一种诱导干细胞成软骨分化的药物组合物及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种诱导干细胞成软骨分化的药物组合物及应用，组合物包括葛根素和粉防己碱；药物组合物在制备诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化成软骨细胞的药物或保健品中的应用以及在治疗骨关节炎的药物中的应用。本发明专利技术将葛根素和粉防己碱进行配伍，代替细胞因子或激素，共同诱导BMSCs向软骨分化，克服了由于价格昂贵和安全性问题而无法广泛应用于临床实践的缺陷，而且葛根素和粉防己碱配伍提高干细胞移植的成功率，减少排异反应，降低干细胞向肿瘤分化的风险；本发明专利技术的药物组合物诱导BMSCs分化成软骨细胞的效果显著，具有剂量依赖性，适宜推广应用，为治疗骨关节炎疾病提供了一种新的BMSCs诱导药物来源。

【技术实现步骤摘要】
一种诱导干细胞成软骨分化的药物组合物及其应用
本专利技术属于医药
，具体涉及一种诱导骨髓间充质干细胞向软骨分化的药物组合及其在治疗骨关节炎中的应用。
技术介绍
骨关节炎(osteoarthritis，OA)是一种以关节软骨退行性病变和继发性骨质增生为特征的慢性关节疾病。该病多见于中老年人，女性多于男性；多发于负重较大的膝关节、髋关节、腰骶部脊柱关节及第一蹠趾关节等部位。其病理特点为关节软骨退行性改变，组织结构破坏，软骨下骨硬化，关节边缘和软骨下骨反应性增生，骨赘形成。虽然对骨关节炎的研究已非常深入，但传统疗法仅能够在一定程度上改善骨关节炎症状、延缓病情进展，却不能对其有效根治。骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)是存在于骨髓中的一种非造血功能的干细胞，属于成体干细胞的一种，是由中胚层发育的早期细胞，为骨髓中除造血干细胞以外的另一种干细胞，具有干细胞的共性，具有强大的自我更新能力、多向诱导分化能力，兼具多器官归巢能力及免疫原性低的优势，在组织工程和再生医学领域作为种子细胞具有广阔的应用前景，有望为临床上难以治愈的骨科疾病提供新的治疗策略。BMSCs易于体外分离培养，具有强大的扩增能力，且在体外经多次传代依然可以保持基因稳定性，可满足作为组织工程种子细胞的要求；BMSCs具有多向分化潜能，不仅可以分化为造血基质细胞，还可以分化为造血以外的组织，如向脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞、肌腱细胞、内皮细胞、心肌细胞、肝及肺上皮细胞等中胚层细胞分化，向神经元细胞等外胚层细胞分化。近年来兴起的间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)移植疗法，为骨关节炎的治疗带来新的希望。MSCs具有较强的自我更新能力、增殖能力和多向分化潜能，在特定条件下可分化为软骨细胞。移植MSCs到患病关节，可通过多向分化潜能分化为受损的细胞类型，重建软骨组织。中医药研究者也开展了中药诱导MSCs向软骨分化的研究，筛选出很多有效的中药复方、提取物和单体。葛根，始载于《本经》，具有解肌退热，生津，透疹，升阳止泻的功效。用于外感发热头痛、项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻；高血压颈项强痛。葛根素是葛根的主要有效成分，属于异黄酮苷类化合物，具有提高免疫，增强心肌收缩力，保护心肌细胞，降低血压，抗血小板聚集等作用。葛根素可诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化，诱导脐带间充质干细胞向成骨细胞分化，通过刺激分化增强成骨细胞活力。但是，葛根素诱导MSCs向软骨分化并未见文献报道。防己，始载于《本经》，具有利水消肿，祛风止痛的功效。用于水肿脚气，小便不利，湿疹疮毒，风湿痹痛，高血压。粉防己碱是从中药防己中提取的一种双苄基异喹啉类生物碱，具有抗炎和免疫抑制作用，可以抑制炎症过程的多个环节，包括抑制炎症细胞功能、抗自由基损伤、抑制炎症介质释放和对抗炎症介质的效应。因此，依据葛根素和粉防己碱的现代药理学研究文献，按照中药“组分配伍”的现代理论，将葛根素和粉防己碱“配伍”使用，共同诱导MSCs向软骨分化，用于骨关节炎的治疗。