mOrange和vp28穿梭载体富集至卤虫无节幼体的方法技术

本发明专利技术提供了一种mOrange和vp28穿梭载体富集至卤虫无节幼体的方法，包括步骤：根据检索到的mOrange和vp28的基因通过序列组合、设计得到mOrange和vp28融合基因，进行密码子优化为优化后的mOrange和vp28融合基因；再和pRL489质粒连接，构建mOrange和vp28穿梭载体并转入大肠杆菌，大肠杆菌在含0.5wt％甲醛的磷酸盐溶液内灭活，最后将含有pRL489‑vp28‑mOrange质粒的大肠杆菌喂食到卤虫无节幼体内；本发明专利技术充分利用mOrange基因荧光特性，使得融合载体基因的表达易于检测分析，并通过荧光标记物这一特性减少了繁琐的分子、蛋白检测，从而节约时间与成本。

【技术实现步骤摘要】
mOrange和vp28穿梭载体富集至卤虫无节幼体的方法
本专利技术属于分子生物学
，具体涉及一种mOrange和vp28穿梭载体富集至卤虫无节幼体的方法。
技术介绍
Gomez-GilB将恩氟沙星和土霉素两种抗菌剂单独通过生物包封至卤虫无节幼体，通过富集1h、2h、3h、4h、8h和24h确定生物包封的最短时间，结果表明卤虫无节幼体可以在大约1-8h的时间段内生物包封最大浓度的颗粒，这取决于摄取的物质种类与浓度，且在此之后，由于生物体在摄取物质和废物排泄之间达到平衡，因此可能不再生物包封物质。MatthewC证明了甲硝唑通过生物包封后的卤虫无节幼体，可用于治疗易感染传染病水生动物，有效避免了直接投放甲硝唑对啮齿动物的致癌性、藻类细胞以及对水环境潜在药物的毒性作用。卤虫作为非选择性过滤的动物，并提供一种理想的可溶性转运药品机制，通过生物包封可以进一步丰富卤虫的营养价值。前人的研究中富集的大多为抗生素等药物，并未利用大肠杆菌等载体进行富集工作。
技术实现思路
针对现有技术中的不足，本专利技术的目的是提供一种mOr本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种mOrange和vp28穿梭载体富集至卤虫无节幼体的方法，其特征在于：其包括如下步骤：/n(1)、根据GenBank上检索到的mOrange和vp28的基因，经过序列组合、设计得到mOrange和vp28融合基因，其碱基序列为SEQ ID.NO.3，再进行密码子优化，得到优化后的mOrange和vp28融合基因，其碱基序列为SEQ ID.NO.4；/n(2)、步骤(1)的优化后的mOrange和vp28融合基因和pRL489质粒连接，构建mOrange和vp28穿梭载体并转入大肠杆菌，得到含有pRL489-vp28-mOrange质粒的大肠杆菌；/n(3)、将步骤(2)的含有pRL48...

【技术特征摘要】
1.一种mOrange和vp28穿梭载体富集至卤虫无节幼体的方法，其特征在于：其包括如下步骤：
(1)、根据GenBank上检索到的mOrange和vp28的基因，经过序列组合、设计得到mOrange和vp28融合基因，其碱基序列为SEQID.NO.3，再进行密码子优化，得到优化后的mOrange和vp28融合基因，其碱基序列为SEQID.NO.4；
(2)、步骤(1)的优化后的mOrange和vp28融合基因和pRL489质粒连接，构建mOrange和vp28穿梭载体并转入大肠杆菌，得到含有pRL48...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾睿，徐杨，彭稳，何培民，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：上海;31