一种氧氟沙星快速灵敏检测的试剂盒及探针和方法技术

本发明专利技术公开了一种氧氟沙星快速灵敏检测的试剂盒及探针和方法，该试剂盒包含：纳米磁珠‑核酸适配体探针、RCA引物、RCA模板、T4 DNA连接酶、Phi29 DNA聚合酶和NaYF

【技术实现步骤摘要】
一种氧氟沙星快速灵敏检测的试剂盒及探针和方法
本专利技术涉及一种用于氧氟沙星检测的试剂盒，具体涉及一种氧氟沙星快速灵敏检测的试剂盒及探针和方法。
技术介绍
氧氟沙星(ofloxacin,OFL)属于氟喹诺酮类抗生素，对葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、淋球菌等致病菌具有良好的抑制作用。作为一种在畜牧业中的常用药物，氧氟沙星被广泛用于治疗和防治牲畜的呼吸道和泌尿系统等疾病。氧氟沙星为人工合成抗生素，难以自然降解，滥用和动物代谢产生的废水进入环境中会在土壤、水体中产生长期污染。氧氟沙星等兽药残留通过食物链在人体的肝肾等靶器官蓄积，使部分人群产生过敏反应或脏器损伤。氧氟沙星等抗生素在自然界或人体的积累还会或导致细菌耐药性增加，致使达到相同的治疗效果需要更大剂量的抗生素使用。因此，一些国家或组织对氧氟沙星的使用做出了严格的规定，我国农业部在2015年发布的第2292号公告中明确禁止氧氟沙星作为兽药使用；欧盟将食品中氧氟沙星残留量规定为不能检出。然而，由于氧氟沙星的疗效和方便使用性，氧氟沙星被用作兽药屡禁不止，动物性食品中氧氟沙星残留抽检超标的案例仍本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种氧氟沙星灵敏检测的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含：纳米磁珠-核酸适配体探针、RCA引物、RCA模板、T4 DNA连接酶、Phi29 DNA聚合酶和NaYF

【技术特征摘要】
1.一种氧氟沙星灵敏检测的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含：纳米磁珠-核酸适配体探针、RCA引物、RCA模板、T4DNA连接酶、Phi29DNA聚合酶和NaYF4:Ce/Tb-cDNA时间分辨荧光探针；
其中，所述纳米磁珠-核酸适配体探针以氨基化Fe3O4纳米颗粒为磁分离载体，在氨基化Fe3O4纳米颗粒表面上固定有核酸序列P1，且该核酸序列P1与核酸适配体通过碱基互补配对杂交；所述核酸序列P1具有如SEQ.IDNO1所示的核苷酸序列；所述核酸适配体具有如SEQ.IDNO2所示的核苷酸序列；
所述RCA引物具有如SEQ.IDNO3所示的核苷酸序列；
所述RCA模板具有如SEQ.IDNO4所示的核苷酸序列；
所述NaYF4:Ce/Tb-cDNA时间分辨荧光探针包含：氨基化NaYF4:Ce/Tb时间分辨纳米颗粒和可与RCA产物互补的核酸序列cDNA；所述核酸探针序列cDNA具有如SEQ.IDNO5所示的核苷酸序列。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包含：T4DNA连接酶缓冲液、Phi29DNA聚合酶缓冲液；所述T4DNA连接酶缓冲液包含：Tris-HClbuffer、MgCl2、二硫苏糖醇、ATP、PEG4000；所述Phi29DNA聚合酶缓冲液包含：Tris-HClbuffer、(NH4)2SO4、MgCl2、二硫苏糖醇。


3.一种用于检测氧氟沙星的探针组，其特征在于，该探针组包含：纳米磁珠-核酸适配体探针和Phi29DNA聚合酶和NaYF4:Ce/Tb-cDNA时间分辨荧光探针；
其中，所述纳米磁珠-核酸适配体探针以氨基化Fe3O4纳米颗粒为磁分离载体，氨基化Fe3O4纳米颗粒表面上固定有核酸序列P1，且该核酸序列P1与核酸适配体通过碱基互补配对杂交；所述核酸序列P1具有如SEQ.IDNO1所示的核苷酸序列；所述核酸适配体具有如SEQ.IDNO2所示的核苷酸序列；
所述NaYF4:Ce/Tb-cDNA时间分辨荧光探针包含：氨基化NaYF4:Ce/Tb时间分辨荧光纳米颗粒和与RCA产物互补的核酸序列cDNA；所述核酸探针cDNA具有如SEQ.IDNO5所示的核苷酸序列。


4.一种与如权利要求1中所述核酸适配体部分互补的核酸序列P1，其特征在于，所述核酸序列P1具有如SEQ.IDNO1所示的核苷酸序列。


5.一种与如权利要求4所述的核酸序列P1部分互补的RCA引物，其特征在于，所述RCA引物具有如SEQ.IDNO3所示的核苷酸序列。


6.一种与如权利要求5所述的R...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄玉坤，王冲，陈祥贵，杜钢，王力均，杨潇，
申请(专利权)人：西华大学，
类型：发明
国别省市：四川;51