基酸位置20至470组成的氨基酸序列的重链和具有由SEQIDNO:32(图47)的氨基酸位置21至234组成的氨基酸序列的轻链；
[iii]抗体或其结合片段，其包含：具有由SEQIDNO:30(图45)的氨基酸位置20至470组成的氨基酸序列的重链和具有由SEQIDNO:36(图51)的氨基酸位置21至234组成的氨基酸序列的轻链；
[iv]抗体或其结合片段，其包含：具有由SEQIDNO:28(图43)的氨基酸位置20至470组成的氨基酸序列的重链和具有由SEQIDNO:34(图49)的氨基酸位置21至234组成的氨基酸序列的轻链；
[v]抗体或其结合片段，其包含：具有由SEQIDNO:28(图43)的氨基酸位置20至470组成的氨基酸序列的重链和具有由SEQIDNO:36(图51)的氨基酸位置21至234组成的氨基酸序列的轻链；
[vi]抗体或其结合片段，其包含：具有由SEQIDNO:28(图43)的氨基酸位置20至470组成的氨基酸序列的重链和具有由SEQIDNO:38(图53)的氨基酸位置21至234组成的氨基酸序列的轻链；
[vii]抗体或其结合片段，其包含：具有由SEQIDNO:28(图43)的氨基酸位置20至470组成的氨基酸序列的重链和具有由SEQIDNO:40(图55)的氨基酸位置21至234组成的氨基酸序列的轻链；
[viii]抗体或其结合片段，其包含：具有由SEQIDNO:30(图45)的氨基酸位置20至470组成的氨基酸序列的重链和具有由SEQIDNO:32(图47)的氨基酸位置21至234组成的氨基酸序列的轻链；
[ix]抗体或其结合片段，其包含：具有由SEQIDNO:30(图45)的氨基酸位置20至470组成的氨基酸序列的重链和具有由SEQIDNO:38(图53)的氨基酸位置21至234组成的氨基酸序列的轻链；和
[x]抗体或其结合片段，其包含：具有由SEQIDNO:30(图45)的氨基酸位置20至470组成的氨基酸序列的重链和具有由SEQIDNO:40(图55)的氨基酸位置21至234组成的氨基酸序列的轻链。


15.根据权利要求14所述的组合物，其包含抗体或其结合片段，所述抗体或其结合片段包含：轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区和重链可变区包含分别与根据权利要求14所述的抗体或其结合片段的轻链可变区和重链可变区的氨基酸序列具有95%或更高同一性的氨基酸序列。


16.根据权利要求14所述的组合物，其包含抗体或其结合片段，所述抗体或其结合片段包含：由在严格条件下与第一核酸分子杂交的第二核酸分子的核苷酸序列编码的轻链可变区氨基酸序列，所述第一核酸分子具有编码根据权利要求14所述的抗体或其结合片段的轻链可变区的氨基酸序列的核苷酸序列或与其互补的核苷酸序列，以及由在严格条件下与第三核酸分子杂交的第四核酸分子的核苷酸序列编码的重链可变区氨基酸序列，所述第三核酸分子具有编码根据权利要求14所述的抗体或其结合片段的重链可变区的氨基酸序列的核苷酸序列或与其互补的核苷酸序列。


17.根据权利要求14所述的组合物，其包含具有以下(i)或(ii)中描述的特性的抗体或其结合片段：
(i)结合人LAG-3的结构域3上的被根据权利要求14所述的抗体或其结合片段识别的位点；或
(ii)与根据权利要求14所述的抗体或其结合片段竞争结合人LAG-3的结构域3。


18.根据权利要求1至17中任一项所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段呈低岩藻糖形式。


19.根据权利要求1至18中任一项所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段通过用于产生所述抗体或其结合片段的方法获得，所述方法包括以下步骤：培养如下的细胞：含有包含编码其氨基酸序列的核苷酸序列的核酸分子或包含所述核酸分子的载体，或培养产生所述抗体或其结合片段的细胞。


20.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段的存在允许人LAG-3不发挥人T细胞抑制功能。


21.根据权利要求1至3和20中任一项所述的组合物，其中在所述抗体或其结合片段存在的情况下，人LAG-3不结合人主要组织相容性复合物II类分子。


22.根据权利要求20或21所述的组合物，其中所述抗体或其结合片段呈低岩藻糖形式。


23.抗LAG-3抗体或其结合片段，其用于细胞毒性T细胞耗竭，且具有以下(i)至(iii)中描述的特性：
(i)具有体外ADCC活性；
(ii)以低岩藻糖形式减少体内LAG-3阳性细胞的数量；和
(iii)结合活化的人T细胞。


24.具有以下(i)至(iii)中描述的特性的抗LAG-3抗体或其结合片段用于细胞毒性T细胞耗竭的用途：
(i)具有体外ADCC活性；
(ii)以低岩藻糖形式减少体内LAG-3阳性细胞的数量；和
(iii)结合活化的人T细胞。


25.用于耗竭细胞毒性T细胞的方法，其包括施用具有以下(i)至(iii)中描述的特性的抗LAG-3抗体或其结合片段：
(i)具有体外ADCC活性；
(ii)以低岩藻糖形式减少体内LAG-3阳性细胞的数量；和
(iii)结合活化的人T细胞。


26.根据权利要求1至22中任一项所述的组合物，其用于与额外的药物组合使用。


27.用于治疗或预防与穿孔素阳性、颗粒酶B阳性、CD28阴性和CD4阳性、CD28阴性和CD8阳性、CD57阳性和CD4阳性和/或CD57阳性和CD8阳性细胞毒性T细胞相关的疾病的药物组合物，其包含具有以下(i)至(iii)中描述的特性的抗LAG-3抗体或其结合片段：
(i)具有体外ADCC活性；
(ii)以低岩藻糖形式减少体内LAG-3阳性细胞的数量；和
(iii)结合活化的人T细胞。


28.根据权利要求27所述的药物组合物，其中所述治疗或预防包括确定生物样品中含有的细胞毒性T细胞或其细胞膜级分是穿孔素阳性，颗粒酶B阳性...

【专利技术属性】
技术研发人员：六笠隆太，清泽直树，山田真之亮，
申请(专利权)人：第一三共株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP