一种调控嗜热链球菌胞外多糖含量的方法技术

本发明专利技术提供一种调控嗜热链球菌胞外多糖含量的方法，包括：以嗜热链球菌Benshit的基因组为模板，构建argR基因外源表达质粒pPH12、pPH13和pPH14和argR基因过表达质粒pPH15和弱化表达质粒pPH16；将质粒pET30α、pPH12、pPH13和pPH14进行诱导优化，可溶性蛋白ArgR；将过表达质粒pPH15和弱化表达质粒pPH16转入嗜热链球菌Benshit，得到重组菌株Benshit/pPH15和Benshit/pPH16；将重组菌株Benshit/pPH15和重组菌株Benshit/pPH16置于发酵培养基中进行过夜培养、离心发酵、透析，得到嗜热链球菌胞外多糖EPS。

【技术实现步骤摘要】
一种调控嗜热链球菌胞外多糖含量的方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种调控嗜热链球菌胞外多糖含量的方法。
技术介绍
乳酸菌胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)分为同聚多糖和杂聚多糖，作为食品稳定剂和增稠剂能显著增加粘度防止乳清沉淀。EPS不但有利于益生菌肠内定植，还具有增强机体免疫、抗肿瘤、抗氧化和降血脂等活性功能。嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)是一种产酸性能优良的乳酸菌,其代谢合成EPS能显著改善食品质地和风味，广泛应用于乳制品发酵。嗜热链球菌EPS主要由不同比例的半乳糖和葡萄糖组成，伴有少量乙酰半乳糖、乙酰半乳糖胺、鼠李糖和岩藻糖等单糖。嗜热链球菌EPS生物合成由基因组中大小为15-36kb的eps基因簇控制，其中epsA和epsB编码EPS合成调控蛋白，epsC和epsD决定EPS链长，epsE、epsF、epsG、epsH和epsI是功能性重复糖单元，epsJ、epsK、epsL和epsM是聚合和输出单元。功能性重复糖单元中，epsE编码半乳糖基转移酶，受epsD调控；eps本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种调控嗜热链球菌胞外多糖含量的方法，通过嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)Benshit获得编码精氨酸代谢调控蛋白ArgR，而后采用所述编码精氨酸代谢调控蛋白ArgR对所述嗜热链球菌胞外多糖含量进行调控，所述嗜热链球菌Benshit已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.12098，其特征在于，将所述编码精氨酸代谢调控蛋白ArgR的argR基因进行过表达或弱化，从而使所述热链球菌胞外多糖含量降低或升高，包括如下步骤：/n步骤1，以所述嗜热链球菌Benshit的基因组为模板，构建argR基因外源表达质粒pPH12、arg...

【技术特征摘要】
1.一种调控嗜热链球菌胞外多糖含量的方法，通过嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)Benshit获得编码精氨酸代谢调控蛋白ArgR，而后采用所述编码精氨酸代谢调控蛋白ArgR对所述嗜热链球菌胞外多糖含量进行调控，所述嗜热链球菌Benshit已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.12098，其特征在于，将所述编码精氨酸代谢调控蛋白ArgR的argR基因进行过表达或弱化，从而使所述热链球菌胞外多糖含量降低或升高，包括如下步骤：
步骤1，以所述嗜热链球菌Benshit的基因组为模板，构建argR基因外源表达质粒pPH12、argR基因外源表达质粒pPH13和argR基因外源表达质粒pPH14；
步骤2，以所述嗜热链球菌Benshit的所述基因组为模板，构建argR基因过表达质粒pPH15和argR基因弱化表达质粒pPH16；
步骤3，将质粒pET30α、所述argR基因外源表达质粒pPH12、所述argR基因外源表达质粒pPH13和所述argR基因外源表达质粒pPH14进行诱导优化，得到可溶性的含有His-tag标签的所述精氨酸代谢调控蛋白ArgR；
步骤4，将所述过表达质粒pPH15和弱化表达质粒pPH16转入所述嗜热链球菌Benshit，得到重组菌株Benshit/pPH15和重组菌株Benshit/pPH16；
步骤5，分别将所述重组菌株Benshit/pPH15和所述重组菌株Benshit/pPH16置于发酵培养基中进行过夜培养、离心发酵、透析，得到嗜热链球菌胞外多糖EPS，<...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊智强，艾连中，潘晖，刘欣欣，宋馨，夏永军，王光强，张汇，
申请(专利权)人：上海理工大学，
类型：发明
国别省市：上海;31