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种药物组合物及其应用，该药物组合物具有能有效诱导骨髓间充质干细胞向软骨分化的能力，达到治疗骨关节炎的目的，而且本专利技术的药物组合物替代诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化的化学物质或细胞因子或激素，共同诱导BMSCs向软骨分化，克服了由于价格昂贵和安全性问题而无法广泛应用于临床实践的缺陷，而且葛根素和粉防己碱的抗炎、抗氧化、抗肿瘤活性，可提高干细胞移植的成功率，减少排异反应，降低干细胞向肿瘤分化的风险；并且本专利技术的药物组合物诱导骨髓间充质干细胞分化成软骨细胞的效果显著，为干细胞移植治疗骨关节炎疾病提供了一种新的BMSCs诱导药物来源，为治疗骨关节炎疾病提供了一种新的药物来源。为实现上述目的，本专利技术提供一种诱导干细胞成软骨分化的药物组合物，其中，所述药物组合物包括葛根素和粉防己碱。其中，所述干细胞选择骨髓间充质干细胞。特别是，所述葛根素与粉防己碱的摩尔配比为1:(5-125)，优选为1:5。本专利技术另一方面提供上述药物组合物在制备诱导骨髓间充质干细胞分化成软骨细胞的药物或保健品中的应用。其中，所述药物组合物包括葛根素和粉防己碱。特别是，所述葛根素与粉防己碱的摩尔配比为1:(5-125)，优选为1:5。其中，所述药物由葛根素、粉防己碱和药学上可接受的载体组成。特别是，所述药物是通过口服、舌下、经皮、肌肉、皮下、静脉途径给药。本专利技术再一方面提供上述药物组合物在制备治疗骨关节炎的药物中的应用。本专利技术又一方面提供一种上述药物组合物在制备干细胞移植治疗骨关节炎的药物中的应用。本专利技术将葛根素和粉防己碱联合使用，可有效诱导骨髓间充质干细胞分化成软骨细胞，并治疗骨关节炎。本专利技术具有如下的明显优点：1、本专利技术发掘了已知化合物葛根素、粉防己碱新的药用价值，将其配伍后用于诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化，治疗骨关节炎，并制备成诱导骨髓间充质干细胞分化软骨细胞的药物或保健品，和制备成治疗骨关节炎的药物，为葛根素和粉防己碱的临床应用开拓了新的领域。2、本专利技术的序列试验表明葛根素、粉防己碱组合物具有显著的诱导和促进骨髓间充质干细胞分化成软骨细胞的效果，葛根素及粉防己碱配伍均能促进BMSCs增殖；给药诱导3天葛根素-粉防己碱配伍均可促进BMSCs成软骨分化相关基因TGF-β1、Aggrecan、SOX9、collagenII、collagenX、MMP13mRNA表达及相关蛋白SOX9、collagenII、collagenX的表达；给药诱导7天葛根素-粉防己碱配伍均可促进软骨分化相关基因Aggrecan、SOX9、collagenII、collagenX、MMP13mRNA表达及相关蛋白SOX9、collagenII、collagenX、MMP13的表达；并且诱导具有剂量依赖性。3、本专利技术的葛根素、粉防己碱组合物的药理作用强，用于预防和治疗骨关节炎具有良好的药用前景；并且本专利技术的原料葛根素、粉防己碱来源丰富、价廉、临床使用安全，制备工艺简单，可制成各种剂型使用方便，因此易于推广。附图说明图1为葛根素(Pue)、粉防己碱(Tet)及其组合物给药3天对BMSCs成软骨分化SOX9蛋白表达的影响的蛋白印迹图；图2为葛根素(Pue)、粉防己碱(Tet)及其组合物给药3天对BMSCs成软骨分化collagenII蛋白表达的影响的蛋白印迹图；图3为葛根素(Pue)、粉防己碱(Tet)及其组合物给给药3天对BMSCs成软骨分化collagenX蛋白表达的影响的蛋白印迹图；图4为葛根素(Pue)、粉防己碱(Tet)及其组合物给给药3天对BMSCs成软骨分化MMP-13蛋白表达的影响的蛋白印迹图；图5为葛根素(Pue)、粉防己碱(Tet)及其组合物给给药7天对BMSCs成软骨分化SOX9蛋白表达的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种诱导干细胞成软骨分化的药物组合物，其特征是，所述药物组合物包括葛根素和粉防己碱。/n

【技术特征摘要】
1.一种诱导干细胞成软骨分化的药物组合物，其特征是，所述药物组合物包括葛根素和粉防己碱。


2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征是，所述干细胞选择骨髓间充质干细胞。


3.如权利要求1或2所述的药物组合物，其特征是，所述葛根素与粉防己碱的摩尔配比为1:(5-125)。


4.如权利要求1或2所述的药物组合物，其特征是，所述葛根素与粉防己碱的摩尔配比为1:5。


5.如权利要求1-4任一所述药物组合物在制备诱导...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔元璐，陈昳冰，
申请(专利权)人：天津中医药大学，
类型：发明
国别省市：天津;12