使用微生物裂解反应来削减剩余污泥中多种抗生素抗性基因丰度和限制其水平转移的方法技术

本发明专利技术涉及一种削减剩余污泥中多种抗生素抗性基因丰度和限制其水平转移的方法，该方法利用一种寄生型蛭弧菌能够侵入其他宿主细胞并利用宿主细胞内多肽及氨基酸等作为能源和碳源进行自我增值能力，对携带抗生素抗性基因的污泥宿主细胞内的遗传物质进行降解与重构，从而达到削减多种抗性基因丰度的目的，同时对可移动基因元件，即Ⅰ类整合子(intl 1)的降解也有效抑制了抗生素抗性基因在生物转化过程中的水平转移。本发明专利技术所述方法能够显著削减剩余污泥中多种抗性基因，包括磺胺类(sul1、sul2)、四环素类(tetC、tetQ)以及Ⅰ类整合子intl 1)丰度，同时具有设备简易，节约能源，无二次污染，为减轻市政剩余污泥抗生素抗性基因污染，以及开发园林绿化基质土、土壤改良剂等系列污泥资源化产品，拓宽土地利用范围与资源化产品利用量提供一条环境友好、绿色低碳、经济高效的生态途径。

【技术实现步骤摘要】
使用微生物裂解反应来削减剩余污泥中多种抗生素抗性基因丰度和限制其水平转移的方法
本专利技术涉及一种用微生物裂解反应来削减剩余污泥中多种抗生素抗性基因丰度和限制其水平转移的方法，属于环保

技术介绍
作为广谱抗菌药物，抗生素使用极其广泛且用量巨大，而我国的抗生素产量个消费量现一直居世界首位。存在于环境中的抗生素可诱导其胁迫下的细菌产生耐药性，而抗性基因是细菌耐药性形成和传播的基础，可由基因突变或水平转移获得。抗性基因不依赖其产生的生物毒性，并具有遗传性和自我复制性，可通过移动基因元件如质粒、整合子和转座子以结合、转导和转化等方式在物种间转移和传播。故抗性基因难以控制和消除，环境风险强，现被认定为一种新型环境污染物。市政污水处理系统高密度的微生物菌群和优良的混合条件，有利于抗性基因的水平转移和耐药菌的产生。已有研究表明，活性污泥能够显著提高抗性基因的转移频率。污水处理厂现有工艺对抗性基因去除率一般较低，但活性污泥由于亲脂吸附和静电引力通常可富集抗生素，导致抗性基因在污泥中的种类和丰度远高于在污水处理厂进、出水中。因此，污水处本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种使用微生物裂解反应来削减剩余污泥中多种抗生素抗性基因丰度和限制其水平转移的方法，其特征在于，所述方法包括具体如下：/n步骤一：噬菌型微生物发酵剂的制备，所述噬菌型微生物发酵剂包括蛭弧菌、黄色黏球菌、酵母菌和放线菌，所述噬菌型微生物发酵剂的活菌数10

【技术特征摘要】
20191207 CN 20191124545061.一种使用微生物裂解反应来削减剩余污泥中多种抗生素抗性基因丰度和限制其水平转移的方法，其特征在于，所述方法包括具体如下：
步骤一：噬菌型微生物发酵剂的制备，所述噬菌型微生物发酵剂包括蛭弧菌、黄色黏球菌、酵母菌和放线菌，所述噬菌型微生物发酵剂的活菌数108～1010cfu/g。其中蛭弧菌菌株命名为SDWB01，已于2016年5月12号保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.11671，其余菌株均购自《中国微生物菌种保藏中心》，将培养好的蛭弧菌、黄色黏球菌、酵母菌和放线菌菌液复配后离心，取菌泥与保护剂和吸附载体混合制得噬菌型微生物发酵剂；
步骤二：将噬菌型微生物发酵剂直接投入待处理的剩余污泥中，持续进行曝气和搅拌，进行生物裂解反应。


2.根据权利要求1所述的使用微生物裂解反应来削减剩余污泥中多种抗生素抗性基因丰度和限制其水平转移的方法，其特征在于：所述蛭弧菌的活菌数为5.6×1010～7.8×1010cfu/g，所述黄色黏球菌的活菌数为1.6×1010～2.3×1010cfu/g，所述酵母菌的活菌数为2.6×109～5.3×109cfu/g，所述放线菌的活菌数为5.7×108～6.8×108cfu/g。


3.根据权利要求1所述的使用微生物裂解反应来削减剩余污泥中多种抗生素抗性基因丰度和限制其水平转移的方法，其特征在于，步骤一：噬菌型微生物发酵剂的制备，具体如下：
步骤1：菌种培养：分别将蛭弧菌、黄色黏球菌、酵母菌和放线菌接种于灭菌后的独立培养基中培养，分别获得蛭弧菌菌液、黄色黏球菌菌液、酵母菌菌液和放线菌菌液；
步骤2：菌液复配；分别取步骤1中制备得到的蛭弧菌菌液、黄色黏球菌菌液、酵母菌菌液和放线菌菌液，并将上述菌液混合均匀，经离心处理后取沉淀的菌泥；
步骤3：吸附烘干：先向混合机中依次加入保护剂和步骤2中制备得到的菌泥，所述保护剂：步骤2中制备得到的菌泥的质量比为(3-8)：1，混合均匀制得第一混合物；
然后再向第一混合物中加入吸附载体继续混合，所述第一混合物，吸附载体的重量比为1:10，混合均匀制得第二混合物，将第二混合物烘干处理后得到噬菌型微生物发酵剂；
所述吸附载体由稻草秸秆粉和丝...

【专利技术属性】
技术研发人员：余冉，崔婷婷，
申请(专利权)人：余冉，
类型：发明
国别省市：江苏;32