【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过与前肽共表达改善蛋白酶的表达序列表的引用本申请含有计算机可读形式的序列表。将所述计算机可读形式通过引用并入本文。
本专利技术涉及用于改善包含成熟蛋白酶的蛋白酶前体酶的表达的方法，所述方法是通过将所述蛋白酶前体酶与所述成熟蛋白酶的前肽作为两种单独的多肽进行共表达来实现的。本专利技术还涉及具有包含适合于这种改善的表达的元件的基因组的原核宿主细胞。
技术介绍
从科学和商业角度看，衍生自天然存在的生物体的酶和其他生物活性多肽都是令人关注的分子。一旦鉴定出这种多肽产物，通常会努力开发优化的生产方法以改善所讨论的多肽的生产。我们已经观察到两种不同的蛋白酶(即强烈火球菌蛋白酶S(PfuS)和霍耐克芽孢杆菌蛋白酶S8A(BH-S8A))与它们各自的前肽一起作为单独的多肽进行共表达，导致PfuS和BH-S8A的表达显著改善。基于此发现，我们提出蛋白酶与前肽作为两种单独的多肽的共表达可用于改善蛋白酶的总体表达。
技术实现思路
本专利技术基于以下出人意料的发现：包含成熟蛋白酶的蛋白酶前体酶与所述蛋白...
【技术保护点】
1.一种原核宿主细胞，所述原核宿主细胞在其基因组中包含：编码包含成熟蛋白酶的蛋白酶前体酶的至少一种多核苷酸和编码所述成熟蛋白酶的前肽的至少一种多核苷酸，其中所述编码蛋白酶前体酶的至少一种多核苷酸和所述编码前肽的至少一种多核苷酸未被表达为翻译融合蛋白。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171023 US 62/575,9111.一种原核宿主细胞，所述原核宿主细胞在其基因组中包含：编码包含成熟蛋白酶的蛋白酶前体酶的至少一种多核苷酸和编码所述成熟蛋白酶的前肽的至少一种多核苷酸，其中所述编码蛋白酶前体酶的至少一种多核苷酸和所述编码前肽的至少一种多核苷酸未被表达为翻译融合蛋白。
2.根据权利要求1所述的原核宿主细胞，所述原核宿主细胞为革兰氏阳性宿主细胞；优选地，所述原核宿主细胞是芽孢杆菌属宿主细胞；更优选地，所述原核宿主细胞选自由以下组成的组：嗜碱芽孢杆菌、高地芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌植物亚种、短芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、灿烂芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、沙福芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌细胞；甚至更优选地，所述原核宿主细胞是地衣芽孢杆菌宿主细胞。
3.根据前述权利要求中任一项所述的原核宿主细胞，其中所述成熟蛋白酶选自由以下组成的组：丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、谷氨酸蛋白酶、金属蛋白酶和天冬酰胺肽裂解酶；优选地，所述成熟蛋白酶是丝氨酸蛋白酶，所述丝氨酸蛋白酶选自由以下组成的组：胰蛋白酶样蛋白酶、胰凝乳蛋白酶样蛋白酶、凝血酶样蛋白酶、弹性蛋白酶样蛋白酶、和枯草杆菌蛋白酶样蛋白酶；更优选地，所述成熟蛋白酶是S8蛋白酶；最优选地，所述成熟蛋白酶是S8A蛋白酶。
4.根据前述权利要求中任一项所述的原核宿主细胞，其中所述成熟蛋白酶是天然蛋白酶或外源蛋白酶。
5.根据前述权利要求中任一项所述的原核宿主细胞，其中所述成熟蛋白酶包含C-末端前肽或N-末端前肽和/或N-末端信号肽。
6.根据前述权利要求中任一项所述的原核宿主细胞，其中所述成熟蛋白酶具有与SEQIDNO:2的成熟多肽具有至少80％序列同一性的氨基酸序列；或其中所述成熟蛋白酶具有与SEQIDNO:6的成熟多肽具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。
7.根据前述权利要求中任一项所述的原核宿主细胞，其中所...
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