结直肠癌奥沙利铂耐药相关的lncRNA的筛选及应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，具体涉及结直肠癌奥沙利铂耐药相关的lncRNA的筛选及应用，采用逐渐提高结直肠癌细胞株中奥沙利铂终浓度的方式成功诱导了结直肠癌奥沙利铂耐药细胞株SW480/OxR和HCT116/OxR。本发明专利技术对结直肠癌奥沙利铂耐药细胞株中耐药相关的lncRNA的筛选及应用进行了研究，通过qRT‑PCR检测发现lncRNA LINC00460和RP11‑260A9.6在SW480/OxR细胞株中高表达。本发明专利技术采用特异性siRNA沉默SW480/OxR细胞中的LINC00460，在奥沙利铂处理下，LINC00460的下调对细胞生长呈现剂量依赖和时间依赖的抑制作用，恢复了SW480/OxR细胞对奥沙利铂的敏感性，为解决肿瘤耐药性问题提供了新的思路和方案。

【技术实现步骤摘要】
结直肠癌奥沙利铂耐药相关的lncRNA的筛选及应用
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及结直肠癌奥沙利铂耐药相关的lncRNA的筛选及应用。
技术介绍
结直肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一，也是我国癌症相关死亡的主要原因，结直肠癌高发于50岁以上人群，其中发病率男性高于女性，并且随着年龄的增长发病率和死亡率逐渐升高。早期结直肠癌无明显症状，一般难以诊断，60-70％的确诊病例是在疾病的晚期被发现的。临床上结直肠癌的治疗以手术和化疗为主，其中，奥沙利铂是治疗结直肠癌最有效的一线化疗药物之一，并且是第一种被批准用于结直肠癌治疗的铂类药物；然而，多数患者中奥沙利铂单独或联合用药的固有或获得性耐药导致了治疗失败，几乎所有转移性结直肠癌最终都会产生奥沙利铂耐药性。目前针对结直肠癌的筛查方法主要分为非侵入性和侵入性检测，每种方法都存在特定的优缺点。如粪便潜血试验和粪便免疫化学试验对发现肿瘤前病变的敏感性低，假阳性率高；而结肠镜和软性乙状结肠镜属于侵入性诊断技术，并且依从率低。因此，有必要发展新的具有高敏感性和特异性的非侵入性生物标志物，以帮助结直肠本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.结直肠癌奥沙利铂耐药相关的lncRNA的筛选，其特征在于，通过结直肠癌细胞株SW480和HCT116诱导为结直肠癌奥沙利铂耐药细胞株SW480/OxR和HCT116/OxR，达到构建耐药细胞株模型后筛选耐药相关lncRNA的目的。/n

【技术特征摘要】
1.结直肠癌奥沙利铂耐药相关的lncRNA的筛选，其特征在于，通过结直肠癌细胞株SW480和HCT116诱导为结直肠癌奥沙利铂耐药细胞株SW480/OxR和HCT116/OxR，达到构建耐药细胞株模型后筛选耐药相关lncRNA的目的。


2.根据权利要求书1所述的耐药细胞株模型，其特征在于，采用逐渐提高SW480和HCT116细胞培养液中奥沙利铂终浓度的方法，实现结直肠癌奥沙利铂耐药细胞株SW480/OxR和HCT116/OxR的诱导。


3.根据权利要求书3所述耐药细胞株的诱导，奥沙利铂处理浓度为1-10μM。


4.根据权利要求书1所述的筛选，通过qRT-PCR检测筛选出lncRNALINC00460和RP11-260A9.6在结直肠癌奥沙利铂耐药细胞株SW480/OxR中高表达。


5.根据权利要求书4所述lncRNA的qRT-PCR检测，将lncRNA与Oligo(dT)、RandomPrimer(N9)及适量的DEPC水混匀，在70℃下加热10min...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟祥凤，姜晓宏，王琛，于静，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32