一种海洋芽孢杆菌Bacillus sp.JIN118生产胸腺嘧啶的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种海洋芽孢杆菌Bacillus sp.JIN118生产胸腺嘧啶的制备方法，包括以下步骤：(1)将海洋芽孢杆菌Bacillus sp.JIN118活化并发酵，得到发酵液；(2)发酵液离心处理，弃菌体，得到上清；(3)上清液加入等体积乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩得到膏状粗提物；(4)膏状粗提物通过中压制备色谱法进行初级分离，得到粗品；(5)将粗品利用制备型高效液相色谱分离获得胸腺嘧啶纯品。本发明专利技术提供了一种发酵周期短、副产物少、高效制备胸腺嘧啶的方法，解决了化学合成法原料难得、昂贵，反应条件苛刻，污染严重等问题，达到了快速有效获得胸腺嘧啶的目的，为大批量工业发酵提供新技术，具有广阔市场前景。

【技术实现步骤摘要】
一种海洋芽孢杆菌Bacillussp.JIN118生产胸腺嘧啶的制备方法
本专利技术属于微生物发酵
，具体涉及一种海洋芽孢杆菌Bacillussp.JIN118生产胸腺嘧啶的制备方法。
技术介绍
胸腺嘧啶(C5H6N2O2)是遗传物质的重要组成部分，是合成抗艾滋病药物AZT、DDT及相关药物的关键中间体，也是合成抗肿瘤，抗病毒药物β-胸苷的起始原料。胸腺嘧啶具有独特的治疗功效，可以用于治疗胸腺发育不全综合症、运动失调性毛细血管扩张症等免疫缺陷性疾病。国内用于治疗复发性口疮、麻风重症感染等伴有免疫功能低下的疾病。胸腺嘧啶还可用于生化、营养研究及作培养基等，其应用包括：(1)以胸腺嘧啶为模板合成荧光铜纳米簇；(2)作为特异性汞离子吸附剂。目前胸腺嘧啶多以化学合成的方式得到，但合成技术中存在原料难得、原材料昂贵、反应条件较苛刻，污染严重等缺点。因此建立一种高效、无污染且易分离制备的方法尤为重要。本专利技术涉及从一种海洋芽孢杆菌Bacillussp.JIN118的代谢产物中分离纯化获得胸腺嘧啶。本专利技术提供了一种本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种海洋芽孢杆菌Bacillus sp.JIN118生产胸腺嘧啶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)将海洋芽孢杆菌Bacillus sp.JIN118进行活化并发酵，得到发酵液；/n(2)对发酵液进行离心处理，弃菌体，得到上清液；/n(3)上清液加入等体积的乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩得到膏状粗提物；/n(4)膏状粗提物通过中压制备色谱法进行初级分离，得到粗品；/n(5)将粗品利用制备型高效液相色谱分离获得胸腺嘧啶纯品。/n

【技术特征摘要】
20190927 CN 20191092528861.一种海洋芽孢杆菌Bacillussp.JIN118生产胸腺嘧啶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将海洋芽孢杆菌Bacillussp.JIN118进行活化并发酵，得到发酵液；
(2)对发酵液进行离心处理，弃菌体，得到上清液；
(3)上清液加入等体积的乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩得到膏状粗提物；
(4)膏状粗提物通过中压制备色谱法进行初级分离，得到粗品；
(5)将粗品利用制备型高效液相色谱分离获得胸腺嘧啶纯品。


2.根据权利要求1所述的一种海洋芽孢杆菌Bacillussp.JIN118生产胸腺嘧啶的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)具体包括以下步骤：
(1.1)菌种活化
将保存在-80℃冰箱中的海洋芽孢杆菌Bacillussp.JIN118涂布于固体培养基上，30℃培养16-24h。固体培养基配方包含：去离子水1L，蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl10g，琼脂15g。
(1.2)种子液培养
使用灭好菌的牙签挑取单菌落，接种到装有2mL培养基的试管中，30℃、180r/min摇床振荡培养24h。然后以1％的接种量接种至装液量为40％的发酵培养基中，30℃、180r/min摇床振荡培养24h。发酵培养基配方包含：陈海水1L，马铃薯葡萄糖肉汤培养基35g。

【专利技术属性】
技术研发人员：权春善，刘宝全，金梅姝，郭斌梅，李新云，金黎明，俞勇，郑立，
申请(专利权)人：大连民族大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21