一种高效脂肪细胞靶向阳离子基因载体、其制备方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种高效脂肪细胞靶向阳离子基因载体及其制备方法和应用，载体包括线性聚α‑赖氨酸、接枝在所述线性聚α‑赖氨酸上的脂肪细胞靶向肽和对甲苯磺酰基保护的精氨酸；线性聚α‑赖氨酸与对甲苯磺酰基保护的精氨酸的摩尔比为1:10～100；所述线性聚α‑赖氨酸与脂肪细胞靶向肽的摩尔比为1:1～30。上述载体具有较高转染效率和较低细胞毒性。ATS‑PLL‑RT阳离子载体在基因载体设计和抗肥胖症领域具有广泛的应用前景。ATS‑PLL‑RT基因载体在前体脂肪细胞和成熟脂肪细胞中的最佳转染效率是阳离子基因载体黄金标准“PEI25k”的最佳转染效率的十多倍，且在最佳转染效率的比例时细胞存活率均在90％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种高效脂肪细胞靶向阳离子基因载体、其制备方法及其应用
本专利技术属于生物医用材料
，尤其涉及一种高效脂肪靶向阳离子基因载体、其制备方法及其应用。
技术介绍
肥胖是由于脂肪在体内过度积累所致的一种疾病状态。近年来，由于饮食结构和生活方式的改变，肥胖的发病率在世界范围内急剧上升。[参见RosenED,SpiegelmanBM.Adipocytesasregulatorsofenergybalanceandglucosehomeostasis,Nature.2006,444:847-853.]。肥胖能够引发胰岛素抵抗、高血糖、高血压、高血脂等一系列代谢综合征，成为导致II型糖尿病以及心血管疾病发病的重要独立风险因素。因此，肥胖已成为危害人类健康并亟待解决的重要公共问题。然而，大部分市售的减肥药效果甚微，且伴随着出现中风和心脏病等疾病发生。[参见CookeD,BloomS.Theobesitypipeline:currentstrategiesinthedevelopmentofanti-obesitydrugs,NatureRevie本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高效脂肪细胞靶向阳离子基因载体，包括线性聚α-赖氨酸、接枝在所述线性聚α-赖氨酸上的脂肪细胞靶向肽和对甲苯磺酰基保护的精氨酸；/n所述线性聚α-赖氨酸与对甲苯磺酰基保护的精氨酸的摩尔比为1:(10～100)；/n所述线性聚α-赖氨酸与脂肪细胞靶向肽的摩尔比为1:(1～30)。/n

【技术特征摘要】
1.一种高效脂肪细胞靶向阳离子基因载体，包括线性聚α-赖氨酸、接枝在所述线性聚α-赖氨酸上的脂肪细胞靶向肽和对甲苯磺酰基保护的精氨酸；
所述线性聚α-赖氨酸与对甲苯磺酰基保护的精氨酸的摩尔比为1:(10～100)；
所述线性聚α-赖氨酸与脂肪细胞靶向肽的摩尔比为1:(1～30)。


2.根据权利要求1所述的高效脂肪细胞靶向阳离子基因载体，其特征在于，所述线性聚α-赖氨酸的数均分子量为3000～30000Da。


3.根据权利要求1所述的高效脂肪细胞靶向阳离子基因载体，其特征在于，所述脂肪细胞靶向肽是一个多肽分子ATS-SH，其序列为GKGGEAKDGGC。


4.一种权利要求1所述高效脂肪细胞靶向阳离子基因载体的制备方法，包括以下步骤：
a)将对甲苯磺酰基和叔丁氧羰基双保护的精氨酸进行活化，再加入线性聚-α-赖氨酸的水溶液进行反应；所述线性聚-α-赖氨酸与对甲苯磺酰基和叔丁氧羰基双保护的精氨酸的摩尔比为1：(10～100)；
b)将所述步骤a)反应后的溶液透析、冻干，得到冻干产物；
c)将所述冻干产物与三氟乙酸反应，沉降产物，真空抽干、透析和冻干后，得到阳离子聚合物PLL-RT；
d)将所述阳离子聚合物PLL-RT溶解在水中，搅拌，加入BMPS溶液反应；
e)再加入脂肪细胞靶向肽水溶液进行反应，所述聚α-赖氨酸与脂肪细胞靶向肽的摩尔比为1:(1～30)；

【专利技术属性】
技术研发人员：田华雨，陈杰，林琳，方华攀，郭兆培，徐彩娜，陈学思，
申请(专利权)人：中国科学院长春应用化学研究所，
类型：发明
国别省市：吉林;22